白藜芦醇治疗类风湿关节炎研究进展

<正>类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是以侵蚀性关节炎为主要临床表现的慢性、全身性的自身免疫性疾病,是临床常见的风湿免疫性疾病之一,可发生于任何年龄阶段。RA基本病理表现为滑膜炎症、滑膜血管的形成,滑膜增厚及滑膜纤维化样改变,若不对其进行及时有效地干预,极易导致关节畸形、关节功能丧失,甚至伴发关节外系统受累,     

基于JAK-2/STAT3信号通路观察维生素D3对炎症相关性结直肠癌的影响

目的 基于Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路观察维生素D₃(VitD₃)对炎症相关性结直肠癌(CAC)的影响。方法 取30只雄性昆明小鼠给予葡聚糖硫酸钠(DSS)造模,并随机分为模型组、VitD₃低剂量组、VitD₃高剂量组,另取10只正常小鼠作为对照组。VitD₃低、高剂量组造模过程中分别给予10 IU·g-1、20 IU·g-1的VitD₃灌胃,灌胃体积2 mL,连续给药28 d;对照组和模型组均给予等体积花生油。造模第7、14、21、28 d称取小鼠重量;造模结束后,取出结直肠组织,计算成瘤数量;HE染色、ELISA、免疫组化检测小鼠结直肠组织形态、组织匀浆液上清中炎症因子含量及上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达;RT-qPCR检测H19、let-7a、c-Myc mRNA、HMGA2 mRNA表达;Western blotting检测JAK2/STAT3通路蛋白...     

miR-22-3p对蓝光暴露下大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及其机制

目的　探讨miR-22-3p对蓝光暴露下的大鼠视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用及机制。方法　取36只清洁级SD大鼠, 将12只SD大鼠随机分为2组:对照组与蓝光暴露组,每组6只。对照组采用正常的12 h明暗循环饲养;蓝光暴露组大鼠先进行暗适应24 h,随后采用复方托吡卡胺散瞳,将大鼠暴露在蓝光（光照强度1500 lux）下2 h;另取24只大鼠随机分为4组:对照组、蓝光暴露组、AAV-miR22组、AAV-miR22&PTEN组,每组6只。对照组采用正常的12 h明暗循环饲养,其余3组均接受蓝光暴露处理,AAV-miR22组注射1 μL含 2.5×10⁹ vg(基因组拷贝数)的AAV-7m8-miR-22-3p,AAV-miR22&PTEN组注射1 μL含2.5×10⁹ vg的AAV-7m8-miR-22-3p&PTEN,对照组与蓝光暴露组向大鼠玻璃体内注射1 μL生理盐水,注射结束使用氧氟沙星眼膏预防感染。取大鼠眼球组织行HE染色,在光学显微镜下观察检测神经节细胞层（GCL）、GCL至外核层 (ONL)的厚度,其中包含有内丛状层（IPL）、内核层(INL)、外丛状层（OPL）;采用NeuN免疫荧光组织化学染色标记RGC,计数视网膜上NeuN标记的阳性细胞数;TUNEL染色检测细胞凋亡;采用Lipofectamine 2000转染试剂盒转染阴性对照、miR-22-3p mimic、miR-22-3p inhibitor至RGC-5细胞,转染48 h后测定miR-22-3p表达量,转染成功即可采用Western blot检测PTEN蛋白表达情况;采用实时荧光定量PCR检测miR-22-3p表达,Western blot检测PTEN、p-Akt、Akt与Nrf2蛋白表达情况;双荧光素酶报告实验在酶标仪上测定荧光素酶活性。结果　HE染色结果证实:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织萎缩,视网膜GCL、GCL至ONL厚度变薄（P<0.05）。另外,NeuN免疫荧光组织化学染色发现:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织RGC数减少（P<0.05）。实时荧光定量PCR实验结果显示:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织内miR-22-3p相对表达量降低（P<0.05）。Western blot检测结果显示:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织内PTEN蛋白的表达水平升高,Nrf2蛋白的表达水平和p-Akt/Akt蛋白表达比值均降低（均为P<0.05）;miR-22-3p能够负向调控PTEN蛋白在RGC内的表达水平（P<0.05）。HE染色结果显示:过表达miR-22-3p能够缓解蓝光诱导的大鼠视网膜萎缩,并且能够提高大鼠视网膜GCL、GCL至ONL厚度。NeuN免疫荧光组织化学染色结果证实:过表达miR-22-3p能够通过靶向抑制PTEN表达提高蓝光暴露大鼠视网膜上RGC数。TUNEL实验结果证实:miR-22-3p能够通过抑制PTEN表达缓解蓝光诱导的大鼠视网膜RGC凋亡。结论　miR-22-3p能够通过靶向抑制PTEN的表达,激活PI3K/Akt/Nrf2通路,缓解蓝光诱导的大鼠RGC凋亡。     

间充质干细胞通过调节趋化因子及血管内皮生长因子异常表达减轻大鼠碱烧伤角膜的机制研究

目的分析趋化因子及血管内皮生长因子异常表达与大鼠碱烧伤角膜的关系及间充质干细胞的调节作用,为相关治疗提供参考。方法 50只大鼠(100眼)随机分为5组:对照组、碱烧伤角膜模型组、间充质干细胞小剂量组、间充质干细胞中剂量和间充质干细胞高剂量组(n=20)。除对照组大鼠给予等量的生理盐水处理外,其余各组大鼠采用1 mol/L的Na OH溶液复制大鼠碱烧伤角膜模型,间充质干细胞治疗组采用对应剂量(0.25×10~6,0.5×10~6,1.5×10~6)进行治疗,对照组大鼠给予等量的生理盐水。Western Blotting法分析各组大鼠角膜组织中趋化因子CC趋化因子配体(CCL)2、CCL3、CCL8、CCL14、趋化因子基质细胞衍生因子-1受体4(CXCR4)、基质细胞衍生因子1(SDF1)、VEGF、VEGFR及白细胞介素的表达变化。结果碱烧伤大鼠角膜CCL2、CCL3、CCL8、CCL14、IL-1β、IL-2及IL-6、VEGF及VEGFR表达明显增强,而SDF1和CXCR4表达明显减弱,且与对照组相比差异有显著性(P0.05);经间充质干细胞治疗后上述蛋白的异常表达得到部分恢复(P0.05),且呈剂量依赖性。结论间充质干细胞能够通过调控趋化因子及血管内皮生长因子表达发挥改善大鼠碱烧伤角膜的作用,且作用具有剂量依赖性效果。     

桂枝汤类方联合甲氨蝶呤治疗早期类风湿关节炎疗效观察

目的 观察桂枝汤类方联合甲氨蝶呤治疗早期类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的临床疗效。方法 将120例早期RA患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组60例,最终治疗组完成56例,对照组完成55例。对照组给予常规西药甲氨蝶呤、叶酸治疗,治疗组在对照组治疗基础上,根据风寒湿痹以及风湿热痹两种不同证型,分别采用桂枝加附子汤、桂枝芍药知母汤。两组均治疗24周,观察并比较两组患者关节压痛数、关节肿胀数、晨僵时间、视觉模拟量表（visual analogue scale,VAS）评分、28个关节疾病活动性评分（disease activity score-28,DAS28）、红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）、C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、中医证候积分。结果 治疗后两组患者的关节压痛数、关节肿痛数、晨僵时间、VAS评分、DAS28均明显降低（P＜0.05）,外周血ESR、CRP水平均明显降低（P＜0.05）,中医证候明显改善（P＜0.05）,且治疗组上述各项指标的改善程度均优于对照组（P＜0.05）。结论 桂枝汤类方联合甲氨蝶呤治疗早期RA的效果优于单用常规西药甲氨蝶呤的效果,能够明显改善早期RA患者的临床症状,控制RA的病情进展。     

藏药榜嘎抗流感的网络药理学分析

目的 通过网络药理学分析,探讨榜嘎抗流感病毒及抗炎的活性成分与作用机制。方法 从中国知网及Pubmed数据库收集整理榜嘎中1985年1月1日至2021年5月31日分离鉴定的化合物,通过SIB数据库根据ADME参数筛选出具有生物活性的成分。利用SwissTarget Prediction平台预测活性成分的作用靶点。在OMIM及GeneCards数据库中查找流感病毒及炎症的靶点,运用Venny2.1.0工具获取榜嘎与流感病毒及榜嘎与炎症靶点的交集靶点,在STRING数据库中分析蛋白互作关系,并运用Cytoscape3.6.0软件构建成分-疾病-关键靶点网络图以及核心靶点网络图。利用DAVID6.8数据库进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。结果 筛选得到活性成分73个,核心化合物17个,作用靶点841个,榜嘎与流感病毒交集靶点94个,与炎症交集靶点142个。GO功能分析得到榜嘎抗流感病毒生物过程181个,分子功能42个,细胞组成25个;KEGG富集分析获得榜嘎抗流感病毒信号通路84条,主要涉及TNF、丙型肝炎和癌症信号通路。GO功能分析得到榜嘎抗炎生物过程232个、分子功能52个、细胞组...     

揿针联合口服中药治疗儿童肺脾虚弱型慢性单纯性鼻炎30例

目的:观察揿针穴位埋针联合口服中药治疗儿童肺脾虚弱型慢性单纯性鼻炎的临床疗效.方法 :将临床收集的90例肺脾虚弱型慢性单纯性鼻炎患儿随机分为A组、B组和C组,每组30例.A组单用揿针穴位埋针治疗,B组口服中药治疗,C组采用揿针穴位埋针联合口服中药治疗.比较三组患儿治疗前后临床症状、体征(鼻塞、流涕、打鼾、张口呼吸、下鼻...     

超高效液相色谱串联质谱法测定中药何首乌中10种真菌毒素的含量

目的:建立超高效液相色谱串联-质谱同时测定何首乌中10种真菌毒素的方法。方法:样品经70%甲醇提取,再经亲水亲脂平衡(HLB)柱净化处理后进样分析。样品采用Welch Ultimate XB C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.5 μm)进行分离,流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(含5 mmol/L乙酸铵)(B),梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为40 ℃;采用电喷雾离子源(ESI)电离样品,多反应监测(MRM)模式下采用基质匹配标准曲线法进行定量分析。结果:10种真菌毒素在各自线性范围内线性关系良好(r>0.999 0),检测限(LODs)和定量限(LOQs)分别介于0.50~15 μg/kg和1.5~50 μg/kg之间。在低、中、高浓度下,10种真菌毒素的平均回收率为62.5%～116.1%;中浓度下,10种真菌毒素的精密度在2.8%～8.7%。结论:该法灵敏度高、结果准确可靠,适用于何首乌中多种真菌毒素的同步测定。     

间充质干细胞联合环孢霉素A对大鼠角膜移植排斥的效果分析及炎症反应因子的参与作用研究

目的探讨间充质干细胞联合环孢霉素A对角膜移植排斥的效果及炎症反应因子的参与作用。方法采用远交系Wistar雌性大鼠和SD雌性大鼠建立穿透性角膜移植排斥模型。随机分为空白对照组(尾静脉及肌肉分别注射不含药物的PBS,0.1 ml/kg和1 ml/kg),角膜移植排斥组(尾静脉及肌肉分别注射不含药物的PBS,0.1 ml/kg和1ml/kg)、治疗高剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 10 mg/(kg·d)]、中剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 5 mg/(kg·d)]、低剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 2 mg/(kg·d)],每组8只。观察各组大鼠治疗后的角膜植片存活情况,并检测血清中相关的炎症反应蛋白水平。结果与空白对照组比较,角膜移植排斥组大鼠的角膜植片存活时间明显缩短(P0.01),而治疗组大鼠的存活时间明显延长,且存在剂量依赖性(P0.05,P0.01);角膜移植排斥组大鼠炎症反应因子白介素细胞(IL)-2、IL-6、IL-10、纤维介素蛋白2和单核细胞趋化蛋白1、转化生长因子(TGF-β)、Smad1及Smad3、内质网跨膜蛋白肌醇酶1(IRE1)及其下游转录因子(XBP1)水平明显高于对照组(P0.01),而治疗组大鼠的上述炎症因子水平明显降低,且存在剂量依赖性(P0.05,P0.01)。结论间充质干细胞联合环孢霉素A对角膜移植排斥有良好的治疗效果,且其作用可能与调控体内炎症反应因子水平异常有关。     

桂枝汤类方治疗类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎是临床常见的慢性难治性风湿病,临床治愈率低,致残率高.运用中医药治疗痹证具有悠久的历史,汉代张仲景将桂枝芍药知母汤用于痹证的治疗,开创了调和营卫法治疗痹证的先河,后世医家在此基础上运用桂枝汤类方加减化裁治疗痹证收效良好,可明显减轻患者的临床症状.并且,临床实践与实验研究也证实桂枝汤类方可以有效缓解类风湿关节...