Ⅰ型变态反应生物学治疗的研究进展

Ⅰ型变态反应生物学治疗已得到全世界的广泛关注，其研究近期也有了长足进展。现主要从特异性和非特异性治疗两大方面就其发展进行总结、归纳，对Ⅰ型变态反应病的临床治疗有一定的参考价值。     

复方高渗盐溶液对失血性休克大鼠脾脏细胞凋亡的影响

目的 探讨复方高渗盐溶液（高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液,HSH）对失血性休克大鼠脾脏细胞凋亡的影响。方法 采用SD大鼠失血性休克模型,分别用HSH或乳酸林格氏液（RL）复苏,复苏后1、2、4小时处死动物,使用HE染色、透射电镜及TUNEL法观察其脾脏中淋巴细胞凋亡情况。结果 RL组复苏后1小时、HSH组各时相点凋亡指数（AI）与假手术组比较无明显差异（P〉0．05）。HSH组各时相点AI无明显差异（P〉0．05）。RL复苏组除复苏后1小时外,AI均明显高于HSH组（P〈0．05）。结论 HSH能减少失血性休克诱导的脾脏淋巴细胞过度凋亡,对失血性休克后机体免疫功能紊乱起保护作用。     

颗粒溶素的表达纯化及生物学活性分析

目的:采用原核表达系统对颗粒溶素(granulysin,GNLY)进行体外表达,纯化及活性鉴定.方法:以体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC)为模板,RT-PCR扩增编码GNLY的cDNA片段,插入pMD-18-T 载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a( ) 中,构建重组表达质粒pET28a( )-GNLY,转化大肠杆菌BL21(DE3) plysS,IPTG诱导表达融合蛋白,包涵体经变复性后用Ni亲和层析纯化,CFU法测定蛋白活性.结果:成功地将GNLY cDNA片段插入载体pET28a( )中,构建了表达质粒pET28a( )-GNLY.经诱导在原核表达系统中以包涵体形式高效表达了相对分子质量为9 000的融合蛋白,变复性纯化后的GNLY蛋白经CFU法检测,发现其具有细胞毒活性且细胞毒作用具有剂量依赖性.结论:本实验利用原核表达系统成功地表达了具有生物学活性的GNLY,为研究其功能、作用机制及临床应用奠定了基础.     

人TACI-linker-BR3双受体融合基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:构建人双受体融合基因真核表达载体--pcDNA3.1( )-TACI-linker-BR3-IgGFc,观察其在COS-7细胞中的表达.方法:应用基因工程技术构建重组载体,脂质体转染COS-7细胞,通过Western印迹、ELISA以及免疫组化方法,检测目的蛋白的表达及其与BAFF、APRIL蛋白相互作用情况.结果:融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达,并分泌至上清,转染效率能达到48%,融合蛋白能与BAFF、APRIL蛋白有效结合而且融合蛋白中分子标签IgGFc未影响双受体融合蛋白的结构及其生物学活性.结论:人TACI-linker-BR3双受体基因与IgGFc融合基因载体构建成功,表达的融合蛋白具有生物学活性,为进一步探讨SLE等自身免疫疾病的发病机制和生物学治疗方法奠定了基础.     

慢性心理应激对大鼠子宫内膜Hoxa-10表达的影响

目的探讨慢性心理应激对大鼠子宫内膜Hoxa-10表达的影响。方法取40只同日龄的雌性大鼠,观察组与对照组各20只。对照组在实验室群居饲养,观察组按浸笼模型制模。采用免疫组化S-P法,检测大鼠动情周期子宫内膜雌激素受体、孕激素受体及Hoxa-10的表达水平。结果观察组动情间期孕激素受体表达较对照组下调(P0.05)、动情间期Hoxa-10表达较对照组下调(P0.05),Hoxa-10表达和孕激素受体表达呈正相关(直线正相关,r=0.777)。结论慢性心理应激能降低大鼠动情间期Hoxa-10表达,Hoxa-10表达缺陷可能是导致子宫容受性降低的重要原因之一。     

酸化中药液熏洗联合超短波对膝骨性关节炎患者血清hs-CRP的影响

目的：观察酸化中药液熏洗联合超短波治疗膝骨性关节炎对患者血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）的影响。方法150例膝骨性关节炎患者随机分为三组（n=50）：A组采用酸化中药液熏洗结合短波治疗;B组采用酸化中药液熏洗治疗;C组采用超短波治疗。三组患者分别在治疗后2周、1月、3月采用免疫荧光法检测患者血清hs-CRP水平。结果三组治疗前血清hs-CRP差异无统计学意义（F=3.73,P＞0.05）;A组患者治疗后2周、1月、3月与治疗前血清hs-CRP比较,差异有统计学意义（t分别=-17.84、-16.12、-9.76,P均＜0.05）;B组患者治疗后2周、1月、3月与治疗前血清hs-CRP比较,差异有统计学意义（t分别=-13.88、-12.40、-2.73,P均＜0.05）;C组患者治疗后2周、1月与治疗前血清hs-CRP比较,差异有统计学意义（t分别=-7.02、-3.47,P均＜0.05）;治疗后2周、1月、3月三组间血清CRP下降水平比较,差异有统计学意义（F分别=24.03、42.71、58.41,P均＜0.05）。结论对于膝骨性关节炎的治疗,酸化中药液熏洗结合短波治疗能持续有效降低血清hs-CRP水平。     

肝部分切除+定容失血性休克大鼠肝脏cDNA表达谱芯片结果分析

目的 利用cDNA表达谱芯片分析肝部分切除+定容失血性休克前和休克后24小时大鼠肝脏差异基因,并初步分析差异基因信号通路和网络调控. 方法 11只大鼠接受肝左外叶切除和2.5ml/100g体重定容失血性休克,选其中3只存活大鼠麻醉后失血前切除肝左外叶(A组),对于存活24小时的大鼠再次取肝脏(B组)行cDNA表达谱芯片(含21793个基因)分析.对差异基因行Pathway、Go、Network分析.使用RT-PCR对两组中基因Aldh1a1、Aldh1a7、Aoc3、Cyp26a1、Hdc1、Ephx2和Beta-actin进行分析,验证cDNA芯片的准确性. 结果 4只大鼠存活24小时,表达谱芯片筛查出两组差异表达下调基因634个,表达上调基因513个.差异基因涉及主要信号通路包括胆固醇代谢、细胞外刺激反应、甾醇代谢、激素刺激反应、甾体类激素刺激反应、类固醇代谢、内源性刺激反应、氧化还原反应、有机物质反应、脂肪酸代谢.结论 氧化还原和脂代谢信号通路在创伤失血性休克病理过程中起重要作用.     

酶工作液用量对血清甘油三酯测定的影响

目前基层医院普遍采用酶法试剂盒测定血清甘油三酯(TG) ,以 72 1型分光光度计比色 ,但多数反映此法的重复性较差 [1 ,2 ] 。始初笔者认为是用具不洁、标本取量少而不准确或分光光度计性能差引起的偏差。然而 ,在最大程度排除上述因素外 ,按温洲东瓯生物工程有限公司生产的液体型 TG试剂盒说明书操作 ,其测定值的重复性仍较差。为提高酶法试剂盒测定血清甘油三酯的精密度 ,笔者把酶工作液用量由 1.0 ml改为 1.2 ml后 ,测定结果的精密度比原法 (试剂盒说明书中的方法 )明显提高。现报告如下。1　材料和方法1.1　试剂　采用温州东瓯生物工程…     

心理应激与子宫容受性综述

大量研究证实心理应激可引起生殖内分泌的改变，继而引发诸多妇科内分泌疾病，如闭经、月经紊乱、不孕症、经前期综合症、无排卵、卵巢早衰等。临床许多报道表明，心理应激可导致胚胎移植的失败率升高，推测负性心理应激影响生育的原因之一是对子宫容受性的改变。     

生长激素联合生长抑素对重症急性胰腺炎细胞免疫的影响

目的：探讨联合应用八肽生长抑素（善宁）、生长激素（思增）治疗重症急性胰腺炎（SAP）对机体细胞免疫功能的影响。方法：36例重症急性胰腺炎随机分为对照组（n=12），单用八肽生长抑素（善宁组，n=12），联合应用善宁和生长激素（联合组，n=12）。比较3组病人d1、d14血浆中CD4、cd8阳性细胞百分比，CD4／CD8比值，住院天数、并发症发生率和病死率。结果：联合组并发症发生率明显低于善宁组及对照组（P〈0．05）；联合组d14 CD4阳性细胞百分比、CD4／CD8值高于单用善宁组和对照组（P〈0．05）。结论：联合应用生长抑素和生长激素改善SAP患者的细胞免疫功能。降低了临床并发症发生率。