运用蛋白质组学技术研究EB病毒诱导鼻咽癌细胞CNE2表达变化的蛋白质

【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质，为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质，通过双向电泳分离。运用软件比较分析上述两组的蛋白质表达图谱，寻找表达有差异的蛋白质点。从凝胶上切下差异蛋白质点，通过基质辅助激光解吸，离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。【结果】图像分析显示，EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞之间存在一些明显差异的蛋白质点。通过MALDI-TOF-MS成功地鉴定了其中4个蛋白质点，EB病毒感染CNE2细胞后蛋白质GRP78和硫氧还蛋白过氧化物酶1表达上调，蛋白质肌动蛋白胞浆组分2和蛋白酶体。链表达下调。【结论】EB病毒感染鼻咽上皮细胞后引起生物学变化的分子机制可能包括：①诱导细胞大量合成蛋白质以促进增生．同时上调蛋白质GRP78的表达而抗凋亡；②提高细胞内氧化状态而诱导蛋白质硫氧还蛋白过氧化物酶1的表达，并可能通过该蛋白质调控NF-κB和AP-1来影响细胞生长。     

液质联用技术研究肽类药物药动学中的样品制备技术

肽类药物的研究开发成为新生物技术药物研究开发的热点之一.然而,建立可靠、灵敏和准确的肽类药物体内分析方法是肽类药物临床前和临床药动学研究的难点.样品制备技术是建立符合药动学研究要求的定量分析方法的关键.现综述液质联用技术在肽类药物药动学研究中的样品制备技术方法的目的、要求、特点和分类.结合近年发表的文献具体阐述了固相萃取法、蛋白质沉淀法、超滤离心法、亲和层析法和部分其他方法的原理及其应用实例.     

液质联用技术研究肽类药物药动学中的样品制备技术

肽类药物的研究开发成为新生物技术药物研究开发的热点之一。然而，建立可靠、灵敏和准确的肽类药物体内分析方法是肽类药物临床前和临床药动学研究的难点。样品制备技术是建立符合药动学研究要求的定量分析方法的关键。现综述液质联用技术在肽类药物药动学研究中的样品制备技术方法的目的、要求、特点和分类。结合近年发表的文献具体阐述了固相萃取法、蛋白质沉淀法、超滤离心法、亲和层析法和部分其他方法的原理及其应用实例。     

金纳米棒制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联

目的金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。方法利用种子调制生长法制备了金纳米棒,采用化学桥联方法对金纳米棒进行m-SH-PEG修饰及与靶向定位乳腺癌细胞的寡核苷酸适配子的耦联。结果成功制备了金纳米棒,以CTAB包裹的金纳米棒表面光滑、尺寸均一、分散性和稳定性良好;Zeta电位检测表明m-SH-PEG已成功修饰金纳米棒,琼脂糖电泳证实寡核苷酸适配子与金纳米棒成功耦联。结论成功地进行了金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。     

CA125阴性卵巢癌血清标志物差异蛋白质组学的研究

目的:通过二维差异凝胶电泳(2-DEDIGE)和基质辅助激光解吸离子化-飞行时间(MALDI-TOF/TOF)串联质谱差异蛋白质组学方法寻找CA125阴性卵巢上皮癌血清标志物,以提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度。方法:收集103例卵巢上皮癌,60例正常对照,63例卵巢良性肿瘤、63例盆腔良性病变的血清。按年龄匹配,选取6例CA125阴性卵巢癌和6例正常对照组的血清等容积混合。祛除血清高丰度白蛋白和IgG后进行2-DEDIGE。实验重复3次。通过DeCyder软件分析得出有显著差异的蛋白质点,MALDI-TOF/TOF鉴定差异蛋白质。分别用WesternBlot和ELISA方法验证获选的血清标志物。结果:(1)经2-DEDIGE实验得出有显著差异的蛋白质点41个,MALDI-TOF/TOF成功鉴定了其中的28个蛋白质点。上调最显著的蛋白质点为结合珠蛋白(haptoglo-bin,Hp),下调最显著的蛋白质为转铁蛋白(transferrin,Tf);(2)WesternBlot和ELISA验证结果显示,CA125阴性卵巢上皮癌血清Hp和Tf与正常对照有显著差异(P<0.001);(3)CA125+Hp+Tf联合检测(两者或两者以上阳性判断为阳性)诊断卵巢上皮癌的灵敏度和特异度高于CA125、Hp和Tf单独检测。结论:Hp和Tf是卵巢上皮癌血清中差异表达的蛋白质,可作为卵巢上皮癌的血清标志物。CA125+Hp+Tf联合检测有助于提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度,有助于提高CA125阴性卵巢上皮癌的检出率。     

弥漫性轴索损伤病人的护理

弥漫性轴索损伤(DAI)是近年来被认识的一种原发性脑损伤,主要损伤脑中轴和邻近结构,如脑干、胼胝体、基底节区及三脑室周围,其病理变化是广泛性轴索损害和小血管、毛细血管损伤出血1。病情变化快,死亡率高,预后差2。加强对DAI病人的护理,能及时发现病情变化,有效的预防并发症,降低死亡率,提高病人的生活质量。现将护理体会介绍如下。1临床资料自1998年1月至2002年8月,共收治DAI148例。其中男32例,女16例;年龄2～65岁。致伤原因为车祸、坠落伤。GCS评分3～5分者30例,6～8分者18例。辅助检查:CT扫描48例均表现为弥漫性脑肿胀,脑室和脑池…     

氯胺酮复合右美托咪啶在妊娠合并肝损害剖宫产术中的应用观察

[目的]观察氯胺酮复合右美托咪啶用于妊娠合并肝损害非气管插管麻醉下行剖宫产术的母婴安全性及麻醉效果。[方法]选择妊娠合并肝损害拟在非气管插管麻醉下行剖宫产术产妇40例,ASA2~3级,随机分为氯胺酮复合右美托咪啶组(KD组)和氯胺酮复合丙泊酚组(KP组),每组20例,术中产妇均保留自主呼吸。分别记录两组心率(HR)、收缩压(SBP)、脉搏氧饱和度(SpO2)、氯胺酮用量、苏醒时间、新生儿Apgar评分及围术期出现的不良反应。[结果]与KP组相比,KD组给予右美托咪啶后10min收缩压增高(P0.05),氯胺酮给药后5、10min降低(P0.05),氯胺酮追加总量减少(P0.05);产妇术后苏醒时间缩短(P0.05);但断脐时新生儿Apgar评分两组间差异无统计学意义(P0.05)。[结论]通过护理观察发现,妊娠合并肝损害产妇在非气管插管麻醉下行剖宫产术,用氯胺酮复合右美托咪啶较复合丙泊酚可产生良好的麻醉效果,产妇血流动力学更平稳,而且氯胺酮用量较复合丙泊酚组少,产妇苏醒时间缩短,同时对新生儿Apgar评分无影响,具有较好的安全性。     

蛋白质组研究中双向聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的计算机分析

目的：建立蛋白质组研究中双向聚丙烯酰胺凝胶电泳（ｔｗｏ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２－ＤＰＡＧＥ）图谱的计算机分析方法。方法：利用ＩｍａｇｅＭａｓｔｅｒ２－Ｄ分析软件。结果：我们对人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２蛋白质组的２－ＤＰＡＧＥ图谱进行了计算机分析，识别了１０００以上的蛋白斑点（其中肉眼可视斑点为４００左右），同时获得了所识别斑点的等电点、相对分子质量、斑点面积、Ｄ值、Ｄ％、斑点体积及相对体积等参数。结论：建立了蛋白质组研究中图像分析体系，为今后蛋白质组２－ＤＰＡＧＥ数据的分析与比较、数据库的建立、蛋白质的功能预测以及大规模斑点的模式识别奠定了基础。     

澳洲茄的新甾体生物碱澳洲茄维醇的结构

澳洲茄胺(2)是典型的螺茄烷(Spirosolane)类生物碱之一,它以甙的形式存在于几种茄属植物中,例如在澳洲茄(Solanum ayiculare)于叶中的含量为1%;它被作为生产甾体激素的原料而被利用。作者等在进行螺甾烷及螺茄烷的生源研究中,为了探究作为两种     

苦木科植物的抗癌成分

苦木科(Simaroubaceae)是一个小科,约包含30属200种植物。本科植物的树皮及木部含有苦味物质,六十年代以前对这类物质的化学研究工作不多,因而这个科中的药用植物仅局限于牙买加苦木(Picrasma excelsa)、苏利南苦木(Quassia amara)、鸦胆子(Brucea javanica)和臭椿(Ailanthus altissima)的果实——凤眼草等数种。六十年代初期以来,对苦本科