恶性疟原虫113肽抗原基因重组的减毒鼠伤寒沙门菌在家兔中免疫应答的研究

我们已经在减毒鼠伤寒沙门菌ＳＬ３２６１以融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫杂合１１３肽基因ＡＢ（ＧＺ－ＡＢ）。活菌以２×１０９ＣＦＵ经口服免疫新西兰家兔，用ＥＬＩＳＡ测定抗体水平，结果于首次免疫或加强免疫后都可检测到一定水平的特异性抗体。所免疫的家免可以诱发针对恶性疟原虫抗原及ＧＺ－ＡＢ的迟发性超敏反应（ＤＴＨ）。我们的研究表明，含有多个恶性疟原虫抗原表位的人工合成基因可以在减毒鼠伤寒沙门菌中表达，活菌可诱发家兔产生特异的体液免疫及细胞免疫，为恶性疟口服活菌苗的制备打下基础。     

恶性疟原虫杂合抗原基因的表达及其产物免疫功能的研究

化学合成的人恶性疟原虫杂合多肽抗原 AB 基因,编码子孢子 CSP重复序列 NANP、CSPTh2R和红内期spf35.1、spf83.1、spf55.1、spf83.18、pf155/RESA-5’端重复区共7个不同免疫功能表位,与大肠杆菌质粒pWR450-1重组,构建成pWR450-1/AB表达载体。在乳糖操纵子调控下以β-半乳糖苷酶-恶性疟原虫杂合多肽抗原融合蛋白形式,在大肠杆菌中高效表达。表达产物经SDS-PAGE电泳分离纯化后,加福氏佐剂免疫家兔,诱导产生较高滴度的抗血清。抗血清对人恶性疟原虫体外生长有明显的抑制作用,24h抑制率为65.92％;72h的抑制率为72.63％。对照血清无抑制作用。分离纯化的表达产物能与鼠抗恶性疟原虫和疟疾患者抗血清起免疫反应。这些结果表明合成基因的表达产物具有较好的免疫原性。     

耒阳市二中发生蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒

耒阳市二中发生蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒钟雄，邓云乃，匡纪训（湖南省耒阳市卫生防疫站４２１８００）１９９４年１月８～９日，耒阳市第二中学食堂发生一起由蜡样芽胞杆菌所致的食物中毒，现将其情况报告如下。１中毒情况及临床表现１９９４年１月８日系周末，晚餐食...     

恶性疟复合多价口服活菌苗候选株的实验研究

本课题根据减毒口服活菌苗能诱发全面免疫应答的机理,探讨了人恶性疟复合多价口服活菌苗的可行性。我们按照Patarroyo等报导的SPf66及SPf105多肽序列人工合成复合多价45肽基因A及58肽基因B,两个基因串联成113肽的基因AB,并都在大肠忏菌中获得高效表达,所表达的融合蛋白质具有较强的抗原性,其免疫抗血清对体外培养的恶性疟原虫具有显著的抑制作用。随后又利用减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261(△aroA),构建了三株含有     

恶性疟原虫杂合113肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中的初步表达

我们先前已经将人工合成的恶性疟原虫杂合１１３肽基因克隆到表达载体ｐＷＲ４５０－１中，获得了重组质粒ｐＷＲＡＢ。现将ｎＷＲＡＢ先转化到ＬＢ５０００修饰后，再转化到疫苗菌ＳＬ３２６１，得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡＢ）。ｐＷＲＡＢ在ＳＬ３２６１中以β－半乳糖苷酶一杂合多肽抗原ＡＢ融合蛋白（ＧＺ－Ａｍ形式表达，表达量约１３．３％。免疫双扩散发现从ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡＢ）中纯化的ＧＺ－ＡＢ可与抗ＧＺ－ＡＢ抗体反应，滴度为１：１６。蛋白质印渍技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）显示在ＧＺ－ＡＢ相应位置处出现特异条带。上述结果初步说明ＳＬ３２６１表达的ＧＺ－ＡＢ具有抗原性。连续传代ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡＢ）未见质粒ｐＷＲＡＢ丢失及明显的毒性，为恶性疟口服活疫苗的制备打下了基础。     

简单快速分离纯化质粒脱氧核糖核酸的方法

用溶菌酶和十二烷基磺酸钠(SDS)-NaOH裂解变性菌体,以醋酸钠沉淀变性染色体DNA和蛋白质,再经过Sepharose-2B柱分离RNA,得到凝胶电泳纯的质粒DNA。本法简单快速,没有细菌染色体DNA和RNA的污染,具有转化生物活性,可用于酶解分析,重组转化等试验。     

恶性疟原虫杂合45肽抗原基因重组减毒鼠伤寒沙门氏菌在家兔免疫应答的初步研究

已经在减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬＳ３６１以融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫杂合抗原基因Ａ。活菌以２×１０￣９ｃｆｕ（ｃｏｎｏｌｙｆｏｒｍｕｎｉｔｓ）经口服免疫新西兰家兔，用ＥＬＩＳＡ法测定血清中抗体水平，结果于首次免疫或加强免疫后都可检测到一定水平的特异性抗体，并可诱发出针对融合蛋白和恶性疟原虫抗原的迟发性超敏反应（ＤＴＨ）。活菌苗免疫后未见明显的毒副作用。     

丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合多表位抗原基因与谷胱甘肽充 …

目的：探讨复合多表位丙型肝炎病毒及恶性疟原虫双价疫苗的可行性。方法：将人工合成的复合多表位ＨＣＶ基因ＰＣＸ及Ｐｆ抗原基因克隆到谷胱甘肽转硫酶表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ中,并在大肠杆菌中高效表达ＧＳＴ－ＨＣＶ－Ｐｆ复合抗原,分析表达产物的免疫特异性,免疫原性及安全性。     

尿液N—乙酰—β—D氨基葡萄糖苷酶测定及其对肾脏疾病的诊断意义

N—乙酰—β—D氨基萄葡糖苷酶(简称NAG)是一种重要的溶酶体酶,对细胞内外环境变化极为敏感,与许多生理、病理过程密切相关。近年来国内在对肾病、肝病、白血病、肿瘤的诊断以及妇女排卵期等方面作了NAG测定。国外近二十年做了广泛研究。肯定尿液NAG活力变化是观察肾损伤、移植肾排异作用的重要手段。本文测了67例正常人尿中NAG,观察了56例各种肾脏疾病尿NAG活力升高与血尿素氮、肌酐和尿蛋白的关系,肯定了尿NAG测定对肾脏疾病的诊断意义。     

40年老疫区炭疽病暴发流行的报告

耒阳市集贤乡兴旺村1991年8月,因分割、食用患炭疽病牛肉所致一起人间炭疽病暴发流行。经调查系40年老疫区所致新的暴发。 1 流行情况 1991年8月2～13日共发病26人,发病率18.51％,其中皮肤炭疽19例,肠炭疽7例。分布3个自然村24户。发病集中在8月4～6日计14例占53.85％。年龄10～69岁,以19～40岁为主,占61.54％,男性16例,女性10例。8月中旬经疫区处理后疫情平息。 2 临床特征和治疗 26例患者根据接触史、临床表现、实验室检查确诊。个案调查分析,22例体温在38～41℃,皮肤黑痂、溃疡、水肿19例,腹痛6例,休克4例,血样便2例,水样便5例。