EGF与miRNA-21联合构建雄激素非依赖性前列腺癌LNCaP亚细胞模型

目的构建雄激素非依赖性的人前列腺癌细胞株LNCaP亚型。方法前期常规RPMI 1640培养基培养LNCaP细胞,然后给予无酚红的RPMI 1640培养基,其中加入10%活性碳/葡聚糖处理的胎牛血清,细胞传代后将10μg/L表皮生长因子（EGF）加入培养基,50 nmol/L miRNA-21类似物转染细胞,长期培养。镜下观察细胞形态变化,MTT检测细胞增殖活性,RT-PCR检测雄激素受体基因扩增情况。结果细胞培养约2.5个月后,LNCaP细胞成功转变为非雄激素依赖的前列腺癌细胞LNCaP亚细胞,细胞增殖能力升高,雄激素受体表达上调。结论体内雄激素依赖性前列腺癌可向雄激素非依赖性前列腺癌转变,而且miRNA-21和EGF对该转变起促进作用。     

干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响

目的探讨干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响。方法采用腋下皮肤接种22Rv1细胞的方法制作SCID鼠前列腺癌模型,待成瘤后给予三种不同处理方法,观察荷瘤部位肿瘤的生长情况,并取肿瘤组织标本,使用RT-PCR以及western印痕法检测实验组与对照组肿瘤相关指标的差异。结果①给予mir-21 antagomirs治疗后实验组移植瘤肿瘤体积增长变缓;②RT-PCR检测miR-21在移植瘤中的表达,给予anti-miR21antagomirs治疗组的miR-21表达较空白对照组明显降低,有显著性差异（P〈0.05）。而anti-miR21 antagomirs治疗组与anti-miR21 antagomirs合并去势治疗组的miR21的表达不具有显著性差异（P〉0.05）;③Western blot检测各组PDCD4的变化。给予anti-miR21 antagomirs治疗组对照组PDCD4的表达增高（P〈0.05）,去势治疗组的PDCD4表达于对照组比较未发现显著性差异（p〉0.05）。结论 （1）抑制miRNA-21在肿瘤细胞中的表达,可以延缓裸鼠移植瘤的生长;（2）anti miR-21 antagomirs治疗组移植瘤体积增长慢于手术去势治疗组;（3）在前列腺癌22Rv1细胞裸鼠移植瘤中,PDCD4的表达受到了miRNA-21的反向调节。     

PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化测定及临床意义

目的检测PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR（methy—lation—specificPCR,MSP）技术检测PCDH10基因在3株前列腺癌细胞系、1株前列腺上皮细胞、13例前列腺增生组织和40例前列腺癌组织样本中的甲基化情况,同时分析40例前列腺癌患者的临床资料。结果3株前列腺癌细胞系中有2株检出PCDH10基因甲基化;40例前列腺癌样本中24例（60％）检出PCDH10基因甲基化,13例前列腺增生组织中未检出PCDH10基因甲基化。PCDH10基因出现甲基化患者与未出现甲基化患者相比,在年龄、前列腺特异性抗原（prostatespecificantigen,PSA）和临床分期等指标的差异无统计学意义（P〉0．05）,但在Gleason评分的差异存在统计学意义（P〈0．05）。结论PCDH10基因在前列腺癌组织中甲基化程度较高,高Gleason评分的前列腺癌可能具有更高的PCDHl0基因甲基化率,提示PCDH10基因甲基化可能与前列腺癌的发生发展有关。     

Adv-shRNA抑制CXCR4基因表达对人前列腺癌细胞PC-3增殖和侵袭力的影响

目的 通过特异性抑制前列腺癌细胞株PC-3中趋化因子受体4(CXCR4)基因的表达,检测RNA干扰片段对PC-3细胞增殖及侵袭转移能力的影响.方法 将CXCR4的特异性RNA干扰腺病毒载体转染至前列腺癌PC-3细胞72 h后荧光显微镜观察转染情况;采用RT-PCR法检测转染后CXCR4基因mRNA表达情况;Western blot检测转染后CXCR4蛋白表达情况;MTT法检测PC-3细胞增殖情况;Transwell小室侵袭实验检测对PC-3细胞侵袭转移能力.结果 (1)成功将CXCR4-shRNA重组腺病毒载体转染至前列腺癌细胞PC-3; (2)重组腺病毒转染组CXCR4基因mRNA及蛋白均低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义(P＜0.01),而阴性对照组与空白组之间差异无统计学意义(P＞0.05); (3)阴性对照组与空白组细胞增殖迅速,两组之间差异无统计学意义(P＞0.05),实验组经腺病毒载体转染后细胞增殖程度显著减少,与前两组相比差异有统计学意义(P＜ 0.05); (4) CXCR4-shRNA腺病毒载体与空白组及对照组相比能显著抑制PC-3细胞的侵袭力(P＜0.05),抑制率为57.01％,空白组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 重组腺病毒载体CXCR4-shRNA可有效抑制前列腺癌细胞PC-3中CXCR4基因的mRNA和蛋白的表达,并在一定程度上抑制癌细胞增殖及远处侵袭转移,可作为动物实验的理论基础和前期条件.     

miRNA在非依赖性前列腺癌的作用机制研究进展

随着社会的发展,前列腺癌的发病率在我国逐年上升,向非雄性激素依赖性的转化是其进展中最为恶性的事件,它使得疾病几乎不可治愈。miRNA的表达在不同的癌症以及癌症的不同阶段表现出显著差异,在许多癌症的早期阶段和进展中起关键作用。一些miRNA在依赖性和非依赖性前列腺癌中有不同表达,而且有研究已经分析了miRNA在非依赖性前列腺癌中的功能角色,揭示了miRNA在非依赖性前列腺癌发生和进展中的重要作用。     

艾灸联合间苯三酚治疗前列腺电切术后膀胱痉挛临床研究

目的:观察间苯三酚联合艾灸治疗前列腺电切术后膀胱痉挛的临床疗效。方法:本组研究对象选自2016年5月~2017年11月我院收治的120例TURP术后膀胱痉挛患者,根据随机区组设计法将患者分为观察组和对照组(n=60)。对照组采用间苯三酚治疗,观察组在对照组基础上加用艾灸治疗。比较两组患者治疗后膀胱痉挛程度、痉挛次数、持续时间、临床治疗指标、VAS疼痛评分、OABSS评分及不良反应发生情况。结果:观察组膀胱痉挛程度显著轻于对照组(P0.05)。观察组术后1d、2d、3d痉挛次数、持续时间均显著低于对照组(P0.05)。观察组膀胱冲洗、冲洗液转清、留置导尿管时间均显著低于对照组(P0.05)。观察组VAS疼痛评分、OABSS评分均显著低于对照组(P0.05)。两组均未发生明显不良反应。结论:间苯三酚联合艾灸治疗前列腺电切术后膀胱痉挛的效果显著,可显著缓解患者的膀胱痉挛程度及疼痛。     

S.T.O.N.E和S-ReSC评分系统对PCNL清石率及并发症预测对比分析

目的 探讨S.T.O.N.E评分系统及S-ReSC分级评分系统在经皮肾镜碎石取石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)手术中与手术时间的关系,对清石率、术后并发症的预测价值.方法 回顾性分析2017年6月至2018年9月间于锦州医科大学附属第一医院泌尿外科行经皮肾镜碎石取石术患者一般资...     

睾酮5-α还原酶Ⅱ基因V89L多态性与前列腺癌预后关系的研究

目的:探讨睾酮5-α还原酶Ⅱ(SRD5A2)基因V89L多态性与影响前列腺癌预后因素的关系。方法:对V89L多态性位点用Rsa-1限制性内切酶进行酶切鉴定,观察112例前列腺癌患者和89例BPH患者的V89L(VV、VL、LL)多态性分布情况的差异及其多态性与前列腺癌患者年龄、前列腺特异性抗原(PSA)、游离PSA/总PSA值(tPSA/fPSA,F/T)、Gleason评分、临床分期的关系。结果:前列腺癌组112例与BPH组89例的V89L基因频度风险无显著性差异(χ2=3.606,df=2,P=0.165)。前列腺癌组VV和VL+LL基因型与fPSA、tPSA、F/T、T分期、Gleason评分差异无显著性(P>0.05)。VV和VL+LL各评价预后指标差异无显著性(P>0.05)。分段评价PSA水平、Gleason评分、临床分期、年龄,均与两种基因型无相关性(P>0.05)。结论:V89L多态性与预后无明显关系,但是可能与前列腺癌的风险存在间接的关系。     

miRNA-21在前列腺癌中的应用

miRNA（microRNA）是真核生物中一种约22——24个核苷酸大小的、参与转录后基因调控的非编码单链小分子RNA。它可特异性的识别靶mRNA的3'-非翻译区（3'-UTR）并与之结合,引起靶mRNA的降解或翻译抑制,进而对基因进行转录后的表达调控,目前研究的miRNA已经超过一百多种。其中研究比较深入的miRNA-21已经被检测出在前列腺癌等多种癌症细胞中呈明显高表达。现阶段对miRNA-21的研究已不再停留于肿瘤标记物的表浅认识,而是进一步研究其在雄激素依赖的前列腺癌向雄激素非依赖的前列腺癌转变中的作用机制,以及其在雄激素受体信号通路中所起的作用。