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1.
目的:研究细胞因子在机体免疫应答过程中的免疫佐剂效应。方法:以表达中国流行株HIV-1gag-gp120基因的核酸疫苗质粒pcDNAGP及共表达中国流行株HIV-lgag-gp120基因与II-2基因的核酸疫苗质粒pGPH-2银川市Balb/c鼠,用流式细胞仪测定10000个免疫鼠脾淋巴细胞中CD4^+,CD8T细胞数及CD4^+/CD8^+比值。结果:pGIL-2与pcDNAGP比较,pGIL-2免疫鼠CD^4和CD^8T细胞数明显提高。结论:在机体的免疫应答过程中,细胞因子IL-2能很好地发挥免疫佐剂的作用。 相似文献
2.
目的在毕赤酵母细胞中表达PSA,为临床的检测和治疗提供材料。方法经KT—PCR获得PSA全长cDNA并测序。将编码成熟PSA237氨基酸的cDNA序列插入毕赤酵母表达载体pPICZα—C,该栽体含有AOXl启动子和a-factor信号肽序列,构建表达载体体pPICZαC—mPSA。甲醇诱导X33细胞表达rPSA,ELASA试剂盒筛选高表达rPSA的细胞株。结果获得了人PSA全长序列,构建了表达栽体pPICZα-mPSA。获得了高表达rPSA的酵母X33细胞株。表达产量为1.2mg/L。结论建立了重组人前列腺特异性抗原的毕赤酵母表达体系。规族化的生产有助于PSA的生物学特性的研究和临床检测和治疗的应用. 相似文献
3.
目的观察参附配伍对心肌缺血血瘀证模型大鼠血液流变学和认知能力的影响。方法 SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组(空白组)、模型组、参附注射液腹腔注射组(注射组)、参附注射液口服组(口服组)、参附汤高剂量组(高剂量组)、参附汤低剂量组(低剂量组)。除空白组外,其余各组以寒凝加药物干预的方法建立心肌缺血血瘀证动物模型,给予相应药物干预。观察各组动物全血黏度、血细胞参数[包括平均红细胞体积(MCV)、红细胞分配宽度(RDW-CV),平均血小板体积(MPV)和血小板分配宽度(PDW)]、血沉等血液流变学指标,以及认知能力的影响。结果 1与空白对照组比较,模型组大鼠心电、血细胞参数及血液黏度检测结果差异均有统计学意义(P0.05),表明药物加寒凝成功造成血瘀模型。2与模型组比较,各给药组心电ST振幅偏移减少,低、中、高切值显著降低,MCV、RDW-CV、MPV值显著降低,跳台实验的错误次数显著减少,差异均有统计学意义(P0.05);注射组、口服组的PDW值、血沉显著降低(P0.05);注射组、口服组和高剂量组的潜伏时间显著增加(P0.05)。与注射组比较,低剂量组ST振幅、全血黏度、血细胞参数(MCV、RDW-CV、MPV值)、血液沉降率和跳台实验的错误次数差异均有统计学意义(P0.05)。注射组、口服组各指标比较,无统计学差异(P0.05),表明其药效相当。3血液流变学和行为学指标的典型相关性分析结果显示,寒凝血瘀动物的血流变性和认知能力存在相关性。结论参附配伍可改善模型动物血液流变学性状,同时提高血瘀动物的认知能力。 相似文献
4.
人卵透明带重组融合基因及其表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建人卵透明带蛋白3(zona pelludda 3,ZP3)/GST蛋白融合基因原核表达载体。方法利用PCR法扩增出去N端的信号肽和C端的跨膜区huZP3成熟蛋白编码基因。先将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析,然后将huZP3核心DNA片断克隆入GST蛋白融合原核表达载体pGEX4T-1内。结果获得一个核苷酸长度约为1000bp的基因,与GenBank(NCBI:M60504)公布的ZP3基因序列有99%的同源性。DNA序列分析发现。有一个氨基酸出现变异。酶切鉴定后证明ZP3基因完整插入GST融合蛋白原核表达载体pGEX4T-1中。结论成功构建出含ZP3基因的GST融合蛋白原核表达载体。 相似文献
5.
6.
共表达HIV-1与IL-6核酸疫苗质粒诱导小鼠免疫原性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目前我国AIDS的流行已进入快速增长期 ,因此应用现代生物技术研制新型AIDS疫苗 ,改进早期开发疫苗的缺陷 ,提高其质量是当前的迫切任务。本研究利用分子生物学方法在真核表达载体基础上构建HIV结构基因与细胞因子IL 6基因共表达重组质粒作为核酸疫苗 ,进行小鼠免疫试验 ,探讨核酸疫苗对机体细胞免疫反应能力及细胞因子IL 6作为免疫佐剂的效果。构建表达中国流行株HIV 1B亚型gp12 0基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV 1B亚型gp12 0基因与IL 6基因的核酸疫苗质粒pGPIL 6 ,检测其在哺乳动物细胞… 相似文献
7.
目的:用构建的HIV-2外膜蛋白gp105和核心蛋白gag基因的DNA疫苗免疫小鼠,评价其免疫效果。方法:将HIV-2型gp 105和gag基因克隆到表达载体pIRES1neo中,构建重组DNA疫苗质粒。间接免疫荧光试验证明,构建的DNA疫苗在真核细胞中表达了gp105或/和gag.构建的疫苗免疫小鼠后,用流式细胞仪测定CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞亚类数,并用HIV-2抗体ELISA检测试剂盒检测免疫鼠血清中抗HIV-2抗体水平。结果:构建了3种HIV-2 DNA疫苗pIRES1gag、pIRSE1gp105和pIRES1gag-gp105,转染BHK细胞后均能表达抗原蛋白,免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖并诱导产生抗HIV-2特异性抗体,其中pIRES1gag-gp105免疫鼠中,淋巴细胞增殖最显著,而pIRES1gp105免疫鼠中HIV-2特异性抗体水平最高。结论:构建的DNA疫苗均能诱导机体产生免疫反应,其中pIRES1gp105诱导的体液免疫应答最显著,而pIRES1gag-gp105 诱导的细胞免疫响应最显著。 相似文献
8.
人卵GST-ZP3融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性的检测 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:在大肠杆菌中表达人卵透明带3(Human zona pellucida3,HuZP3)蛋白并对其进行纯化。方法:将HuZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和序列分析后,用重组质粒转化E.coli BL21,经IPTG诱导产生GST-HuZP3融合蛋白并通过Glutathione Sepharose 4B纯化。以纯化的融合蛋白免疫纯系Balb/C小鼠制备抗血清。抗血清的效价采用ELISA检测。结果:成功地构建GST-HuZP3融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST-HuZP3融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠获得高效价抗GST-HuZP3抗血清,且该抗血清可识别大肠杆菌表达的重组ZP3。结论:获得高表达的GST-HuZP3融合蛋白并证实其具有良好的免疫原性,可作为抗原研制开发检测不孕妇女体内是否存在抗自身ZP3抗体的诊断试剂盒。 相似文献
9.
10.
免疫炎性因子过度表达在脑性瘫痪发病机制中的作用 总被引:4,自引:2,他引:4
目的探讨免疫炎性因子水平与脑性瘫痪发病机制的关系。方法运用ELISA法检测31名脑瘫患儿和20名健康儿童及37名脑瘫高危因素新生儿(新生儿病例组)和20名正常新生儿的血清肿瘤坏死因子-α(TNF—α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果脑瘫患儿和脑瘫高危因素新生儿的血清TNF-α和IL-6水平均高于健康儿童和正常新生儿(P〈0.05);脑瘫患儿血清TNF-α水平高于脑瘫高危因素新生儿(P〈0.05),IL-6水平两组间无显著性差异(P〉0.05)。结论免疫炎性因子过度表达在脑性瘫痪的发病机制中发挥重要作用,高水平的免疫炎性因子可能是脑瘫发病的一个独立危险因素。 相似文献