磷脂酶Cε基因在膀胱移行细胞癌中表达及其临床意义

目的 探讨磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)基因在膀胱移行细胞癌表达及临床意义.方法 采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测27例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱对照组中PLCε mRNA表达,分析其与膀胱病理学特征的关系.结果 PLCεmRNA在膀胱移行细胞癌的表达显著高于正常膀胱组织(P＜0.01),PLCε的表达和膀胱移行细胞癌分期有关(P＜0.05)而与分级无关(P＞0.05).结论 PLCε基因在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,可能是未来检测膀胱移行细胞癌一种新的有价值的肿瘤标志物,同时也可能成为膀胱肿瘤生物学治疗中一个新靶点.     

西格玛性能验证图联合QGI在血细胞分析仪质量管理中的应用

目的探讨应用西格玛性能验证图结合质量目标指数(QGI)和Westgard西格玛规则,评价血细胞分析仪的性能,以指导血细胞分析仪质量管理的持续改进。方法收集2016年10月Sysmex XS1000i血细胞分析仪8个项目室内质量控制(简称质控)及同期全国室间质量评价数据,计算变异系数(CV)、偏差(Bias)和西格玛值(σ);利用西格玛性能验证图评价其分析性能,结合QGI选择优先改进措施,运用Westgard西格玛规则选择室内质控方案。针对2016年10月σ6的项目,在2017年10月采用新的质控方案及改进措施,收集数据,评价改进效果。结果采用新的质控方案及改进措施后,血细胞分析仪分析性能均有不同程度提升,但血红蛋白项目仍需持续改进。结论西格玛性能验证图能简洁、直观地评价血细胞分析仪的分析性能,与QGI和Westgard西格玛规则结合,可有效分析性能不佳的原因及选择最优的质控方案,有利于血细胞分析仪质量管理的持续改进。     

阻断PLCE基因对膀胱癌细胞侵袭能力的影响

目的构建PLCE基因的shRNA表达载体转染膀胱癌细胞T24株,观察其对T24细胞转移侵袭等恶性行为的影响。方法设计合成PLCE基因mRNA的寡核苷酸序列,插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中,构建重组载体pGenesil-PLCε。重组载体转染T24细胞后,RT-PCR和Western blot检测PLCE基因和蛋白表达;以侵袭小室、明胶酶谱分析及免疫组化检测细胞侵袭能力。结果成功构建了针对PLCE基因的shRNA表达载体。两个阳性重组质粒P1和P2转染膀胱癌细胞T24,P1和P2组目的基因/内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低(P<0.01);P1和P2组目的蛋白/内参照吸光度比值较空载HK-A组明显降低(P<0.01)。细胞侵袭实验中阳性质粒P1和P2转染组穿膜细胞数也明显低于空白对照组和阴性质粒HK-A转染组(P<0.01);转染P1、P2均使细胞分泌MMP-2、MMP-9明显低于空白对照和HK-A转染组(P<0.01)。结论阻断PLCE基因能有效抑制膀胱癌T24细胞系中PLCE基因和蛋白表达,并对T24细胞的侵袭转移能力具有一定的抑制作用。     

RNAi沉默PLCε对Crocin抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用调控的研究

目的:观察RNAi沉默膀胱癌BIU-87细胞磷脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)表达后对藏花素(Crocin)抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响.方法:将携有siRNA基因的真核表达质粒PGenesil-PLC?转染BIU-87细胞后,分为5组:未转染组、pGenesil-NP阴性质粒组、pGenesil-PLC ε质粒组、Crocin组、pGenesil-PLCε联合Crocin组.MTT法观察不同处理组对BIU-87细胞的生长抑制作用.RT-PCR法检测转染后对PLCε mRNA表达的影响及各处理组PCNA(Proliferating cellnuclear antigen)、CyclinD1 mRNA表达.Western-blot检测PCNA、CyclinD1蛋白表达.结果:RNAi可抑制BIU-87细胞78.06%的PLCεmRNA表达.pGenesil-PLCε联合Crocin组可增强Crocin对BIU-87细胞的生长抑制作用,48h抑制率达45.30%,且与pGenesil-PLCε质粒组和Crocin组相比较有显著性差异(P<0.01).RT-PCR和Western-blot结果显示与RNAi沉默PLCε组比较,RNAi PLC?联合Crocin组明显下调了PCNA、Cyclin D1基因和蛋白的表达(P<0.05);较单独Crocin组比较,RNAiPLC ε联合Crocin组显著降低了PCNA基因和蛋白的表达(P<0.05),降低了Cyclin D1蛋白的表达(P<0.05),Cyclin D1 mRNA表达变化两组间无显著性差异(P>0.05).结论:沉默PLC ?基因可增强Crocin对BIU-87细胞的抑制作用,其机制与进一步下调PCNA、CyclinD1的表达有关.     

非配套检测系统溯源性的建立及其确认

目的探讨实现实验室非配套检验系统的溯源性及其确认的方法。方法以新鲜患者血清为临时校准品,在Roche Modular PI检测系统上定值后校准非配套检测系统,校准验证有效后,在非配套检测系统上对日常校准品进行定值,用新的校准值校准自建检测系统,经校准验证后,按EP9-2A文件进行方法比对,评估非配套检测系统与Roche Modular PI系统检测结果的偏倚是否在可接受范围内。结果非配套Alcyon300检测系统中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、血糖(Glu)、淀粉酶(AMY)及AFT检测系统中钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)经过校准和校准验证后,与Roche Modular PI检测系统差异有统计学意义(P0.05),除Urea、UA、AST、ALT及Glu与目标检测系统在医学决定水平值处偏倚部分接受外,其余项目偏倚均小于CLIA′88允许总误差的二分之一(1/2TEa),临床可以接受。结论校准和校准验证可以实现非配套系统量值溯源性和可比性的有效途径。     

化学发光法检测乙型肝炎病毒核心抗体临界值及可疑区间的探讨

目的探讨化学发光免疫分析法检测乙型肝炎病毒核心抗体临界值及其可疑区间,保证不同检测系统检测乙型肝炎病毒核心抗体结果间的一致性。方法选取住院、体检及门诊患者180例标本,采用3种不同化学发光检测系统(Abbott,SH和AA系统)检测HBc Ab,以2种或以上化学发光检测系统的一致性结果作为真阴性和真阳性的判定标准,ROC曲线评价检测系统的诊断性能,并用配对χ2检验和kappa检验各检测系统结果与判定结果间的差异性和一致性;有显著差异的系统用ROC曲线重新设定其临界值和可疑区间,并验证其适用性。结果 180例标本中有阳性标本60例,阴性标本120例。Abbott诊断准确性为99.4%,与判定标准结果间差异无显著性(P0.05)且一致性好(kappa0.75);SH和AA诊断准确性分别为94.4%、92.2%,与判定标准结果的一致性好(kappa0.75),但差异有显著性(P0.05)。ROC曲线分析表明,SH临界值设定为0.594,可疑区间为0.554—0.634时,其诊断敏感性和特异性分别为98.3%和98.3%;AA临界值设定为1.505,可疑区间为0.765—1.850时,其诊断敏感性和特异性分别为95.0%和98.3%。经验证,SH、AA系统结果与Abbott结果符合率为100%(53例/53例)和98.1%(52例/53例,1例假阳性),结果间差异无显著性(P0.05)且一致性好(kappa0.75)。结论不同化学发光检测系统其临界值和可疑区间会不同,须验证后使用。ROC曲线可用来验证和设定临界值及可疑区间,有利于提高不同检测系统间检测结果的一致性。     

T2DM 患者糖尿病自身抗体检测及其临床价值

目的：探讨检测糖尿病自身抗体对从2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者中筛查出成人晚发自身免疫性糖尿病(latent autoimmune diabetes in adult,LADA)的价值。方法采用酶联免疫法对73例T2DM 患者及30例健康体检者血清谷氨酸脱羧酶抗体(glutamic acid decarboxylase antibody,GADA)、胰岛细胞抗体(islet cell antibody,ICA)、胰岛素自身抗体(insulin autoantibody,IAA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(protein tyrosine phosphatase-like IA-2 autoantibody,IA-2A)进行检测;分析抗体构成并比较抗体阴性与阳性患者之间的临床差异。结果与对照组比较,T2DM 组 GADA(19.2%)和 IAA(12.3%)两种自身抗体阳性率明显增高,其差异有统计学意义(P <0.05)。单项抗体检测以 GADA 的阳性率最高(19.2%),两项抗体联合检测以 GADA+IAA 和 GADA+ICA 阳性率较高(28.8%和27.4%);3项抗体联合检测以 GADA+ICA+IAA 阳性率最高(38.4%);4项抗体同时检测阳性率可达39.7%。自身抗体阳性组体质量指数、空腹及餐后120 min C 肽值均低于自身抗体阴性组(P <0.05),年龄、性别构成比、空腹及餐后120 min 血糖和病程的差异无统计学意义(P >0.05)。结论糖尿病自身抗体的检测对1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)的诊断及 LADA 的筛查具重要临床意义。     

心肌标志物的研究进展

上世纪50年代以来,速率法测定某些代谢酶活性一直是诊断急性心肌梗死（AMI）的金指标,但这些酶并不是心肌特有。而且酶的活性时间和窗口时间短,对临床诊断的帮助价值受限制。近几年来．一些新的具有高度特异性和敏感性的心肌标志物检测指标已较为普遍地应用于临床试验室诊断,在缺血性心脏病的诊断中占据重要地位,在AMI的诊断中更是必不可少。由于这些新的指标是近几年才开始在国内逐步普及应用．因此掌握与之相关的生物学特点,是临床对其合理应用和选择的前提条件。现对常用心肌标志物及其临床应用作一概述。     

针灸联合全身振动训练对老年脑梗死后偏瘫患者下肢运动功能、认知功能和生活质量的影响

目的：探究针灸联合全身振动训练对老年脑梗死后偏瘫患者的下肢运动功能、认知功能和生活质量的影响。方法：选取2021年5月—2022年5月莆田学院附属医院收治的61例老年脑梗死后偏瘫患者,接受全身振动训练的作为常规组（n=24）,接受针灸联合全身振动训练的作为针灸组（n=37）。比较两组治疗前后的美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分、下肢运动功能评分、认知功能评分、生活质量评分、血清血管内皮生长因子（VEGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）。结果：治疗后,两组的NIHSS均低于治疗前,且针灸组低于常规组,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后,两组的下肢运动功能评分、认知功能评分、生活质量评分、VEGF、BDNF均高于治疗前,且针灸组高于常规组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组在治疗期间均未出现不良反应。结论：针灸联合全身振动训练对老年脑梗死后偏瘫患者有良好的疗效,能明显改善患者的神经功能及下肢运动功能、认知功能,对改善患者生活质量有重要作用。