胰岛素和睾酮对Ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的探讨胰岛素(INS)和睾酮(T)对多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜腺上皮细胞生长的影响和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的调节机制。方法体外培养Ishikawa细胞,予不同浓度INS(90、60、30、3、0.3 U/L)或T(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mmol/ml)刺激Ishikawa细胞48 h,MTT法检测INS、T对Ishikawa细胞生长的作用;免疫细胞化学检测GLUT4蛋白在Ishikawa细胞定位表达;分别以30 U/L INS和10-5mmol/ml T刺激Ishikawa细胞24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定INS和T对Ishikawa细胞GLUT4 mRNA表达的影响。结果(1)不同浓度的INS均可促进Ishikawa细胞的生长,随着INS浓度的增加,INS促进Ishikawa细胞生长作用越强,INS浓度自0.3~30 U/L时,Ishikawa细胞生长依次加强,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。INS浓度达60、90 U/L时,细胞生长状况与INS浓度为30 U/L相似。不同浓度的T均可抑制Ishikawa细胞的生长,随着T浓度的增加,T抑制Ishikawa细胞生长作用越明显。T浓度自10-7、10-6、10-5mmol/ml,Ishikawa细胞生长依次减弱,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01,P<0.05),T浓度达10-4、10-3mmol/ml时,细胞生长抑制状况与T浓度10-5mg/ml相似。(2)GLUT4蛋白,定位表达于Ishikawa细胞的细胞浆内。(3)Ishikawa细胞中GLUT4 mRNA表达,在INS组和T组均较对照组减弱(P<0.01,P<0.05),INS组比T组减弱更明显(P<0.05),且INS和T作用24和48 h GLUT4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论不同浓度INS和T均可影响Ishikawa细胞生长,并降低GLUT4 mRNA的表达,推测PCOS高胰岛素、高雄激素血症的病理生理特性有可能影响子宫内膜的代谢过程,与子宫内膜的病变相关。     

静脉钙剂在卵巢过度刺激综合征高危患者中的临床应用

目的:探索静脉钙剂在卵巢过度刺激综合征(OHSS)高危患者中的应用效果,及其对辅助生殖技术早期妊娠结局的影响。方法:选择2012年12月至2013年1月间于河北医科大学第二医院生殖中心进行助孕的67例OHSS高危患者为研究对象。研究对象于取卵后随机分为钙剂组(n=34)和对照组(n=33)。钙剂组于取卵后当日、取卵后第1日及第2日,连续3日静脉滴注10 ml10%葡萄糖酸钙溶液、200 ml 0.9%氯化钠液。对照组患者在相同时间予静脉输注200 ml 0.9%氯化钠液,不采取任何预防措施。结果:钙剂组与对照组患者的平均年龄、体重指数(BMI)、不孕年限、基础FSH水平等基本临床资料差异无统计学意义(P0.05);但钙剂组的获卵数明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。钙剂组取卵后第3日的腹水深度显著低于对照组,差异有统计学意义(38.41±15.42 mm vs 48.55±19.95 mm,P=0.023)。两组临床妊娠率等早期临床结局比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:取卵后静脉应用钙剂可有效减少OHSS高危患者腹水的形成,改善患者的临床症状,且未发现静脉注射钙剂对辅助生殖技术早期妊娠结局的不良影响,为临床上预防OHSS提供了更为简单有效的方法。     

主动免疫治疗原因不明复发性流产1005例疗效评价

目的:评价原因不明复发性流产(URSA)主动免疫治疗的临床效果。方法:2001年2月至2015年2月在我院门诊就诊的URSA患者1005例为研究对象,取其丈夫或与女方无血缘关系的第三方男性的肘静脉血20 ml,分离淋巴细胞于孕前后注射于患者前臂,使其产生主动免疫,并随访妊娠结局。结果:1005例URSA患者中共妊娠894例(88.96%),其中足月分娩718例(71.44%),随访截止时,尚在妊娠中91例(9.05%),再次自然流产85例(8.46%);无早产病例;未受孕111例(11.04%)。年龄32岁者流产率明显高于≤32岁者(P0.05)。孕后免疫治疗2~3次者比孕后未治疗或仅治疗1次者的足月分娩率明显更高(P0.05),流产率明显更低(P0.05)。结论:主动免疫治疗URSA患者疗效肯定,妊娠成功率高,年龄大于32岁者妊娠后应早期保胎治疗;免疫治疗后3个月内受孕,确认早孕后再免疫治疗2~3次效果更好。     

趋化因子与复发性流产相关性的临床研究

目的：研究血清中趋化因子与复发性流产的相关性,探讨主动免疫治疗原因不明复发性流产（ URSA）患者疗效的可能机制。方法选择就诊的URSA患者60例,以正常非孕、正常妊娠组各20例为对照。免疫治疗前后抽取肘静脉血3 ml,采用酶联免疫吸附法检测血清中正常T细胞活化后表达和分泌的调节蛋白（ RANTES）、白介素-8（IL-8）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平。结果 URSA患者血清中3种趋化因子水平明显低于正常非孕组、正常妊娠组（ P ＜0怂．05或＜0．01）,而正常非孕组与正常妊娠组间差异无统计学意义（ P ＞0．05）;URSA患者治疗后,3种趋化因子水平明显上升（ P ＜0．01）;持续妊娠组在治疗前后3种趋化因子水平发生明显持续性改变（ P ＜0．05）,以RANTES最为明显（ P ＜0．01）,而非持续妊娠组变化不明显（ P ＞0．05）。结论趋化因子水平变化可以做为免疫治疗URSA患者疗效评价的指标,尤其是RANTES水平,为早期诊断URSA患者及免疫治疗提供理论依据。     

坤泰胶囊治疗卵巢储备功能低下不孕症患者33例临床观察

目的探讨坤泰胶囊治疗卵巢储备功能低下不孕症患者的临床疗效和安全性。方法将卵巢储备功能低下不孕症患者68例随机分为治疗组33例及对照组35例。治疗组给予坤泰胶囊口服,每日3次,每次2.0 g;对照组给予脱氢表雄酮口服,每日3次,每次25 mg。两组疗程均为3个月经周期。治疗期间观察患者的用药情况、不良反应、妊娠情况。治疗结束后随访4个体外受精-胚胎移植周期。比较两组患者治疗前后血清基础卵泡刺激素(FSH)、基础雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、卵泡期抗苗勒激素(AMH)水平、基础窦卵泡数(AFC),随访期间的体外受精-胚胎移植临床妊娠率及周期临床妊娠率。结果两组患者治疗前后比较,FSH、E2、LH及AFC差异均无统计学意义(P0.05)。治疗组5例未行体外受精-胚胎移植,治疗组临床妊娠5例,对照组9例。第1周期治疗组临床妊娠3例(17例移植患者,下同),对照组1例(21例);第2周期治疗组临床妊娠1例(9例),对照组2例(20例);第3周期治疗组临床妊娠1例(2例),对照组4例(6例);第4周期治疗组无移植患者,对照组临床妊娠2例(2例)。研究过程对照组部分患者出现面部痤疮,治疗组未发现不良事件。结论坤泰胶囊对卵巢储备功能低下不孕症患者的卵巢储备功能的改善效果及临床妊娠率与脱氢表雄酮相当,且安全性好。     

蛋白激酶C 参与内源性大麻素花生四烯乙醇胺对L型钙电流的抑制作用

目的：研究内源性大麻素物质花生四烯乙醇胺是否通过改变蛋白激酶C（ PKC）活性从而抑制心肌L型钙电流,并进一步探讨可能改变PKC活性的信号途径。方法应用全细胞膜片钳技术记录单个心肌细胞的L型钙电流（P ＜0 n．05）;应用PepTag非放射性蛋白激酶C检测系统（ Promega）检测PKC活性;Elisa试剂盒测定细胞中二脂酰甘油（ DAG）的含量;western blot 技术测定磷脂酶Cβ（ PLCβ）和磷酸化磷脂酶C β（ p-PLCβ）表达。结果应用花生四烯乙醇胺灌流心肌细胞后显著抑制心肌L型钙电流（ P ＜0．05）,预先应用大麻素1型受体（ CB1）阻断剂AM251或PKC非特异性激动剂佛波醇酯（PMA）可以完全阻断此抑制效应,而大麻素2型受体（CB2）阻断剂AM630没有阻断花生四烯乙醇胺抑制L型钙电流的作用。检测心肌细胞PKC活性发现,花生四烯乙醇胺明显抑制PKC活性（ P ＜0．05）,同样预先应用AM251或PMA完全阻断花生四烯乙醇胺对PKC活性的抑制效应,而AM630无此效应。应用花生四烯乙醇胺没有影响心肌细胞DAG含量和PLCβ的磷酸化。结论本实验首次证明内源性大麻素花生四烯乙醇胺激活心肌细胞CB1受体后抑制细胞PKC的活性,从而抑制L型钙电流,此过程没有PLCβ-DAG途径参与。     

前列腺素E2对未破裂卵泡黄素化综合征体外受精-胚胎移植结局的影响

目的 探讨前列腺素E2(PGE2)对未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)患者接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕过程中卵母细胞、胚胎质量、受精率、卵裂率、妊娠率等结局的影响.方法 随机选择首次接受IVF-ET治疗的LUFS患者20例为LUFS组;同期就诊因男方或输卵管因素接受IVF-ET治疗的患者20例为对照组.2组均于HCG日留取血清测定雌二醇(E2)水平,并于取获卵日留取无血卵泡液测PGE2水平.结果 与对照组比较,LUFS患者卵泡液中PCE2水平明显降低(P<0.01),HCG日血清E2水平及获卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率及妊娠率均降低(P均<0.05).结论 PGE2可能影响LUFS患者卵子的发育、卵母细胞的质量,进而影响胚胎的质量,降低妊娠率.     

同型半胱氨酸与多囊卵巢综合征和二甲双胍的相关性

目的:探讨空腹血浆总同型半胱氨酸(tHcy)水平与多囊卵巢综合征(PCOS)的关系;分析影响PCOS患者血浆tHcy水平的因素;评估二甲双胍对PCOS患者内分泌及代谢的影响。方法:选择PCOS患者24例并按胰岛素抵抗指数(Ho-ma-IR)将PCOS患者分为胰岛素抵抗(PCOS-IR)组及非胰岛素抵抗(PCOS-NIR)组,24例PCOS患者中16例接受二甲双胍(500 mg,3次/d)治疗,疗程3个月;随机选择同期就诊的月经周期规则、卵巢功能正常的其它因素不孕患者15例为对照。结果:PCOS-IR组血浆tHcy浓度(13.20±3.60)μmol/L显著高于PCOS-NIR组(9.57±2.12)μmol/L(P=0.002),且均显著高于正常对照组(7.31±1.85)μmol/L(均P<0.05);多元逐步回归分析表明Homa-IR是PCOS患者血浆Hcy浓度的独立影响因素;二甲双胍治疗3个月后,PCOS患者高雄激素血症、胰岛素抵抗显著改善,而血浆tHcy水平却显著升高(P=0.001),血清维生素B12(Vit-B12)及叶酸浓度显著降低(P=0.001、P=0.01)。结论:①PCOS患者血浆tHcy水平显著升高可能是其近期不良妊娠结局和远期心血管并发症的重要原因之一。②胰岛素抵抗(IR)是PCOS患者血浆Hcy水平的主要影响因素。③二甲双胍显著改善PCOS内分泌、糖代谢异常的同时,却使血浆tHcy浓度升高,血清Vit-B12、叶酸水平降低。     

生育力保存的伦理问题及思考

生育力保存技术是一项新兴的技术,近年来逐渐成熟,由实验走向临床应用。它一方面满足了人们日益增长的生育力保存的需求,另一方面在技术实施过程中不可避免会面临巨大伦理困境。临床诊疗实践中要坚持尊重、有利、公平的伦理原则,在此基础上发展科学技术、优化医疗资源配置、完善法规政策、加强伦理监管和技术评审等,或许可以为解决伦理难题提供参考和方法。