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1.
3.
目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA,以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体,酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞,以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞,通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组(NEG-shRNA)、干扰组(shRNA-HSP90β)、过表达NC对照组(NEG-pEZ)及过表达组(pEZ-HSP90β)。通过qRT-PCR 与Western blotting 分别从mRNA 和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后,嘌呤霉素最小致死浓度1 μg/ml,感染复数200,感染人Saos-2的感染效率达80%,其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%,pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2.8倍。进一步研究发现,shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低,pEZ-HSP90β组较NEG-pEZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功,并能够在Saos-2中稳定表达。 相似文献
4.
背景:通过分析细胞因子及炎症递质对腰椎间盘退变的影响,有助于深入认识腰椎间盘退变的发病机制,指导临床对腰椎间盘退变疾病的预防和治疗。目的:结合临床对腰椎间盘退变中细胞因子及炎症递质进行研究,并对其发展趋势进行多层次探讨分析。方法:以电子检索方式对CNKI数据库学术期刊2002-01/2011-12收录有关腰椎间盘退变中细胞因子及炎症递质研究的文献进行分析,采用检索词主要为"腰椎间盘退变;细胞因子;炎症介质",运用数据库的分析功能和Excel软件图表的功能分析数据特征。结合2009-01/12在解放军第306医院骨科进行腰椎间盘突出症治疗的患者67例,治疗方法为单节段椎管减压,椎间融合器植入植骨融合内固定,对术中切除的间盘进行镜下和免疫组织化学分析。结果与结论:在CNKI数据库学术期刊2002/2011收录的文献中,共检索到76篇与腰椎间盘退变细胞因子及炎症递质研究相关的文献,文献数量处于上升趋势。腰椎间盘退变中细胞因子及炎症递质研究检测方法以免疫组织化学为主,对炎症递质的表达定量定性准确性研究较多。可见,细胞因子及炎症递质在椎间盘退变的复杂病理过程中具有重要的调控作用。 相似文献
5.
肾综合征出血热(H F R S),是由汉坦病毒引起的自然疫源性传染病,病死率高,典型病人的病程呈五期经过,依次为:发热期、低血压休克期、少尿期、多尿期及恢复期,重症病人可有二期或三期重叠现象,病情发展变化快.临床主要表现为发热、休克、充血出血和急性肾衰竭.我院自2009年3月至2011年3月共收治H F R S患者32例,治疗护理措施得当,均治愈出院,无并发症发生,无一例死亡.现将护理体会总结如下. 相似文献
6.
1 生物化学特性.前列腺特异性抗原(prostate specifie antigen.PSA)是一种存在于精液中的蛋白质,它和缓激肽家族的丝氨酸蛋白酶氨基酸顺序相似。PSA是前列腺癌(PCa)的最主要的肿瘤标志物。PSA是一种r-精蛋白,它是由前列腺管和腺泡上的上皮细胞分泌,它使精囊特异蛋白变成几个小分子量蛋白起到液化精液的作用。正常人PSA主要存在于精液中,其浓度(0.5~5.5g/L)约为血清(〈0.4μg/L)的100万倍,当肿瘤发生时,前列腺和淋巴系统间组织屏障破坏,前列腺内容物进入血液循环,使血中PSA升高,每克前列腺组织使血清PSA升高3μg/L。 相似文献
7.
C-反应蛋白在新生儿感染性疾病中的应用价值 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:通过测定C-反应蛋白(CRP)含量,探讨CRP在新生儿感染性疾病中的应用价值。方法:采用免疫比浊法检测观察对象血清中CRP含量水平。结果:对60例观察对象中CRP值增高者20例进行动态观察,CRP恢复正常时间为10-29天,平均12.3天。结论:血清CRP检测具有快速灵敏的特点,可作为新生儿感染性疾病早期诊断的客观指标,定期复查对判断组织炎症或损伤的程度及预后具有很高的应用价值。 相似文献
8.
为研究Mpl受体介导的HEL细胞电子传递反应的变化,建立了用细胞电极测定HEL细胞电子传递的电化学方法。结果发现,当TPO-Mpl作用后数分钟可以观察到一个向上的“”形氧化电位,TPO-Mpl的最大作用出现在5分钟内,TPO-Mpl的解离在二者作用后60分钟趋向明显,240分钟后完全解离。Scatchard分析说明HEL细胞表面有两种Mpl受体亲和力(K_1=1.8 pmol/L,K_2=1.11nmol/L)。结果提示,TPO与Mpl受体结合迅速,解离缓慢,HEL细胞上存在两种亲和力的Mpl受体。该方法灵敏、方便,可以连续观察,需要细胞少(1.0×10~4细胞)。 相似文献
9.
目的 探讨人工肝血浆置换治疗重症肝炎的观察与护理;方法通过对34例患者接受人工肝治疗的观察,总结护理经验体会;结果34例重症肝炎患者均顺利完成治疗.结论 充分做好术前准备,精心做好术中、术后护理,是血浆置换术治疗顺利进行,取得满意结果的关键. 相似文献
10.
1 胱抑素的结构和生物学特性 血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C分为A、B、C等几种,其中,cystatinC (cysC)又称胱抑素,是一种低分子量非糖基化碱性蛋白质,分子量约为13kD,有122个氨基酸,是超家族成员之一,机体内几乎所有的有核细胞均能产生,产生率多处在相对衡定状态.cysC的生理功能是调节半胱氨酸蛋白质的活性,在细胞内肽类和蛋白质的代谢中起重要作用,特别是在胶原代谢中,能使一些前激素的蛋白质水解,释放于靶组织中发挥各自的生物学作用,它的基因突变、体液中含量的升高或降低直接与多种疾病有关. 相似文献