妊娠期低分子质量肝素干预对新生鼠肝细胞先天性感染人巨细胞病毒的影响

目的 探讨妊娠期应用低分子质量肝素(LMWH)对新生鼠肝细胞先天性感染人巨细胞病毒(HCMV)的病理改变和病毒DNA载量的影响.方法 取健康纯系清洁级Balb/c小鼠48只.随机选择配对,每对雌雄小鼠各1只.实验组20对,正常对照组4对.实验组每4对为1组,共5组,每只分别腹腔内注射6.0 log半数组织培养感染剂量(TCID50)HCMV-AD169.正常对照组4对,每只腹腔内注射相应细胞维持液高糖改良Eagles培养液(DMEM)1.0 mL.所有小鼠于接种后配对,隔离喂养,并观察受精情况,记录受精时间.发现妊娠后,分别予实验Ⅰ组皮下注射LMWH 1 000 U·kg-1,实验Ⅱ组皮下注射 LMWH 500 U·kg-1,实验Ⅲ组皮下注射LMWH 250 U·kg-1,实验Ⅳ组肌肉注射更昔洛韦(GCV)60 mg·kg-1,各10 d;实验Ⅴ组为阳性对照组,孕鼠不注射LMWH和GCV.每组随机取10只新生鼠,出生1 d处死,取出肝脏,进行病理学检查和荧光定量PCR检测.结果 实验Ⅰ组肝组织病理损害较阳性对照组明显减轻,HCMV DNA载量[(1.60±1.12)×103拷贝数/50 mg]较阳性对照组[(5.91±2.91)×107拷贝数/50 mg]显著降低(P＜0.01),与实验Ⅳ组[(1.75±1.05)×103拷贝数/50 mg]比较差异无统计学意义(P＞0.05).实验Ⅱ组肝组织炎性反应较阳性对照组稍减轻.实验Ⅲ组肝组织炎性反应与阳性对照组比较无明显变化,实验Ⅲ组HCMV DNA载量为(5.49±2.76)×107拷贝数/50 mg,与阳性对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论在妊娠期给予LMWH 1 000 U·kg-1干预能显著降低HCMV AD169株先天性感染Balb/c新生鼠肝细胞病毒感染和复制,减轻细胞炎性反应.     

临床护理路径在青光眼患者围术期护理中的应用

目的:探讨临床护理路径在青光眼小梁切除+虹膜周切除术围术期护理中的应用效果。方法:将46例青光眼患者随机分成观察组和对照组各23例。对照组采用常规护理,观察组按照临床护理路径实施护理,比较两组护理效果。结果:观察组患者的平均住院天数、平均住院费用少于对照组(P<0.01,P<0.05),护理满意度高于对照组(P<0.05)。结论:按照临床护理路径实施护理可缩短住院天数,降低医疗费用,提高患者对护理工作的满意度。     

麦芽糖结合蛋白-微管驱动蛋白11删除型融合基因表达载体的构建及其蛋白表达

目的:构建删除型微管驱动蛋白(KIF)11与麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白的原核表达载体,并纯化得到高纯度的MBP-删除型KIF11融合蛋白。方法:PCR法从全长的KIF11基因组中扩增KIF11的相关删除型基因并连接到原核表达载体pMal中,此载体包含一个表达MBP的基因,删除型KIF11片段插入后与其融合,筛选和测序鉴定阳性克隆。将重组质粒转化到Rosseta大肠杆菌中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导表达和亲和层析分离纯化表达产物,对纯化的蛋白进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹杂交(Western blot)鉴定。结果:成功扩增删除型KIF11基因,构建MBP-KIF11-head,-stalk和-tail重组质粒并在Rosseta中诱导表达出MBP-KIF11-head,-stalk,-tail融合蛋白。经SDS-PAGE和Western blot法验证了高纯度纯化的融合蛋白。结论:建立了高效稳定的MBP-KIF11表达体系,为进一步研究KIF11与mRNA调控蛋白锌指结合蛋白1相互作用的区域打下基础。     

乳腺癌转移的分子机制

乳腺癌是一种容易发生器官转移的女性常见恶性肿瘤。乳腺癌细胞的特异性、转移器官微环境以及二者之间的相互作用是形成乳腺肿瘤转移的重要因素。乳腺癌细胞以及靶点组织所表达的一些细胞因子,使乳腺癌细胞扩散到转移灶器官并形成转移瘤成为可能。本文就乳腺癌转移过程中所涉及到的胞外基底膜结构改变、乳腺癌细胞的迁移行为变化以及转移所需微环境等作一综述。     

在酿酒酵母中表达人血清白蛋白

目的：利用酵母表达系统表达人血清白蛋白（HSA）。方法：用PCR方法扩增HSAcDNA,利用限制性内切酶将含HSA片段定向插入酵母表达质粒pYET中构建分泌型重组表达载体pYET-HSA,通过DNA测序确定构建的融合蛋白基因序列的正确性。用重组质粒转化酿酒酵母感受态细胞,在亮氨酸营养缺陷型培养基上筛选含重组质粒的酵母转化子菌落。培养转化子酵母,表达HSA,经十二烷基硫酸钠．聚丙烯酰胺凝胶（SDS．PAGE）和Westernblot检测表达情况。结果：DNA序列分析显示,编码外分泌型HSA的基因构建成功。免疫印迹和SDS．PAGE检测结果显示,pYET-HSA酵母转化子可在非诱导条件下表达分泌型可溶性HSA。结论：在酿酒酵母中成功表达HSA。     

低分子肝素对新生鼠肝细胞先天性感染人巨细胞病毒的影响

目的 研究低分子肝素( LMWH)对新生鼠肝细胞先天性感染人巨细胞病毒(HCMV)病毒学和病理学的影响.方法 取健康纯系清洁级BALB/c鼠60只,10周龄,雌雄各半,均分为5组,每组6对.LMWH干预组和阳性对照组腹腔接种6.0 lg半数组织培养感染剂量(TCID50)的HCMV AD169,空白对照组腹腔注射高糖改良Eagles培养液0.5 mL/只,然后交配.LMWH干预Ⅰ组的雌鼠在孕期给予皮下注射LMWH 1000 U/kg×10 d;LMWH干预Ⅱ组的雌鼠在孕期给予皮下注射LMWH 1000 U/kg×5d,待生产后再给新生鼠皮下注射LMWH 1000 U/kg×5 d;LMWH干预Ⅲ组在生产后予新生鼠皮下注射LMWH 1000 U/kg×10d.产后10 d处死新生鼠,取肝脏,进行病毒分离、干湿质量测定、病理学检查和荧光定量PCR检测.多组间比较采用方差分析.结果 阳性对照组新生鼠肝组织悬液中10d可分离到HCMV,而LMWH干预的3组新生鼠需24 d分离到HCMV.阳性对照组新生鼠肝组织有浊肿、空泡变性,核内有嗜碱性包涵体,部分肝细胞坏死,而LMWH干预组肝组织仅有轻度肝细胞浊肿变性,炎性反应轻微,类似空白对照组.LMWH干预组肝组织含水量较阳性对照组明显降低.LMWH干预的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组50 mg肝组织HCMV DNA载量对数值分别为(3.26±0.43)、(3.26±0.41)和(3.32±0.51) lg拷贝,较阳性对照组的(7.38±0.53) 1g拷贝显著降低(F=314.620,P＜0.01),但LMWH干预组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LMWH在宫内和出生后干预能显著减少肝细胞HCMV复制,减轻肝组织炎性反应.     

低分子质量肝素联合更昔洛韦体外抗人巨细胞病毒的作用

目的 研究低分子质量肝素(LMWH)联合更昔洛韦(GCV)体外抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定LMWH联合GCV对人胚肺成纤维细胞(HELF)的最大无毒质量浓度(TC0).应用体外细胞培养技术建立HCMV-AD169感染HELF模型.固定联合药物中LMWH的TC0(625.00 mg·L-1),设LWMH 625.00 mg·L-1、GCV 35.00 mg·L-1、GCV 17.50 mg·L-1、GCV 8.75 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 35.00 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 17.50 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 8.75 mg·L-1 7个不同用药组,分别干预HCMV感染细胞模型,使用MTT法检测各组细胞存活率,观察感染细胞特征性细胞病变(CPE),同时应用荧光定量PCR法检测用药后各组HCMV的载量.结果 联合药物的TC0中GCV的质量浓度为375.00 mg·L-1,LMWH的质量浓度为625.00 mg·L-1.当HCMV AD169浓度为100倍半数组织培养感染量(TCID50)感染HELF时,LMWH和GCV均可提高受染细胞存活率,降低受染细胞的HCMV DNA的拷贝数;当固定LMWH的TC0,与3种不同质量浓度GCV配伍时,均在HELF上有明显的抗HCMV的生物活性,并显示配伍后的抑制作用明显大于对应质量浓度单用GCV的抑制作用(P<0.01);当联合用药中GCV剂量减半时与全量应用GCV时的抗HCMV效果相同[即GCV 35.00 mg·L-1组与联合用药LMWH 625.00 mg·L-1+GCV 17.50 mg·L-1组的病毒抑制率和DNA拷贝数比较差异无统计学意义(P>0 05)];且联合用药对细胞的毒性试验结果及显微镜下观察细胞形态变化显示,随着联合用药中二者药物质量浓度的下降,细胞存活率升高,对细胞的毒性作用减弱.结论 LMWH联合GCV具有良好的体外抗HCMV作用,二者具有协同抗病毒作用.     

棉签棒用于近掌指关节静脉穿刺固定的效果观察

目的 寻找近掌指关节处静脉穿刺后妥善的固定方法.方法 将112例近掌指关节处静脉穿刺患者随机分为对照组与观察组各56例.观察组采用棉签棒固定穿刺部位,对照组采用传统敷贴固定.观察两组一次固定成功率及输液渗漏发生率.结果 观察组一次固定成功率显著高于对照组(χ2=17.62,P＜0.01),输液渗漏发生率显著低于对照组(χ2=14.48,P＜0.01).结论 棉签棒固定近掌指关节静脉穿刺效果可靠,简单方便,患者易接受.     

多层羊膜移植治疗病毒性角膜溃疡的护理

目的探讨多层羊膜移植治疗病毒性角膜溃疡的护理措施。方法对21例21眼行多层羊膜移植术的病毒性角膜溃疡患者制定和执行护理方案,总结护理经验。结果 21例（21眼）患者,术后角膜溃疡愈合良好,随访1年无复发。结论多层羊膜移植治疗病毒性角膜溃疡疗效确切,良好的围手术期护理能促进创面愈合和减少并发症。