MiR-150特异调控胸腺iNKT细胞的发育和成熟

目的:探讨miR-150在胸腺传统T细胞和恒定型自然杀伤性T细胞(iNKT)发育和成熟中的作用。方法:采用Real-time PCR检测miR-150在胸腺传统T细胞和iNKT细胞中的表达,流式细胞术检测miR-150基因敲除小鼠胸腺传统T细胞和iNKT细胞的发育和成熟。结果:miR-150在胸腺传统T细胞和iNKT细胞中均有表达,且在iNKT细胞发育成熟过程中表达逐渐增加,缺失miR-150不影响传统T细胞发育,但导致iNKT细胞发育和成熟障碍。结论:miR-150特异调控小鼠胸腺iNKT细胞的发育和成熟。     

锌指蛋白ZNF185对粒细胞白血病细胞增殖的影响及表达调控研究

目的检测锌指蛋白ZNF185对粒细胞白血病细胞增殖的影响,探讨调控ZNF185表达的分子机制。方法采用Western-blot检测ZNF185的表达。克隆ZNF185编码序列,转染粒细胞白血病细胞,检测细胞增殖。采用甲基化特异PCR检测ZNF185基因的甲基化。结果 ZNF185在人正常中性粒细胞中高表达,而在粒细胞白血病细胞中表达显著降低;过表达ZNF185显著抑制白血病细胞增殖;ZNF185在粒细胞白血病细胞中的甲基化显著增加。结论 DNA甲基化抑制ZNF185在白血病细胞中的表达进而促进细胞增殖。     

阿克拉霉素对Hela细胞染色体形成及细胞凋亡的影响

①目的探讨阿克拉霉素对Hela细胞染色体形成的影响机制及与细胞凋亡的关系。②方法　MTT测定阿克拉霉素对Hela细胞的IC50值。不同浓度阿克拉霉素作用于Hela细胞24h后,制备染色体,Giemsa染色、观察。应用吖啶橙和嗅乙啶双荧光染色及DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。Western-blot分析丰胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)含量变化。③结果　阿克拉霉素对Hela细胞的IC50值为6.83μg/ml。染色体分析表明,阿克拉霉素作用于Hela细胞一定时间后,染色体凝集不规则.正常M期染色体形成受阻。细胞凋亡检测可见不同药物组差异显著。Western-blot分析表明,高浓度药物处理组Caspase-3表达比对照组显著增加。④结论　阿克拉霉素能够阻止Hela细胞染色体形成与分离.导致细胞G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡。Caspase-3在Hela细胞凋亡中发挥重要作用。     

应用血浆置换治疗早期感染性休克效果分析

目的 探讨血浆置换治疗早期感染性休克的效果.方法 选取2009年1月-2011年8月医院进行治疗的23例早期感染性休克患者为观察组,同期的23例感染性休克患者为对照组,观察组在对照组的基础上加用血浆置换方案进行治疗后,将两组患者治疗前及治疗后12 h的血清肌酐(Cr)、平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)及动脉血氧饱和度(SaO2)水平及总多巴胺使用量、多器官功能障碍综合征(MODS)、急性肾功能衰竭(ARF)发生率、死亡率进行比较.结果 观察组治疗后12 h的血清Cr(105.6±10.9) μmol/L低于对照组,MAP(72.3±3.5)mmHg、CVP(10.6±1.5)mmHg及SaO2(96.2±3.2)％水平高于对照组,总多巴胺使用量(178.5±25.4)mg小于对照组,MODS(21.74％)、ARF(8.70％)发生率、死亡率(8.70％)低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 血浆置换治疗早期感染性休克的效果好,显效快,预后较好.     

食管癌疫苗抗癌机理研究

  目的  对食管癌可溶性抗原和超抗原SEC构建的肿瘤疫苗的抗癌机理进行研究。  方法  培养食管癌细胞Eca109,提取其抗原成分,和超抗原金葡素SEC构建成肿瘤疫苗;分离人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMC）,经肿瘤疫苗联合作用,进行体外培养,进行增殖,成为效应细胞;流式细胞术（FCM）测定效应细胞表型;细胞毒试验检测其杀伤活性,FCM测定效应细胞诱导靶细胞凋亡情况。  结果  经肿瘤疫苗刺激的淋巴细胞组增殖活性最强,于72 h达到高峰,并且上调CTLs中CD8+T细胞群。肿瘤疫苗刺激的淋巴细胞组诱导的CTLs对靶细胞杀伤活性显著高于单纯淋巴细胞组（P < 0.01）。经效应细胞作用后,靶细胞的凋亡率为32.44%,而对照组仅6.38%的细胞凋亡,具有统计学差异（P < 0.01））。  结论  食管癌抗原与超抗原构建的肿瘤疫苗能诱导效应细胞明显增殖、活化、并产生高效、特异的抗肿瘤效果,效应细胞可诱导靶细胞凋亡,从而发挥抗癌作用。      

肺肿瘤小鼠MDSC、 Treg 及传统T 细胞变化研究

摘要： 目的 探讨肺肿瘤小鼠骨髓源性抑制细胞 （MDSC）、 调节性 T 细胞 （Treg） 和传统 T 细胞的变化及机制。方法 采用配对设计将 20 只 C57BL/6 小鼠随机均分为 Lewis 肺癌细胞注射组 （LLC 组） 和正常对照组 （NC 组）, LLC 组采用皮下注射 LLC 细胞 100 μL （1×106 ） 制备肺肿瘤小鼠模型, 对照组注射等量生理盐水。待肿瘤形成后取小鼠脾细胞, 采用流式细胞仪检测肺肿瘤小鼠 MDSC、 Treg 及 CD4+ 和 CD8+ T 细胞比例和数量变化, 膜联蛋白-V （Annexin-Ⅴ）染色检测 CD4+ 和 CD8+ T 细胞凋亡变化, 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 （BrdU） 染色检测 CD4+ 和 CD8+ T 细胞增殖变化。结果 与 NC 组相比, LLC 组脾脏 MDSC 比例和数量明显增加, CD4+ Foxp3+ Treg 所占 CD4+ T 细胞比例和数量明显增加,而 CD4+ 和 CD8+ T 细胞所占脾细胞比例和数量明显降低 （均 P < 0.05）。与 NC 组相比, LLC 组 CD4+ 和 CD8+ T 细胞增殖明显降低, 同时 CD8+ T 细胞凋亡明显增加 （P < 0.05）。结论 MDSC 和 Treg 细胞在肺肿瘤小鼠数量增加, 同时, MDSC 和Treg 抑制 CD4+ 和CD8+ T 细胞增殖, 并促进 CD8+ T 细胞凋亡。     

医学免疫学双语教学的实践与体会

2001年教育部提出“本科教育要创造条件使用英语等外语进行公共课和专业课教学”的相关要求。河北联合大学基础医学院在2006年将生物技术专业医学免疫学课程作为双语教学示范课程,至今该课程已开展八年。在长期的双语教学实践中,授课教师探索出大量教学经验及体会,从而培养学习兴趣,提高教学质量。     

miR-150 基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响

目的:探讨miR-150 基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响。方法:采用miR-150ko 小鼠观察该小鼠的窝产仔数和离乳率及生长曲线,测定其生殖指标;以全自动血球计数仪和自动生化分析仪测定2 月龄miR-150ko 小鼠和正常对照C57BL/6J 小鼠血液细胞学和血清生化参数。结果:miR-150ko 小鼠窝产仔数与离乳率与C57BL/6J 正常对照小鼠相比均显著下降;miR-150ko 小鼠外周血白细胞计数、中间细胞数、中性粒细胞数、中间细胞百分比、中性粒细胞百分比与C57BL/6J小鼠相比显著升高;而血小板计数、淋巴细胞百分比显著下降;miR-150ko 小鼠的血清葡萄糖、总胆固醇水平较正常对照小鼠显著增高。结论:miR-150 基因缺失可影响到小鼠的繁殖功能,并对某些血液细胞学指标及血糖、胆固醇水平产生影响。     

中西医结合治疗心衰的免疫相关指标检测

目的:研究中西医结合治疗心衰对相关指标水平的影响.方法:随机选取小鼠40只进行心衰模型复制,心衰模型小鼠随机分为模型组、黄芪多糖组、肼苯哒嗪+硝酸异山梨醇脂组及黄芪多糖+肼苯哒嗪联合硝酸异山梨醇脂组,每组10只,未经干预的10只小鼠作为对照组.对比4组的治疗干预对相关指标水平的影响差异.结果:与对照组进行对比,模型组的肿瘤坏死因子-α水平明显较高(P<0.05);与模型组进行对比,黄芪多糖组的核因子-κB水平明显降低,补体片段C3 c水平明显较高(P<0.05);肼苯哒嗪+硝酸异山梨醇脂组的核因子-κB、疫分子肿瘤坏死因子-α、超敏C反应蛋白水平明显较低(P<0.05);黄芪多糖+肼苯哒嗪联合硝酸异山梨醇脂组的核因子-κB、肿瘤坏死因子-α、超敏C反应蛋白水平明显较低(P<0.05),而补体片段C3 c水平则明显较高(P<0.05).结论:中药黄芪多糖联合西药肼苯哒嗪、硝酸异山梨醇酯中西医结合治疗心衰小鼠具有良好的治疗效果,能够降低核因子-κB、肿瘤坏死因子-α和超敏C反应蛋白水平,但提高补体片段C3 c水平.