抗生素的合理应用

随着抗生素日益广泛的使用，不合理应用的现象普遍存在。本文就如何合理使用抗生素进行讨论，希望能对此现象产生有益的影响。     

抓好临床教学工作 促进医疗业务发展

随着医学科学技术的迅猛发展和人民对医疗保健需求的不断提高，医疗单位重视引进人才，把加强专业技术人员队伍建设视为医院发展的重要基础。高等医学人才的来源完全依靠高等院校的培养，而医院提供良好的临床教学条件和规范化的临床教学管理，是提高医学院校临床教学质量的一个不可缺少的重要环节。因此，承担医学院校的教     

亚溶解剂量的补体C5b-9复合物诱导肾小球系膜细胞增生及其NF-κB活化的作用

目的：研究亚溶解剂量补体C5b-9（SC5b-9）复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增生和细胞外基质（ECM）分泌的作用，并探讨NF-κB核转录因子是否介入SC5b-9的促增生效应。方法：体外纯培养大鼠GMCs，并行光镜、电镜及功能鉴定。质控SC5b-9后，将GMCs分为5组，即SC5b-9刺激组、SC5b-9＋PDTC组（吡咯啉烷二甲基硫脲）、ATS组、灭活人血清组及完全营养液组。应用RT-PCR检测40min PCNA和FN mRNA水平；同时应用免疫组化检测18 h GMCs增殖细胞核抗原（PCNA）、平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤维粘连蛋白（FN）及细胞核内NF-κBp65表达情况。结果：实验40min，SC5b-9刺激组PCNA和FN mRNA表达上调，PDTC处理后表达则明显下降，其余3组PCNA均呈阴性，另3组FN则均有一定基础表达。SC5b-9刺激组，GMCs免疫组化显示：PCNA、α-SMA、FN、NF-κBp65表达增加，PDTC处理后则4者表达明显下调，其余各组，PCNA、α-SMA、NF-κRn65均呈阴性，FN亦有一定的基础表达．结论．SC5b-9可能通过激活NF-κR促讲GMCs增生和ECM分泌.     

不同诊断标准对心电图诊断低血钾与生化符合率的影响

目的 探讨应用几种不同的诊断标准对于心电图诊断低血钾的价值.方法 选取生化确诊为低血钾的100例患者为研究组,25例血钾及心电图正常者为对照组,分析不同诊断标准下血钾的诊断情况.结果 当U>0.5 T或者T-U融合诊断低血钾的敏感度为72.9%、特异性为97%,这一组合最为合理且同生化检查的符合率高.结论 在对低血钾的诊断上,以U>0.5T或者T-U融合标准诊断敏感性及特异性高,但U波易受多种因素的影响,为此诊断的时候需排除心绞痛、高血压等意外情况所致U波增高的因素,确保诊断效果.     

NF⁃κB p65调控IRF⁃8基因启动子活性及其启动子结合元件的初步鉴定

目的：探讨大鼠核因子?κB（nuclear factor?κB,NF?κB）p65亚基在细胞内过表达和其活性变化对干扰素调节因子?8（interferon regulatory factor?8,IRF?8）基因启动的影响,并初步筛查IRF?8启动子上可能的p65结合元件。方法：采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术扩增大鼠p65基因蛋白编码区（complete sequence coding,CDS）序列,将其插入到空载pIRES2?EGFP质粒中,构建大鼠野生型（wild type,WT）p65过表达质粒（pIRES2?p65 WT）。在此基础上,将p65第535位丝氨酸（serine,S）突变为天冬氨酸（aspartic,D）或丙氨酸（alanine,A）,分别构建p65持续活化突变型质粒（pIRES2?p65 S535D）和p65显性负性突变型质粒（pIRES2?p65 S535A）。之后应用生物信息学软件预测IRF?8基因启动子区p65的结合元件,并据此构建IRF?8启动子全长（full?length,FL）和3个截短的荧光素酶报告质粒,即pGL3?IRF?8?FL（-1 892 ~ +174 nt）、pGL3?IRF?8?1（-1 360 ~ +174 nt）、pGL3?IRF?8?2（-752 ~ +174 nt）和pGL3?IRF?8?3（-68 ~ +174 nt）。将上述质粒行不同组合共转染人胚肾293T（human embryonic kidney 293T,HEK?293T）细胞,Western blot和荧光素酶实验分别检查p65的表达和IRF?8的启动子活性,并分析IRF?8启动子区可能的p65结合元件。结果：菌液PCR及测序证实上述质粒构建成功。分别将pIRES2?p65 WT、pIRES2?p65 S535D、pIRES2?p65 S535A和pGL3?IRF?8?FL共转染HEK?293T,发现过表达pIRES2?p65 WT或pIRES2?p65 S535D均可明显增加IRF?8启动子活性,且以pIRES2?p65 S535D更为显著;而过表达pIRES2?p65 S535A后,IRF?8启动子活性无明显变化。将pGL3?IRF?8?FL、pGL3?IRF?8?1~3和pIRES2?p65 S535D共转染HEK?293T后发现,pGL3?IRF?8?3的启动子活性显著低于pGL3?IRF?8?FL、pGL3?IRF?8?1和pGL3?IRF?8?2,提示大鼠IRF?8启动子-752~68 nt区域可能存在p65结合元件。结论：在HEK?293T细胞内过表达野生型或持续活化突变型p65可显著促进IRF?8基因的启动,且p65与IRF?8启动子的结合元件可能位于-752~-68 nt部位。     

大鼠野生型TRAF6基因和TRAF6 shRNA表达质粒的构建及鉴定

目的:构建大鼠野生型肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因及其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达和沉默TRAF6基因的情况?方法:用DNA重组技术将针对大鼠TRAF6基因的CDS区序列(加HA标签)和针对其不同位点所设计的3种shRNA序列分别克隆到pcDNA3.1及pGenesil-1/GFP真核表达质粒中?在酶切鉴定及序列测定正确后,用NeonTM电转仪,将上述质粒分别转染入培养的大鼠GMC中,然后用Western blot检查HA-TRAF6融合蛋白的表达情况,同时筛选最有效的TRAF6 shRNA?结果:限制性酶切及核酸序列分析确证,上述TRAF6基因过表达和shRNA表达质粒均构建成功?Western blot显示,构建的pcDNA3.1-HA-TRAF6质粒能在大鼠GMC中表达,且TRAF6 shRNA-1具有最佳的沉默效率?结论:本实验成功构建了大鼠野生型TRAF6真核表达质粒及其特异性的shRNA表达载体,这为今后进一步研究TRAF6基因的生物学功能提供了实验基础?     

甲状腺功能减退症妇女子代的甲状腺功能、智力和身体发育的研究

目的探讨甲状腺功能减退症妇女对其子代甲状腺功能、智力发育和身体发育情况的影响。方法将2004年7月-2006年1月在笔者所在医院就诊的60例甲状腺功能减退症（甲减）妇女及30例健康妇女的子代分别作为研究组及对照组。甲减妇女确诊后均给予甲状腺激素（优甲乐或甲状腺片）替代治疗。动态测定（至少每月1次）60例甲减母亲妊娠期间的甲功三项（FT3、FT4、TSH）,根据母亲的甲功三项水平将婴儿分为甲减控制良好组（甲功三项控制在正常水平、TPOAb阴性）、甲减控制不佳组（妊娠期间甲功三项有任何异常或TPOAb阳性）。测定三组母亲的婴儿在0、12、24、36个月时的甲状腺功能（FT3、FT4、TSH）、发育商、语言和功能构成、身高及体重等指标。比较三组的甲状腺功能和智力、身体发育有无差异。结果新生儿期甲减控制不佳组的TSH显著高于甲减控制良好组及对照组,血清FT4、FT3、水平显著低于甲减控制良好组及对照组（P〈0．05）。12个月、24个月、36个月三组的TSH、FT4、FT3水平差异无统计学意义（P〉0．05）。甲减控制不佳组的发育商在新生儿期、12个月、24个月、36个月均明显低于甲减控制良好组及对照组（P〈0．05）。甲减控制不佳组的体格发育在新生儿期、12个月、24个月、36个月均滞后于甲减控制良好组及对照组（P〈0．05）。结论甲状腺功能减退症妇女经合理、规范治疗后,在妊娠期间维持甲状腺功能在正常水平（TSH〈2．5mlU／L,TPOAb阴性）,其子代的甲状腺功能、智力及体格发育与健康妇女的子代差异无统计学意义。仍存在甲减或亚临床甲减的妇女其子代可出现短暂的甲状腺功能异常,并较长时间表现有智力和运动、体格发育滞后。提示筛查和积极治疗妊娠早、中期甲状腺功能异常,对优生优育十分必要,加强对患甲状腺疾病母亲及其孩子的管理有重要意义。