血管紧张素Ⅱ诱导HEK293细胞增殖中Ca~(2+)的变化及意义

目的:建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人胚肾细胞(HEK293)增殖模型,检测增殖效果与Ca2+变化及TR-PC6的表达,并观察氯沙坦(Losartan)的干预作用。方法:用不同浓度AngII(10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5mol/L)诱导细胞,在不同时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h),采用MTT法及台盼蓝法检测细胞增殖及活性,确定最适浓度及时间构建增殖模型。予Losartan干预24 h后用激光扫描共聚焦显微镜测Ca2+变化,RT-PCR、Western Blot检测TRPC6表达情况。结果:AngII10-6mol/L诱导HEK293 24h后细胞增殖及Ca2+升高明显,Losartan干预后细胞增殖及Ca2+明显下降。TRPC6表达(+/-),胞膜、胞质定位不清。结论:AngⅡ诱导HEK293细胞增殖与Ca2+升高有关,具有一定的时间和剂量依赖性。Losartan抑制细胞增殖及Ca2+表达下降可能与AT1R作用相关。HEK293细胞自身无明显表达TRPC6,可利用此表达系统进一步研究外源性TRPC6与Ca2+变化的关系。