系列N-of-1试验定量数据混合效应模型的模拟研究

目的 对服从正态分布、有残留效应的系列N-of-1试验定量数据进行模拟研究,比较配对t检验、混合效应模型和贝叶斯混合效应模型三种方法的统计性能.方法 N-of-1试验设定为3个周期,每个周期患者随机接受两种处理.模拟研究的步骤包括:产生六元的N-of-1正态分布数据,随机分配处理和研究对象,增加残留效应,构建分析模型,...     

探索适合中医药N-of-1试验的设计方案及模型

目前,中医药研究领域广泛开展单病例随机对照试验(N-of-1试验)。N-of-1试验要求研究的药物具有起效快、半衰期短的特点。由于中医药成分复杂,半衰期较长,难于满足上述要求;而且,基于伦理学的考虑,实际临床研究中一般不允许受试者存在洗脱期(不接受任何治疗)。由此提出了无洗脱期的N-of-1试验方案,并根据设计方案的特点,构建对应的混合效应模型。N-of-1试验的个体化治疗理念与中医辨证论治有相通之处,可以为中医药和循证医学的结合提供一个较好的桥梁。     

人FoxA1基因重组慢病毒载体的构建和鉴定

【摘要】 目的 构建叉头盒蛋白A1(Forkhead-boxA1,FoxA1)的重组慢病毒表达载体,为探究其功能和作用机制奠定基础。方法〓设计基因引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增出FoxA1的cDNA序列,然后将其克隆至PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP-puro慢病毒表达载体上,经PCR、双酶切反应及DNA测序鉴定,将阳性重组FoxA1表达载体、pCMV-VSV-G 和pCMV-dR8.91包装质粒共转染到HEK-293T细胞进行病毒包装收集病毒浓缩液,然后再感染293T细胞,通过观察绿色荧光蛋白来计算病毒滴度,最后用病毒转染原代培养人皮肤成纤维细胞(HFFs),通过实时荧光定量PCR检测FoxA1 mRNA的表达水平。结果〓重组慢病毒表达载体FoxA1经PCR扩增、酶切及测序鉴定正确,并得到滴度为1×108 TU/mL的病毒液,病毒感染人皮肤成纤维细胞后表达显著增强。结论〓成功构建了人FoxA1重组慢病毒载体,并可在HFFs内高效表达,为后续FoxA1的功能和机理研究奠定了实验基础。     

miRNA-122促进小鼠胚胎干细胞源性肝前体细胞的分化与成熟

 目的： 通过miRNA-122 (miR-122)转染胚胎干细胞（ESCs）源性肝前体细胞,观察及评估其是否能推进ESCs向肝细胞的分化过程。方法：采用丁酸钠、成纤维细胞生长因子4(FGF-4)及地塞米松(Dex)联合序贯诱导小鼠ESCs使之初步分化为肝前体细胞,然后利用Gateway技术构建出pAV.Ex1d-CMV>miR122/IRES/eGFP重组腺病毒表达载体,使其转染贴壁诱导第9天的小鼠ESCs源性肝前体细胞,获得稳定高表达miR-122的细胞后继续培养。采用荧光显微镜观察转染后细胞形态的变化;使用real-time RT-PCR检测肝特异性基因的表达;免疫荧光检测肝特异性蛋白表达水平;吲哚氰绿摄取实验、糖原染色及尿素合成功能实验检测肝细胞功能。结果：丁酸钠、FGF-4及Dex联合序贯诱导可将小鼠ESCs成功地诱导为肝前体细胞。转染miR-122后,细胞在形态学上更接近成熟肝细胞;肝特异性基因白蛋白(ALB)、甲状腺素运载蛋白、α1抗胰蛋白酶、葡萄糖-6-磷酸酶、细胞角蛋白8、胆固醇7α-羟化酶及细胞色素P450 3A4的mRNA表达均增高;肝特异性蛋白ALB及细胞角蛋白18均表达增高,而甲胎蛋白表达降低;吲哚氰绿摄取实验、糖原染色及尿素合成功能实验结果均显示转染miR-122后肝细胞功能较对照组明显增强。结论：丁酸钠、FGF-4及Dex联合序贯诱导可将小鼠ESCs成功地诱导为肝前体细胞;miR-122能够有效地促进小鼠肝前体细胞的分化与成熟。     

项目反应理论的Parscale软件实现

正项目反应理论(item response theory,IRT)也称条目反应理论,广泛用于教育学、心理学及医学量表测验中。Parscale软件是实现IRT理论的常用软件,由Eiji M uraki和Darrell Bock等开发,现在由Scientific Softw are International(SSI)公司拥有(http://w w w.ssicentral.com/irt/)。Parscale软件可以用于二     

人肝细胞核因子4α重组慢病毒载体的构建与鉴定

【摘要】〓目的〓构建肝细胞核因子4α(hepatocyte nuclear factor 4 alpha, HNF4A)的过表达慢病毒载体,并对其进行病毒包装、鉴定与滴度测定,为进一步研究HNF4A的功能和作用机制奠定基础。方法〓利用PCR法扩增人类基因组DNA中HNF4A的cDNA序列,并将其克隆至PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP-puro慢病毒表达载体上,经双酶切及测序鉴定,将阳性重组PCDH-CMV-HNF4A-EF1a-GFP-puro表达载体、pCMV-VSV-G 和pCMV-dR8.91三质粒共转染到HEK-293T细胞,收集上清,将获得的病毒悬液浓缩后梯度稀释后感染HEK-293T细胞,并利用绿色荧光蛋白检测病毒滴度。将重组慢病毒感染原代培养人皮肤成纤维细胞HFFs,并利用荧光定量PCR检测HNF-4A的表达。结果〓重组慢病毒表达载体PCDH-CMV-HNF4A-EF1a-GFP-puro酶切及测序鉴定证明载体构建成功,并得到滴度为1×108 TU/mL的病毒液。病毒感染人皮肤成纤维细胞后HNF4A表达显著增强。结论〓通过优化载体构建方法成功构建人HNF4A的重组慢病毒载体并可在HFFs内显著过表达HNF4A,为HNF4A的研究提供更高效稳定的基因载体。     

人肝脏特异性miR-122重组慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建microRNA-122(miR-122)的重组过表达慢病毒,并对其进行病毒包装、鉴定与滴度测定,为进一步研究miR-122的功能和作用机制奠定基础。方法利用PCR法扩增人类基因组DNA中miR-122发夹前体结构RNA,并将其克隆至PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP-puro慢病毒表达载体上,经酶切及基因测序鉴定,将阳性重组PCDH-CMV-miR-122-EF1a-GFP-puro表达载体、p CMV-VSV-G和p CMVdR8.91三质粒共转染到HEK-293T细胞,收获上清液,将所得病毒悬液浓缩后梯度稀释后感染HEK-293T细胞,并利用绿色荧光蛋白进行病毒滴度测定。将重组慢病毒转染原代培养人皮肤成纤维细胞,并利用实时定量PCR检测miR-122的表达。结果重组慢病毒表达载体PCDH-CMV-miR-122-EF1a-GFP-puro酶切及测序鉴定证明载体构建成功,并得到滴度为3×108TU/m L的病毒液。病毒感染人皮肤成纤维细胞后miR-122表达明显增强。结论通过优化miRNA载体构建方法成功构建人miR-122的重组慢病毒载体并可在人类成纤维细胞内显著过表达miR-122,为miR-122的研究提供更高效稳定的基因载体。     

同伴教育模式对类风湿关节炎患者健康教育效果评价

目的 探索同伴教育模式对类风湿关节炎(RA)患者的健康教育效果。方法 应用随机数字表法,选取在滨州市某三甲医院出院的RA患者160例,分为对照组80例和干预组80例。对照组采用常规电话回访健康教育干预模式,干预组采用同伴教育模式,干预时间为3个月,比较干预前后两组患者生活质量(采用SF-36量表)、焦虑抑郁情况(采用SAS、SDS量表)、服药依从性(采用Morisky服药依从量表)。结果 与对照组相比,干预后干预组患者的生活质量8个维度中在精力(VT)、社会功能(SF)、情绪职能(RE)、精神健康(MH)方面评分明显增高(P<0.05);与对照组相比,干预组患者的SAS、SDS评分明显增高(P<0.05);与对照组相比,出院3个月后,干预组患者服药依从性优于对照组(P<0.05)。结论 同伴教育能有效改善RA患者焦虑抑郁情绪,促进患者积极配合,提高服药依从性,从而进一步提高患者生活质量。     

中医综合护理对老年膝骨关节炎生活质量的影响分析

目的 分析中医治疗老年膝骨关节炎中采用综合护理对生活质量的影响。方法 选取 2021 年 6 月至 2022 年 6 月期间在本 院接受膝骨关节炎治疗的 70 例老年患者作为研究对象。将患者随机分为对照组和观察组，每组各 35 例。对照组采取常规中医 护理；观察组给予患者综合护理。分析对比两组的生活质量、膝关节的功能和结构严重程度以及护理满意率。结果 护理前， 两组的生理能力、生理技能、社会功能、精神状况、活力、总体健康、生理能力各项生活质量评分均无明显差异（P>0.05）。 护理后，观察组的各项生活质量评分均显著高于对照组（P<0.05）。护理前，两组的 WOMAC、VAS 评分均无明显差异（P>0.05）。 护理后，观察组的 WOMAC、VAS 评分均比对照组显著降低（P<0.05）。观察组的护理满意率显著高于对照组（P<0.05）。结论 在老年膝骨关节炎患者的护理中，采用中医综合护理能提高患者的生活质量，改善膝关节的功能和结构，提高护理满意度。