AP-1在锌离子诱导BEAS-2B细胞COX-2基因转录中作用

目的 探讨外源性锌离子对人支气管上皮细胞环氧化酶2(COX-2)基因诱导表达及转录因子激活蛋白-1 (AP-1)的转录活性调节作用.方法 以人支气管上皮细胞株BEAS-2B作为体外模型,Real-timePCR方法检测锌离子对BEAS-2B细胞COX-2基因表达影响;染色质免疫沉淀(ChIP)实验检测50.0 μmol/L锌离子温育8h后c-Jun(AP-1亚单位)和COX-2启动子的结合;用野生型和AP-1结合位点突变的COX-2启动子报告质粒转染BEAS-2B细胞,50.0μmol/L锌离子温育8h,采用荧光素酶报告基因检测COX-2基因启动子转录活性.结果 50.0μmol/L Zn2+组BEAS-2B细胞中COX-2的mRNA相对表达量为(1.23±0.16),是对照组表达量(0.16±0.02)的7.68倍,表达明显升高(P ＜0.5);AP-1可与COX-2的基因启动子结合,COX-2基因启动子区AP-1结合位点突变可使锌离子所致的COX-2高转录活性降低82％.结论 转录因子AP-1可调节外源性锌离子所致人支气管上皮细胞COX-2基因的转录表达.     

新农合异地直补问题分析及对策

新农合省内异地直补政策是关系全国三分之二人口切身利益的大事。但直补工作也给定点医院的经济运行和管理等带来新的压力和挑战。在公立医院改革、健全分级诊疗体系、大力开展全国新农合跨省就医费用核查和结报工作的大环境下,定点医院应了解并着力解决好存在的问题,力争使直补政策顺利实施,同时提升定点医院管理服务水平,实现二者协同发展。     

外源性锌离子对人呼吸道上皮细胞内肿瘤抑制蛋白PTEN活性的影响及其机制

目的探讨外源性锌离子对人呼吸道上皮细胞肿瘤抑制蛋白PTEN的活性的影响及其机制。方法以人呼吸道上皮细胞株BEAS-2B作为体外模型,应用孔雀绿法测定锌离子对PTEN磷酸酶活性的影响;利用Western Blot法检测锌离子对PTEN蛋白磷酸化的影响。利用酪蛋白激酶2(CK-2)试剂盒测定锌离子对PTEN上游激酶CK-2活性的影响。结果 50μmol/L锌离子刺激可抑制PTEN蛋白磷酸化及其磷酸酶活性(P<0.05)。在相同实验条件下,锌离子刺激还可抑制CK-2的活性(P<0.05)。此外,CK-2可致PTEN磷酸化(P<0.05)。结论外源性锌离子可能通过抑制CK-2的活性进一步抑制人呼吸道上皮细胞内肿瘤抑制蛋白PTEN磷酸酶活性。     

纳米氧化锌颗粒物诱导人支气管上皮细胞白细胞介素-8基因的表达及调控机制

目的 阐明纳米氧化锌颗粒ZnO-NPs(30 nm)对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)白细胞介素-8(IL-8)基因表达的影响及调控机制.方法 利用BEAS-2B细胞作为研究对象,采用噻唑蓝(MTT)法测定ZnO-NPs对细胞的损伤作用.应用RT-PCR技术及ELISA法检测纳米氧化锌颗粒物对细胞内IL-8 mRNA和蛋白表达的影响.利用IL-8 mRNA降解试验测定ZnO-NPs对转录后IL-8 mRNA稳定性的影响.结果 ZnO-NPs刺激可致细胞内IL-8 mRNA水平及培养液上清中IL-8蛋白含量明显升高.转录抑制剂可显著降低ZnO-NPs对IL-8 mRNA表达的诱导作用.在用放线菌素D终止IL-8 mRNA合成的前提下,ZnO-NPs可明显减缓细胞内IL-8 mRNA的降解.结论 纳米氧化锌颗粒物可提高IL-8 mRNA及蛋白在BEAS-2B内的表达水平；ZnO-NPs对细胞内IL-8 mRNA具有稳定作用.