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氯和二氧化氯灭活甲型肝炎病毒机理的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
为探讨氯和二氧化氯灭活HAV机理及用PCR评价消毒效果的可行性,采用细胞培养、ELISA及大片段逐步步移RT-PCR方法对消毒前后HAV感染性、HAAg抗原性及HAV核酸全序列进行检测。结果,以含有效氯10 mg/L消毒液作用30 min,或含二氧化氯7.5 mg/L的消毒液作用10 min,对HAV感染性的灭活率均为100%,均可破坏HAV核酸5’非编码区;但检测两者HAAg抗原性P/N值分别为3.21(阳性)与2.02(阴性)。结果表明,HAV感染性的灭活与HAV核酸5’非编码区破坏是一致的,可用PCR技术检测HAV核酸5’非编码区以判定HAV灭活与否。 相似文献
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自新中国成立以来,各种传染病的发病率,尤其是烈性传染病得到了有效的控制.但常见的肠道传染病诸如通过水和食品为媒介引起的食物中毒、伤寒、菌痢,却每年都有发生,甚至有时是暴发流行. 相似文献
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免疫磁性粒子的制备及性能初步观察 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:将免疫磁性分离技术应用到水和食品致病微生物检验工作中,达到快速地从样品中分离致病生生物的目的,以提高检测速度。方法:对磁性粒子首先进行高分子物质的包被,继而进行了三种磁性粒子对细菌的非特异性吸附现象和免疫磁性粒子对细菌特异性结合能力的观察。结果:示经包被的磁性粒子对细菌有很强的非特异性吸附,免疫磁性粒子对相应的细菌方法节省很多时间,可快速从样品中分离出致病微生物。 相似文献
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氯灭活甲型肝炎病毒与其核酸变化关系的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
为了解氯灭活HAV与HAV核酸变化的关系,采用大片段逐步步移RT一PCR技术对HAV核酸全序列进行扫描。结果,在25℃以10mg/L有效氯作用30min,可完全灭活HAV,而5mg/L有效氯作用60min则不能。在HAV核酸全序列中,各部分对氯的抗力不一,以5′NTR为敏感。用10mg/L有效氯作用30min,检测其为阴性,其次为3′NTR,当10mg/L有效氯作用60 min时,亦为阴性;结构区的某些片段对氯的抗力较强。以10mg/L有效氯作用30min,进一步缩小氯对HAV核酸作用敏感区间{即近5′NTR)的检测发现,病毒最初的1~671bp检测呈阴性,而669~1023bp仍呈阳性。结果表明,氯灭活HAV与其核酸5′NTR的损伤一致,在充分了解氯对HAV作用机理的基础上,PCR可用于消毒效果的评价。 相似文献
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甲型肝炎病毒 (hepatitisAvirus ,HAV )是一种单股正链RNA病毒 ,是全球急性传染性肝炎的主要病因 ,因为很容易引起甲型肝炎 (以下简称甲肝 )暴发流行 ,日益引起众多卫生工作者的普遍关注。目前评价饮水卫生的微生物指标并不能揭示感染性病毒的存在 ,因此如何建立一套有效的HAV检测方法在控制甲肝发病、流行过程中显得尤为重要。通过细胞培养检测HAV不仅灵敏度差、操作复杂 ,而且病毒的培养周期长 ,不易获得高滴度病毒 ,因此限制了它的应用。PCR以其更高的灵敏度和特异性 ,广泛应用到微生物检测领域 ,目前已建… 相似文献
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免疫PCR检测沙门菌方法的建立及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
1992年Sano等人〔1〕首次报告用免疫PCR方法检测微量的牛血清白蛋白。该方法将PCR技术的高敏感性与抗原抗体反应的特异性结合起来,具有极高的敏感性和特异性,更使PCR技术应用于对蛋白等非核酸类物质的检测。随后的报道大都用于检测HBsAg〔2〕、TNF〔3〕等可溶性蛋白。本文利用链亲和素和生物素之间的高度亲和力,采用生物素化羊抗鼠IgG作二抗,将单抗与DNA相连接,建立免疫PCR检测方法,用以检测颗粒性抗原细菌,并与ELISA方法进行了比较。 相似文献
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氯对甲型肝炎病毒抗原性及核酸多态性影响的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨氯灭活甲型肝炎病毒 (HAV)的机制 ,采用酶联免疫吸附试验和RNA的随机引物扩增指纹图谱技术分别检测在氯灭活HAV前后病毒抗原以及核酸多态性的变化。结果显示 :灭活病毒的感染性(加氯 10mg L或 2 0mg L接触 30min)先于破坏病毒的抗原性 (加氯 10mg L或 2 0mg L接触 6 0min) ,当病毒感染性被灭活时 ,往往可以看到病毒核酸多态性的变化。结果表明 :氯灭活HAV可能是通过破坏核酸局部片段所致。 相似文献
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目的 建立一种灵敏、特异的RT-PCR 方法检测环境中的HAV。方法 对两种RT-PCR,即常规两步法RT-PCR和一步法RT-PCR检测HAV的效果进行了观察,并采用半套式PCR对扩增产物的特民划性进行验证。结果两种RT-PCR与半套式PCR检测HAV均得到预期条带,所设计的引物对其它的肠道病毒扩增呈阴性;在同等反应条件下,一步RT -PCR的反应效率远高于常规RT-PCR,二者的检测灵敏度也有显著性差异,一步RT-PCR的检测灵敏 度为10TCID50/ml,两步法RT-PCR检测灵敏度为10^3TCID50/ml.结论 一步RT -PCR较常规RT-PCR易于操作,重复性好,不易污染,具有更高的反应效率和灵敏度. 相似文献