黄曲霉毒素M1的危害、污染现状及检测方法进展

本文针对黄曲霉毒素M1 的理化特性、危害、产生及防治进行了总结 ,详细介绍了黄曲霉毒素M1 的四类检测方法 ,并进行了比较 ,同时展望了检测方法的发展方向     

罂粟碱检测方法进展

罂粟碱(papaverine),化学名为6,7-二甲氧基-1-(3,4-二甲氧基苄基)-异喹啉[6,7-Dimethoxy-1-(3-4-dimethoxybenzy1)-isoquinoline],是从鸦片(opiμm)中提取或化学合成制得的一种异喹啉类生物碱[1],为结晶或白色结晶性粉末,熔点为146℃-148℃,几乎不溶于水,微溶于乙醇和乙醚,易溶于氯仿.     

酶联免疫吸附法检测罂粟碱研究(Ⅱ)抗体制备和酶标抗原合成

利用前文制备的罂粟碱－牛血清白蛋白（Pap-BSA)偶联物作为免疫抗原，免疫新西兰大白兔，获得效价为1：32的特异性抗罂粟碱免疫球蛋白（抗体）。同时，合成了罂粟碱－辣根过氧化物酶（Pap-HRP)结合物（酶标抗原），抗体和酶标抗原特性的鉴定结果令人满意。     

比较三种免疫分析法检测微囊藻毒素-LR

目的评估微囊藻毒素-LR(MC-LR)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、纳米均相时间分辨荧光免疫分析(NH-TRFIA)和酶联免疫分析(ELISA)三种免疫检测方法。方法通过比较包被板、反应步骤、信号系统和试剂用量,分析反应条件的差异;通过分析灵敏度、精密度和准确性,比较上述方法的性能指标;通过检测实际样品,评估方法的可靠性。结果 NH-TRFIA反应时间最短,试剂消耗量最少,灵敏度最高,量程宽;TRFIA信号最强,稳定性佳;三种方法精密度高,相对标准差均小于15%。三种方法检测实际样品与高效液相色谱法的分析结果差异无统计学意义,认为可靠。结论 TRFIA和NH-TRFIA,技术优势明显,应用前景广阔。     

三聚氰胺人工抗原合成方法的研究

目的:研究三聚氰胺人工抗原的合成方法.方法:利用戊二醛法和EDC法分别合成了两种三聚氰胺-牛血清白蛋白(Mel-BSA1和Mel-BSA2).将Mel-BSA1和Mel-BSA2分别免疫两只新西兰大白兔,获得多克隆抗体.结果:红外光谱法鉴定结果表明,抗原合成成功.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定表明,偶联物Mel-...     

去甲氯胺酮单克隆抗体制备及鉴定

近年来,氯胺酮(ketamine,KET)在中国青少年中滥用呈快速上升趋势。目前,KET及其代谢物的分析检测主要依赖仪器联用技术,有关KET的免疫学检测方法也有报道〔2-3〕。KET代谢的半衰期为3～4h,摄入体内由细胞色素酶P450经N去甲基作用形成去甲基氯胺酮(norketamine,NKET)和去氢去甲基氯胺酮(dehydronorketamine,DHNK),这些代谢产物在生物检材中含量比较高,因此,建立KET代谢物(主要是NKET)的检测技术更为重要。     

ELISA法和HPLC法检测粮油食品中黄曲霉毒素B1含量的比较研究

〔目的〕研究和评价ELISA和HPLC两种方法检测粮油食品中黄曲霉毒素B1 之间的差异。〔方法〕用两种检测方法同时检测大量样品 ,并做加标回收试验。〔结果〕ELISA法和HPLC法相对误差平均值为 5 .2 5 %。在AFB1 浓度为0 .5～ 12 .5ppb时 ,ELISA法回收率为 3 5 .2 1%～ 15 5 .13 % ,HPLC回收率为 3 3 .74%～ 75 .70 %。〔结论〕ELISA法比HPLC法操作简便 ,快捷 ,回收率较理想     

尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papA基因的克隆和序列分析

目的比较尿道致病性大肠埃希菌UPEC4030株papA与相关序列的差异,明确是否为未知的基因型。方法采用PCR扩增、基因克隆与测序分析方法,分别对UPEC4030株papA进行基因与氨基酸序列分析,并与相关序列进行比较。结果UPEC4030papA由722个碱基对组成,编码192个氨基酸的多肽。与10个基因型UPECpapA核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较,结果分别为36.11%～77.95%和22.20%～78.34%;与papA基因分型多重PCR引物序列比较,下游分型引物在UPEC4030papA相应位置上的序列同源性只有10%～66.67%,推测该菌株papA为未知的基因型。结论UPEC4030papA为未知的基因型,相关致病机制和流行病学意义值得深入研究。     

微囊藻毒素-LR抗体的制备及自组装电化学免疫传感检测方法的应用

目的:制备微囊藻毒素-LR(简称MC-LR)多克隆抗体,并将其应用于电化学免疫传感器对MC-LR的测定。方法:通过对新西兰大白兔免疫自制免疫原MC-LR-KLH,制备多抗。将所得抗体应用于电化学免疫传感技术,基于L-半胱氨酸自组装技术和纳米金吸附作用相结合的方法固定MC-LR抗体,采用循环伏安法(CV)以及交流阻抗法(EIS)研究了该抗体在修饰电极上的电化学性质。结果:间接ELISA表明纯化后的抗体效价能达到6.4×104;固定包被抗原MC-LR-BSA,采用间接竞争ELISA测定标准曲线,定量检测区间为0.05～4μg/L,半数抑制率为0.68μg/L。将所制备抗体应用于电化学研究中,成功地建立了阻抗型免疫传感器检测MC-LR。该免疫传感器显示出响应速度快,15min内完成测定;灵敏度高,达到1.82×10-2μg/L;线性范围广(0.05～200μg/L)。结论:制备的MC-LR抗体具有效价高,特异性强,应用于电化学免疫传感检测方法的研究中,体现出良好的发展前景。     

微囊藻毒素-LR的生物素-亲和素-时间分辨荧光免疫分析法

目的运用生物素-亲和素信号放大系统,建立高灵敏的微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)检测方法。方法采用5μg/ml二抗Ig G包被板,样品中的MC-LR与生物素-MC-LR半抗原(1∶300)竞争限量抗MC-LR抗体(1∶1 000),用铕标记的链霉亲和素示踪,采用TRFIA法检测水样中的MC-LR含量。结果在0.1~5 ng/ml的线性范围内,得到MC-LR-TRFIA的回归方程为y=-29 132x+38 057,r=0.991 5。方法的灵敏度为0.02 ng/ml,平均回收率为80.2%~102.0%,批内和批间的RSD分别为4.3%~8.1%和9.9%~15.2%。该方法检测MC-LR与MC-YR和MC-LF的交叉率均小于10%。结论基于生物素-亲和素信号放大系统的MC-LR-TRFIA方法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于水中MC-LR浓度的检测。