干细胞样中心记忆性T细胞的研究进展

干细胞样中心记忆性T细胞(Stem Memory T cells,TSCM)属于T细胞的早期分化阶段,是一种具有干细胞自我更新能力和多种分化功能的T细胞亚群,对免疫记忆的维持具有重要作用,也是进一步提高嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)治疗临床疗效的重要细胞亚群。利用TSCM细胞构建的CAR-TSCM细胞,其抗肿瘤作用明显优于CAR-T细胞。但是,TSCM细胞较难获得,且在刺激扩增中易分化为T细胞其他终末亚群,限制了TSCM在肿瘤淋巴细胞治疗中的临床运用。本文重点回顾对TSCM的免疫学特性及近年来的研究进展。     

环黄芪醇联合IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增的影响

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8~+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,T_(SCM))比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定实验基础。方法采集健康产妇脐带血,通过密度梯度离心法分离获得脐带血单个核细胞(umbilical cord blood mononuclear cells,UCBMC),利用CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激活化后,采用不同浓度的CAG(0、0.04、0.2、1、5μmol/L)联合IL-7和IL-15连续培养,利用多色流式细胞术分别测定T细胞的增殖程度以及CD8~+T细胞中T_(SCM)比例的变化情况。结果 0.2μmol/L CAG与IL-7和IL-15细胞因子联用组促T细胞扩增作用显著高于其他浓度CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组或单独使用细胞因子IL-7和IL-15组。同时,0.2μmol/L CAG联用IL-7和IL-15组还可以促进CD8~+T中CD197~+CD45RA~+细胞表型的表达,即维持CD8~+T中高比例的T_(SCM)亚群。结论 0.2μmol/L CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高活化T细胞扩增能力,并能保持CD8~+T细胞中高比例的T_(SCM)亚群。     

甲状腺计数器多尺寸刻度模型研究

目的 为提高甲状腺计数器对大量公众放射性碘（如¹³¹I等）摄入量测量的准确性,开展了甲状腺计数器多尺寸刻度模型研究。方法 首先根据中国成年男性参考人体素模型、不同年龄段人群颈部尺寸和甲状腺质量等数据,建立了涵盖1～15岁儿童、青少年以及成年人的不同年龄段的多尺寸颈部（甲状腺）模型,该模型包含了人体颈部甲状腺、气管、食道、颈椎、骨髓等主要器官和组织;然后使用蒙特卡罗方法模拟了碘化钠型甲状腺计数器对不同类型、不同尺寸刻度模型的探测效率响应。结果 在测量距离为20 cm时,甲状腺计数器对本文建立的成年男性颈部模型TM、IAEA/ANSI颈部模型及中国成年男性参考人颈部体素模型CRAM-neck的探测效率相对偏离小于2%,而对不同尺寸颈部模型的探测效率相对偏离为1%～30%,且模型尺寸差异越大所引起的探测效率相对偏离越大。结论 在测量距离为20 cm时,本文建立的成年男性颈部模型TM可等效IAEA/ANSI颈部模型,而且刻度模型尺寸的差异对甲状腺计数器的探测效率影响较大。因此,建立各年龄段人群,尤其是儿童的颈部（甲状腺）刻度模型对提高测量的准确性有重要意义。     

N—硝基—L—精氨酸对海洛因依赖性大鼠催促戒断的治疗作用及对？…

目的：研究一氧化氮合酶抑制剂Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸对海洛因依赖性大鼠催促后出现的戒断综合征的治疗效果。方法：采用剂量递增法,皮下注射海洛因从１ｍｇ;ｋｇ＾－１增至８ｍｇ．ｋｇ＾－１,并维持该剂量４２ｄ,经纳洛酮催促后得到理想的大鼠海洛因依赖模型。在该模型的基础上选用３,９,１８,２７ｍｇ．ｋｇ＾－１４种Ｎ－硝基－Ｌ－精氨酸剂量给雄性大鼠灌胃。     

2020年版《中国药典》动物药应用特点分析

目的 统计和分析2020年版《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）动物药的功效及应用特点,以期为动物药的研究应用提供数据参考。方法 对2020年版《中国药典》收录的动物药进行筛选,统计单味动物药的药物分类、性味、归经、用法、用量、毒性或禁忌等信息并统计含动物药可外用中药制剂功效及临床应用分析、含动物药制剂的剂型、用药禁忌,并将上述信息录入Excel表格进行统计分析。结果 2020年版《中国药典》中明确记载动物药共51种。其中,动物药功效分类中以平肝息风药和补虚药居多;性味以平、咸为主,频数>10次的归经有肝经、肾经、心经、肺经。动物药多数入汤剂和丸散,入汤剂的动物药以先煎的方式为主;动物药用量以3~9、5~10、3~6 g常见,动物药外用适量。除了说明药物毒性,动物药的注意事项中最多的是孕妇慎用和孕妇禁用。《中国药典》可外用的含动物药中药制剂应用在儿科类、妇科类、骨伤科类、口腔科类、内科类、外科类、皮肤科类、眼科类、咽喉科类等多个科室,临床应用广泛;含动物药制剂的剂型以丸剂、胶囊剂、片剂、胶囊剂为主;动物药入药前以制成细粉的形式为主;制剂中的用药注意事项以孕妇和儿童用药禁忌为主。结论 2020年版《中国药典》收载的动物药临床应用广泛,疗效独特。但动物药还存有质量标准不完善、作用机制不明确等问题,需要进一步的研究,以更好地发挥动物药内服外用的优势。此外,动物的非药用部位也有开发利用价值,应加以充分挖掘开发利用,实现动物药资源的绿色发展。     

HSV-TK/CD20双自杀基因系统慢病毒载体的构建及应用

目的构建同时表达单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和RQR8膜蛋白双自杀可控开关的Jurkat细胞,使之可通过更昔洛韦药物(GCV)或利妥昔单抗(RTX)实现可控性细胞消除。方法 RQR8膜蛋白小分子含利妥昔单抗识别的模拟表位和抗CD34单抗表位。合成编码RQR8及HSV-TK的基因,构建慢病毒共表达载体pLV-RQR8-T2A-TK;脂质体Lipofectamine3000转染Jurkat细胞,流式荧光抗CD34单抗检测RQR8的表达,通过磁珠筛选获得RQR8~+TK~+Jurkat细胞;分别加入GCV或RTX检测自杀可控开关功能:CCK8法检测加药后细胞增殖情况,Annexin-V/PI检测细胞凋亡情况。结果慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK酶切片段大约1 670 bp,测序进一步证实外源片段插入正确。慢病毒感染Jurkat细胞,感染率为45.21%,磁珠纯化得到99.4%纯度的RQR8~+TK~+Jurkat。GCV对RQR8~+TK~+Jurkat具有细胞毒性作用,GCV浓度为40μmol/L时,其存活率为(52.11±7.04)%,IC_(50)为20.66μmol/L。80μmol/L GCV作用RQR8~+TK~+Jurkat细胞72 h后凋亡率达(41.28±2.78)%。在血清(含补体)存在情况下,320μg/ml RTX可通过补体介导的细胞杀伤作用杀伤RQR8~+TK~+Jurkat,其存活率为(29.64±4.52)%。结论双自杀可控开关慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK构建成功,加入GCV或RTX可通过2种不同路径成功杀伤细胞,达到细胞清除目的,提高了安全性,为临床治疗过继免疫不良反应提供多种选择。     

基于数据挖掘的角膜新生血管动物模型应用特点分析

目的 通过总结角膜新生血管（CNV）动物模型的造模特点,为建立理想的CNV动物模型提供参考依据。方法 该文以“角膜新生血管”为主题词在中国知网、万方数据、中华医学期刊全文数据库及PubMed数据库进行检索,筛选出2013—2023年中有关CNV动物实验的相关文献,通过Excel 2021表格建立数据库,对其实验动物品系、性别、造模方法、检测指标、应用类别等内容进行整理,分析CNV动物模型的模型特点。结果 经过对比分析发现造模时的动物品系以SD大鼠（87次、29.49%）,新西兰白兔（52次、17.63%）为主;动物性别推荐单一性别,目前以雄性为主;药效验证和机制研究的造模方法均以碱烧伤法居多;指标检测方式包括表观指标观察、组织病理学检测、免疫组化（IHC）、蛋白免疫印迹法（Western blot）及多种聚合酶链式反应（PCR）检测为主;检测指标包括表观指征、角膜组织病理、CNV调控相关指标等。结论 模型复制推荐碱烧伤法诱导的SD大鼠CNV模型,指标主要选择CNV的生长情况、角膜组织病理检测及血管内皮生长因子（VEGF）相关检测,依照需求增选角膜表观指征及血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、分泌粒蛋白Ⅲ（Scg3）等CNV调控相关基础指标。临床治疗CNV用药以抗炎药物与抗VEGF药物为主,缺乏中医药应用,模型的完善需要增加中医证候要素。     

鲜车前草的应用考证及现代临床应用

目的：探究鲜车前草临床应用规律,为鲜车前草的现代应用提供文献支持及发展思路。方法：以第5版《中华医典》为古籍数据库,以中国知网、维普、万方、中华医学期刊全文数据库为现代数据库,摘录包含鲜车前草应用的内容,并进行归纳整理分析。结果：古籍中车前草鲜用的频率很高,功效以清热、凉血、利尿、通淋为主,可用于治疗淋证、小便不通、小便溺血等内科病及疮痈、白虎丹等外科病,治疗面口五官热证如鼻衄、目赤肿痛、乳蛾喉痹等病的疗效极佳,在妇科及儿科疾病中也有广泛的应用。现代文献记载鲜车前草主治范围包括肾系、五官、脾胃、肺系、肝胆、皮肤外科及妇科儿科疾病,主要用于肾系湿热证及由于湿热毒蕴引起的皮肤外科诸证,功效以清热解毒,利尿通淋为主。民间从古至今都有采食鲜车前用于充饥或保健的报道。结论：鲜车前草临床应用广泛,具有极高的医用价值与经济价值,但是现代应用发展滞后,需要集策集力从“药材生产-储存运输-制剂研发-临床应用”各个环节入手推动鲜车前草应用发展。