流式细胞分析对以噬血细胞综合征为首发症状的非霍奇金淋巴瘤的诊断价值分析

目的应用流式细胞术(FCM)对骨髓淋巴瘤细胞特征性免疫表型进行分析,评估FCM对初诊以噬血细胞综合征(HLH)为首发临床表现的非霍奇金淋巴瘤的快速鉴别诊断价值。方法回顾性分析2010年7月至2019年7月在北京大学深圳医院血液科收治的57例已经明确病因诊断的HLH患者的临床资料,并且所有患者在起病时至少完成1次骨髓流式细胞检测和骨髓病理检查,以同期患者的临床、生化及组织病理为金标准,评估FCM分析骨髓淋巴瘤细胞的免疫表型特征对淋巴瘤相关的噬血细胞综合征(LAHS)的诊断效能。结果 57例符合HLH诊断标准的患者,36例患者经临床、生化和组织病理最终明确诊断为LAHS,其中B细胞淋巴瘤15例(弥漫大B细胞淋巴瘤14例,B细胞淋巴瘤伴反应性T细胞增生1例);侵袭性NK细胞淋巴瘤/白血病13例;肝脾γδT细胞淋巴瘤2例;血管免疫母T细胞淋巴瘤(AILT)4例;肠病性外周T细胞淋巴瘤(ENTCL)1例;间变性T细胞淋巴瘤(小细胞型)(ATCL)1例。除1例ENTCL外,FCM均在上述病例骨髓中发现有特征性免疫表型的淋巴瘤细胞,与骨髓疾病比较,FCM对本组LAHS病例诊断的敏感度为97.2%(P...     

Stealth siRNA对HBV复制和表达的抑制

目的设计siRNA并检测其对HBV的抑制作用。方法针对HBV基因组设计siRNA基因序列,化学修饰合成3种Stealth siRNA,转染带有HBV的2．2．15细胞,ELISA法检测其对HBV复制和表达的影响。结果3种Stealth siRNA对HBV的复制和表达在不同时间有不同程度的抑制作用。72h后就可检测出抑制,其中siRNA508效果最显著。结论合成的Stealth siRNA可以抑制HBV的复制和表达,有望成为控制HBV感染的一种手段。     

引起HBVe系统双阳模式的另一种机制

目的:探讨HBV e系统双阳模式产生的一般性原因。方法:常规乙肝标志物免疫学检测筛选出61份e系统双阳模式血清样本,对每一份样本进行HBeAg RIA定量、前S1抗原检测以及HBV DNA荧光定量。结果:61份双阳模式血清的HBeAg RIA定量在1.5×105~2.1×105ng/ml区间内;前S1抗原检测54份阳性,阳性率88.5%;HBV DNA荧光定量全部阳性,平均拷贝数在107以上。结论:e系统双阳模式中的HBeAb为假阳性,双阳模式实为病毒高载量的表现,而不是血清转换。     

OPSpecs图评价免疫项目的室内质控

目的运用OPSpecs图设计保证临床质量要求的室内质控规则。方法结合IgG项目的精密度、准确度和测定方法的总允许误差,选择不同的适用质控规则,绘制OPSpecs图,评价质控效能。结果根据OPSpecs图可简单、直接地设计出经济、适用盼质控规则。结论用OPSpecs图设计质控规则简便、快捷、实用,但要全面运用到临床免疫项目中,仍需一定的时间。     

非典型肺炎血清SARS冠状病毒抗体的检测及其意义

【目的】探讨非典型肺炎患者血清SARS冠状病毒抗体IgM、IgG检测意义。【方法】应用ELISA法对16例SARS患者、147例发热隔离患者、23例体格检查健康者进行血清SARS抗体IgM、IgG检测。【结果】12例SARS患者入院时8例检出SARS抗体IgM阳性,出院时9例检出SARS抗体IgG阳性;其中7例SARS患者康复出院半年后复查均检测出高滴度SARS抗体IgG,同时有2例仍检出SARS抗体IgM。2例重症患者血清动态结果观察到,从入院到出院的标本均同时检测到高滴度的SARS IgM、IgG;2例轻症SARS患者各只检测到一次SARS抗体IgM弱阳性;发热隔离区患者有6例从入院至出院均检测到SARS抗体IgG,其中两例滴度较高。健康体检者无一例SARS抗体阳性。【结论】ELISA检测SARS冠状病毒抗体IgM、IgG可作为一种辅助鉴定非典型肺炎患者的临床检测和确诊手段。     

瑞芬太尼和异丙酚对健康成人静脉血中性粒细胞CD11b表达的影响

目的探讨瑞芬太尼和异丙酚对健康成人静脉血中性粒细胞（PMNs）CD11b表达的影响。方法取成人静脉血，采用正交实验设计确立实验因素为瑞芬太尼和异丙酚；实验水平数为5水平，即瑞芬太尼空白对照、溶媒（甘氨酸）对照、5ng／ml、50ng／ml、500ng／ml和异丙酚空白对照、溶媒（脂肪乳）对照、5μg／ml、50μg／ml、500／μg／ml，用正交表L25（5^6），观察药物对静息状态和脂多糖（LPS）激活状态PMNs下CD11b表达的影响，对激活状态的PMNs根据用药时机的不同又分为预防性用药和治疗性用药。预防性用药加入药物后1h用终浓度为1μg／ml的LPS进行刺激；治疗性用药在LPS刺激后1h加药。各标本均放入37℃、95％的空气-5％的CO2培养箱中孵育3h，其间每隔1h混匀1次。用流式细胞仪测定PMNs CD11b表达。结果瑞芬太尼和异丙酚对静息状态PMNs CD11b的表达无影响。预防性用药对PMNs CD11b表达的比较：与空白对照比较，5、50、500ng／ml瑞芬太尼可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．05或0．01）；与甘氨酸对照比较，50、500ng／ml瑞芬太尼可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．05和0．01）；异丙酚对激活状态PMNs CD11b表达无影响。治疗性用药对PMNs CD11b表达的比较：与空白对照和甘氨酸对照比较，500ng／ml瑞芬太尼可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．01）；与空白对照比较，50ng／ml异丙酚可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．05）。结论瑞芬太尼和异丙酚对PMNs的CD11b表达的影响可能与PMNs所处的状态、用药剂量以及用药时机有关。     

shRNA表达载体的构建及对HBV复制和表达的抑制

目的:构建shRNA的表达载体,检测针对乙型肝炎病毒(HBV)的shRNA的稳定表达质粒对HBV复制和表达的影响。方法:扩增U6启动子构建shRNA表达载体pU6。针对HBV基因组序列设计并化学合成双链核苷酸克隆到pU6载体得到质粒pU6B/HBVi,脂质体介导转染带有HBV基因组的2.2.15细胞,定量PCR和ELISA法检测pU6B/HBVi对HBV复制和表达的影响。结果:成功构建了shRNA的真核表达载体;针对HBV的pU6B/HBVi质粒对HBV的复制和表达有明显的抑制作用。结论:稳定表达shRNA的pU6B/HBVi质粒可以抑制HBV在2.2.15细胞中的复制和表达。     

乙肝病毒抗原在离体全血中衰减引起假阴性

目的 探讨离体全血中的细胞成分对乙肝抗原HBsAg和HBeAg的免疫学检测影响.方法 收集80人份HBV携带者血样.每人血样分为3份,一份在离体后迅速离心祛除细胞成分,另一份在离体后3 h离心祛除细胞成分,还有一份在离体后12 h离心祛除细胞成分.分别以夹心ELISA试验及RIA试验定性、定量检测3份血样中的HBsAg和HBeAg水平,井进行成对资料的t检验分析.结果 HBsAg和HBeAg在较高浓度时,同一来源的36份血样中抗原含量无明显差异;而HBsAg和HBeAg处于较低浓度时,3份血样中抗原含量差异明显,细胞成分祛除较晚的血样中抗原水平明显较低.结论 作为外源性病原体抗原,HBsAg和HBeAg因抗原代谢作用而在离体全血中持续衰减,这种衰减可能导致一些乙肝携带者的假阴性检测.