AG3340抑制大鼠C6胶质瘤细胞增殖的初步研究

目的 寻找一种既能抑制胶质瘤新生血管的形成,又能杀灭胶质瘤细胞的细胞因子,为临床肿瘤药物的筛选提供理论依据.方法 培养传代大鼠C6胶质瘤细胞株以每孔1×10~4个细胞铺96孔培养板,分组加入AG3340[金属蛋白酶(MMPs)非肽类抑制剂,终浓度分别为O ng/ml、50 ng/ml、100ng/ml、150ng/ml],培养48 h后,弃去培养液,每孔加入DMSO(二甲亚砜)150μl,振荡后用酶标仪570nm 测定吸光度值(A值).结果 (1)随着加入AG3340浓度增加,部分大鼠C6胶质瘤细胞便会出现变圆、离壁、浮起直至死亡的现象.(2)对照组OD(取相同倍数视野中心)值:0.1645±0.015;低浓度组OD值:0.1443±0.011;中浓度组OD值:0.1358±0.011;高浓度组OD值:0.1213±0.014.总体及各实验组间比较,均有统计学意义(总体F=46.67,P<0.01;各组间P<0.05).结论 AG3340对大鼠C6胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用,且与浓度呈一定相关性,随着浓度的增加其抑制作用逐渐增强.     

颈淋巴阻断加重SAH脑脊液对PC12细胞的损伤

目的探讨脑淋巴引流途径在蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元损伤中的作用。方法建立兔SAH及脑淋巴引流阻滞(CLB)模型,于SAH模型建立后5d抽取脑脊液加入培养的PC12细胞中,随机将PC12细胞分为空白对照组、正常对照组(正常脑脊液)、SAH脑脊液组,SAH+CLB脑脊液组,分别于培养0.5、1、2、4h后,用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,采用免疫荧光染色法激光共聚焦显微镜观察PC12细胞细胞骨架。结果与正常对照组比较,SAH脑脊液组PC12细胞LDH释放率增加;SAH+CLB脑脊液组LDH释放率明显高于SAH脑脊液组。正常脑脊液不引起PC12细胞细胞骨架改变,SAH脑脊液组及SAH+CLB脑脊液组PC12细胞胞质着色较弱,突起变短甚至回缩,胞核呈现凋亡特征,上述表现以SAH+CLB组更为明显。结论脑淋巴引流阻滞加重SAH脑脊液对PC12细胞的损伤,提示通过改善脑淋巴引流途径可减轻SAH继发性脑损伤。     

计算机三维塑形在钛网个体化修补颅骨缺损中的应用

目的探讨采用计算机三维塑形技术进行个体化颅骨缺损修补的临床应用价值。方法选择68例颅骨缺损病人,术前利用CT进行头颅扫描取得颅骨缺损部位二维数据,根据二维数据利用计算机三维塑形重建制作个体化钛网。术中将钛网根据解剖结构固定于缺损部位。结果68例患者中,全部患者切口一期愈合,2例出现皮下积液(经皮下穿刺抽液后消失),所有病例修补后头颅对称,外形良好基本恢复了原始状态。结论应用计算机三维塑形钛网修补颅骨缺损值得推广。     

银杏叶提取物促进大鼠蛛网膜下腔出血后血红素氧合酶-1表达

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法实验采用健康Wistar大鼠,将动物随机分入非SAH组、SAH组、溶媒组、EGb1组(低剂量)、EGb2组(高剂量),EGb腹腔注射给予。非SAH组于枕大池注入0.3ml生理盐水;其余各组于枕大池注入自体动脉血溶血物0.3ml诱导SAH。将动物处死后取脑,用RT-PCR方法检测术后24h、72h皮层HO-1 mRNA,用免疫组化法检测术后72h海马HO-1蛋白的表达。结果在非SAH组大脑皮层未见HO-1 mR-NA表达;SAH组大鼠在诱导SAH后24h,大脑皮层HO-1 mRNA表达增加,72h进一步增加;在EGb1组和EGb2组,大脑皮层HO-1 mRNA表达更加明显,其中EGb2组的表达强度又高于EGb1组。非SAH组未见海马HO-1蛋白表达;SAH组在诱导SAH后72h海马可见HO-1蛋白明显表达;EGb1组和EGb2组海马HO-1阳性细胞和表达强度增加,以EGb2组更加明显。结论EGb对SAH后脑组织HO-1表达具有促进作用。     

高血压脑出血早期血肿扩大的相关因素分析

目的探讨高血压脑出血早期血肿扩大的发生率、发生时间、相关因素及其预后，以提高该病的诊疗水平，减少死亡率。方法回顾性分析2003.7-2006.7诊治的126例脑出血病人临床和CT资料。结果血肿扩大主要与血压增高的程度、凝血功能、出血部位及血肿形态有关，血肿扩大增加了病人的死亡率。结论对有血肿扩大可能的高血压脑出血病人，要严密观察病情变化，及时复查CT，尽早采取救治措施。     

不同钻孔部位治疗慢性硬膜下血肿比较性研究

目的比较不同钻孔部位对慢性硬膜下血肿的疗效。方法对72例慢性硬膜下血肿随机分成两组,一组在血肿的额极侧钻孔,另一组在血肿的最厚部位钻孔。术后比较两组的颅内积气和颅内血肿的发生率。结果额极侧钻孔组的颅内积气、颅内血肿、蛛网膜损伤的发生率比最厚部位钻孔组低。结论在血肿的额极侧钻孔治疗慢性硬膜下血肿并发症少。     

大鼠脑胶质瘤模型构建

目的 探索建立切实可行的SD大鼠脑胶质瘤模型的方法。方法 实验于2005—03／05在泰山医学院基础研究所及天津神经外科研究所动物实验室完成。选择成年SD雄性大鼠20只，应用立体定向技术，于大鼠头部正中矢状线旁3mm，前囟前1mm处，利用微量注射器将100万个C6细胞（10μL）注入硬脑膜下5mm处。注射时间为5min，留针3min。术后1，2周对存活的大鼠行MRI检查。对术后2周检查肿瘤阳性的大鼠取脑组织做病理切片，对瘤组织进行苏木精-伊红染色观察。结果 17只大鼠进入结果分析。①17只大鼠2次MRI检查见肿瘤所在部位一致，但第二次检查时肿瘤体积更大。双侧长有肿瘤的大鼠有15只，单侧长有肿瘤的2只，总的肿瘤阳性率为100％。②经病理检查证实17只大鼠脑内肿瘤均为胶质瘤。结论 大鼠硬脑膜下注入100万个C6细胞能成功建立脑胶质瘤模型，成功率100％。     

内抑制素和血小板因子-4对淋巴管内皮细胞生成的影响

目的寻找安全有效的淋巴管生成抑制剂。方法取猪的胸导管内皮细胞进行培养，进行光镜和电镜观察。设立对照组、内抑制素实验组和血小板因子-4（PF-4）实验组。应用刮线法和MTT法来判定这两种抑制因子对细胞有无抑制作用。结果应用刮线法对Endostatin、PF-4对照组与实验各组的细胞数及细胞游走距离进行比较，均P〈0．05。采用MTT法将内抑制素、PF-4对照组与实验各组吸光光度值相比较，均P〈0．05。结论内抑制素和PF-4对淋巴管内皮细胞的增殖和游走有明显的抑制作用，且有剂量依赖性。     

内抑制素对人脑胶质瘤细胞增殖的实验研究

目的观察内抑制素对人脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法①细胞培养：体外培养人脑胶质瘤细胞并进行光镜观察；②抑制因子试验：设立对照组与内抑制素实验组，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法来判定该抑制因子对人脑胶质瘤细胞有无抑制作用；③细胞内游离Ca2＋浓度测定：将特异性ca2＋荧光指示剂-Fluo-3用来负载人脑胶质瘤细胞，应用激光共聚焦显微镜检测细胞内游离钙的浓度。结果对照组光密度（OD）值明显高于各实验组（P〈0．05）；内抑制素能明显增加细胞内游离Ca2＋的浓度，并且随药物浓度的增加而增加。结论内抑制素能够抑制人脑胶质瘤细胞的增殖且呈剂量依赖性，同时也能够增加胶质瘤细胞内游离ca2＋的浓度。     

经鼻给予降钙素基因相关肽促进蛛网膜下腔出血后大脑皮层CD31/PECAM-1表达

目的探讨经鼻应用降钙素基因相关肽(CGRP)对蛛网膜下腔出血(SAH)后大脑皮层血小板内皮细胞粘附分子-1(CD31/PECAM-1)表达的影响。方法将SPF级雄性Wistar大鼠随机分入正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池两次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。于第二次枕大池注血后3d,将大鼠经心灌注生理盐水后取脑制作冰冻切片,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层CD31/PECAM-1表达。结果行为学和解剖学观察证实大鼠SAH模型制作成功。第二次枕大池注血后3d,SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层CD31/PECAM-1表达增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层CD31/PECAM-1表达进一步增强。结论经鼻应用CGRP可促进SAH后大脑皮层CD31/PECAM-1表达,从而在一定程度上促进血管新生,减轻继发性脑缺血。