食管癌Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达研究

目的：探讨食管癌组织中Ⅰ行溶酶原激活物抑制剂（ＰＡⅠ－１）的表达特征。方法：采用定量的逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测基因的表达。结果：食管癌组织中ＰＡⅠ－１的ｍＲＮＡ的表达水平显著高于正常粘膜组织（Ｐ〈０．０１）,组织原位杂交显示ＰＡⅠ－１的ｍＲＮＡ主要分布于肿瘤细胞的胞浆中。结论：ＲＡⅠ－１的ｍＲＮＡ在食管癌中的表达上调,ＲＴ－ＰＣＲ的定量分析可用于肿瘤诊断的辅助方法。     

YRRM基因表达的组织特异性

人类的精子发育是一复杂而漫长过程，从原始的精原细胞发育为成熟的精子至少经过３次有丝分裂和２次减数分裂，整个过程约持续６５天。对于直接导致不育的无精子症，多年来一些学者从分子遗传学判断其必有分子基础，即某个或某几个特异控制精子发育的基因发生了结构异常或...     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂RNA探针的构建及应用

组织型纤溶酶原激活物（ｔＰＡ）和尿激酶型纤溶酶原激活物（μＰＡ）可使纤溶酶原转变为纤溶酶,参与纤溶、炎症、细胞迁移、排卵、肿瘤浸润和转移等许多生理和病理过程。Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）是这两者主要的快速作用的抑制剂,它能抑制ＰＡ介导的纤溶活性,认为是体内最重要的纤溶活性调节者,因而肿瘤组织中ＰＡＩ河的表达特性备受关注［１、２］。已检测过胃癌、结肠癌、乳腺癌、子宫癌等多种肿瘤组织中的ＰＡＩ－１河的表达特性,在乳腺癌患者中已作为诊断与预后的指标［３、４］。以往研究多采用免疫组化或ＤＮＡ探…     

间接SPA菌体吸附法快速检测单纯疱疹病毒

本文联合运用玻片细胞培养板分离病毒和间接SPA菌体吸附法检测感染细胞表面HSV抗原,鉴定分离的病毒。本法快速、简便,可于细胞病变出现前检出感染细胞表面HSV抗原,获很病原诊断。其敏感性与间接免疫荧光法一致。     

应用PCR－SSCP银染法检测结肠癌组织中p53基因突变

应用ＰＣＲ－单链构象多态分析（ＳＳＣＰ）银染技术分析了２１例结肠癌和正常结肠粘膜组织ｐ５３基因第五～第八外显子。发现了９例（４３％）的结肠癌组织出现了反映ｐ５３基因突变的异常条带。结果显示ｐ５３基因的突变与结肠癌的发生和发展有关。应用非同位素的银染方法，能简单、快速检测基因多态性，并避免同位素的危害，对结肠癌的基因诊断有潜在性应用价值     

三氧化二砷对人肺巨细胞癌细胞系（PLA—801D株）运动能力、尿激酶的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3)对人肺巨细胞癌细胞系PLA－801D株细胞运动能力和尿激酶（uPA）、尿激素受体（uPAR)mRAN表达的影响。方法 采用0．5μmol/L、1．0μmol／L及2．0μmol／L三种浓度的As2O3处理人肺巨细胞癌细胞（PLA－801D株）,120h后收取细胞,分别采取Boyden小室测定细胞穿膜运动能力及ERT－PCR方法检测细胞uPA及uPARmRNA转录表达水平。结果 经As2O3处理的PLA－801D株细胞,穿膜运动能力和uPA及uPARmRNA转录表达水平均显著下降,As2O3作用呈剂量依赖方式。结论 As2O3可抑制肿瘤细胞的运动能力;可下调uPA、uPAR表达,可能影响肿瘤细胞基质降解过程。     

应用原位免疫聚合酶链反应检测活动性巨细胞病毒感染

目的建立一种新的诊断活动性巨细胞病毒感染的方法。方法应用原位免疫聚合酶链反应(PCR)技术检测早、中、晚期孕妇宫颈脱落细胞中巨细胞病毒抗原。结果119例受检标本中有16例出现人巨细胞病毒(HCMV)抗原阳性,孕早、中、晚期孕妇活动性HCMV感染率分别为：9.37%、11.90%、17.77%;检出的HCMV抗原阳性细胞数为2～38／5万宫颈脱落细胞,平均8.5／5万细胞。常规ABC法平行检测,原位免疫PCR法检测敏感性高于ABC法。结论原位免疫PCR方法敏感性高、特异性强,可检出微量HCMV抗原,为临床诊断活动性HCMV感染提供一种新方法。     

限制性内切酶图谱分析分型单纯疱疹病毒的简便快速方法

单纯疱疹病毒(HSV)是人类的重要致病性病毒,分为HSV—Ⅰ和HSV—Ⅱ两个血清型。HSV型别的鉴定对HSV感染的临床诊断和流行病学调查具有十分重要的意义。利用HSV DNA限制性内切酶圈谱分型HSV是近年来发展的一种分子生物学鉴定方法。本文对文献报道的内切酶图谱鉴定HSV型别的方法进行了改进,现报告如下。     

应用间接SPA菌体吸附法快速检测单纯疱疹病毒

迄今,病毒分离仍是单纯疱疹病毒(HSV)最敏感而可靠的检测方法,但其常规操作繁琐、费时,故有必要寻求一快速、简便的方法。本研究应用玻片微量细胞培养板(简称玻片板)培养病毒,继用间接SPA菌体吸附法检测感染细胞HSV抗原,此法鉴定病毒快速而简便。玻片板由载玻片上粘附8孔塑料培养室构成。培养病毒后,取下培养室,玻片则成为病毒感染细胞抗原片,经1%戊二醛室温下固定15分钟,顺次滴加兔抗HSV免疫血清及1%SPA菌体,用0.01%结晶紫染色,即可在普通光学显微镜下观察结果。镜下HSV感染细胞被密集的紫红色SPA菌体呈串珠样环状包绕,而未被感染的细胞仅有少量散在SPA菌体吸附,无环状包绕。实验研究表明,用HSV-1 10~3TCL-D_(50)感染细胞后24小时可见细胞病变(C-PE),而本法及平行检测的间接免疫荧