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人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切入位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×103左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。 相似文献
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耐热可溶性戊型肝炎病毒基因工程抗原的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 利用硫氧还蛋白融合表达系统表达戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)结构基因片段,获得耐热,可溶、具有生物活性的HEV基因工程抗原。方法 将HEVORF26964-7126nt基因片段插入硫氧还蛋白融合表达载体pThioHisA,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导,表达融合蛋白。裂解细菌后,离心,取上清置于80℃处理10min,再次离心,取上清用ELISA方法测定表达产物的生物活性。结果 SDS-PAGE分析表明,HEV结构基因获得高效表达,相对分子质量约为20000,耐热,水溶性好,ELISA证实具有HEV特异抗原性。结论 应用硫氧还蛋白融合表达系统成功表达了耐热,可溶,具有生物活性的HEV基因工程抗原。 相似文献
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我国部分地区人群中水痘-带状疱疹病毒流行率 总被引:5,自引:2,他引:5
本文首次报导我国部分城市居民中水痘-带状疱疹病毒(Varicela-zostervirus,VZV)血清学流行率。标本来自上海、北京、大连、广州和成都市1~45岁人群,共收集血清3076人份。用ELISA方法检测。结果显示,我国部分人群中VZV抗体阳性率平均为6876%,年龄别流行率在1~3岁、4~6岁、7~13岁和36~45岁组,分别为1596%、4990%、6994%和9312%。此结果将为我国VZV疫苗免疫中免疫对象的选择提供科学依据 相似文献
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目的探讨庚型肝炎病毒(HGV)感染的临床意义。方法应用逆转录-套式聚合酶链反应(RT-nPCR)检测165例肝炎患者血清HGVRNA和血清酶的变化。其中急性肝炎24例,慢性肝炎78例,肝硬化18例,肝癌4例,乙、丙肝携带者41例。结果在急性黄疸型肝炎中检出单纯性HGV感染3例(125%),血清ALT水平在488±65U/L之间,AST在452±71U/L之间,TBiL在771±143μmol/L。急性肝炎酶的升高一般在1个月内降到正常,而HGVRNA在ALT降到正常后仍持续一段时间才转阴,其中1例发病后9个月转阴。慢性肝炎中检出HGVRNA阳性19例(244%),其中单纯性HGV阳性4例(513%)。肝硬化肝癌中HGVRNA阳性4例,其中1例肝硬化为单纯性HGV阳性。结论在急性黄疸型肝炎、乙型肝炎病毒携带者、慢性肝炎、肝硬化以及肝癌中均可检出庚型肝炎病毒,为单独感染或与乙、丙型肝炎病毒同时或重叠感染,其传播途径与乙、丙型肝炎的传播途径相同。 相似文献
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一种逆转录-聚合酶链反应产物的快速分子克隆方法及其在丁型肝炎病毒基因组克隆中的应用刘善虑,詹美云(中国预防医学科学院病毒学研究所,北京100052)聚合酶链反应(PCR)作为一种高效的DNA扩增技术在当今分子生物学研究领域已得到广泛的应用;尤其是在逆... 相似文献
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中国4株丁型肝炎病毒抗原编码区基因的cDNA克隆与序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从我国四川、广西、河南的丁型肝炎病毒抗原(HDAg)或抗体(anti-HD)阳性的HBsAg携带者中,筛选出4株HDVRNA阳性标本,经逆转录和聚合酶反应(RT-PCR)后,获得包含HDV抗原编码区的CDNA片段,并对其进行克隆与序列测定。经计算机分析比较表明:四川、广西株与美国-1株同源性最高,分别为99.3%、99.0%;而河南-1、河南-2株与台湾株的同源性较高。分别为94.3%、92.1%,上述4株与日本-1、秘鲁-1的同源性在66.1%-77.8%之间。推导的HDAg的氨基酸序列的同源性为:四川、广西株与美国株分别为99.5%、96.4%;河南-1、河南-2株与台湾株分别为89.7%、89.3%,故我国至少存在基因型I型的两种亚型,其中四川、广西株为IA型;河南2株皆为IB型。同时,实验结果还证实了HDV毒株的异质性呈地区分布特征。 相似文献
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