生物化学检验综合实训的设计与实施

正《生物化学检验》是高职高专医学检验技术专业的核心课程~([1]),实验教学是理论教学与临床实践有机结合的重要环节,是培养学生综合素质和创新能力的重要手段~([2])。随着现代检验医学的发展,实验教学不仅要提高学生的动手操作能力,更主要的是应培养学生的理论知识的应用能力以及对检验结果的综合分析能力。综合实训是学生创新能力的提升以及"工学结合"的真实反映~([3])。为此,近年来,本校紧紧围绕现代检验医学人才培养目标,开设生物化学检验综合实     

不同分期胃腺癌及癌旁组织蛋白质表达谱的研究

目的 建立II、IV期胃腺癌及癌旁胃组织的蛋白质表达谱并分析其表达的差异。方法 从胃腺癌II期和IV期患者各3例提取胃癌组织（CaII和CaIV）及胃旁组织（PII和PIV）中总蛋白,采用双向凝胶电泳获得CaII、CaIV、PII、PIV胃组织蛋白质表达谱,通过基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱（MALDI-TOF/TOF）对主要差异蛋白进行分析。结果PII与CaII之间蛋白质表达有显著差异（达2.0倍以上）的蛋白点有28个,CaII3个蛋白点表达上调,25个蛋白点表达下调;PIV与CaIV之间蛋白质表达有显著差异（达2.0倍以上）的蛋白点有25个,CaIV这些蛋白点表达均下调。使用MALDI－TOF/TOF质谱成功鉴定到8个蛋白点在CaII和CaIV中的表达与PII、PIV均有显著差异,分别是谷胱甘肽巯基转移酶、内质网蛋白ERP29、SH3P、蛋白质膜联蛋白A4、肝脏型脂肪酸结合蛋白、磷酸丙糖异构酶、Transgelin和磷脂酰乙醇结合蛋白,这些蛋白大多与细胞增殖、细胞凋亡及信号转导相关。结论不同分期胃癌与其癌旁组织之间存在蛋白质表达差异,有助于从分子水平了解胃癌的发病机制,探索新的胃癌相关标志物和基因治疗靶点。     

CBL教学法在临床生物化学检验教学中的应用

围绕临床病例,在临床生物化学检验课程中引入CBL教学法,着力培养医学检验技术专业学生在临床思维、问题探究及知识系统性掌握运用等方面的综合能力,同时激发学生对临床生物化学检验课程的兴趣,取得了较好的教学效果。     

快速检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药相关基因mPCR-SSCP建立及应用

目的 建立快速检测结核分枝杆菌异烟肼(INH)和利福平(RFP)耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变的多重聚合酶链反应-单链构象多态性(multi PCR-single strand conformational polymorphism analysis,mPCR-SSCP)方法.方法 药敏试验检测134株结核分枝杆菌临床菌株对INH和RFP的耐药性.设计结核分枝杆菌INH和RFP耐药相关katG、inhA和rpoB基因PCR引物,建立mPCR-SSCP技术检测上述菌株katG、inhA和rpoB基因的突变,同时采用PCR直接测序技术(PCR-DS)检测上述基因片段突变情况,并对上述3种方法检测结果进行分析和比较.结果 134株临床菌株均含有katG、inhA和rpoB基因,其中42株(31.3％)对INH耐药、45株(33.6％)对RFP耐药.mPCR-SSCP和PCR-DS检测结果显示,92株INH敏感菌株katG和inhA基因均未发生突变,检测特异性均为100％;89株RFP敏感菌株中rpoB基因分别有2株和1株检测出突变,检测特异性分别为97.8％和98.9％;42株INH耐药菌株中分别有33株和36株katG和/或inhA基因突变,检测灵敏度分别为78.6％和85.7％;45株RFP耐药菌株中rpoB基因分别有41株和43株发生突变,检测灵敏度分别为91.1％和95.6％.结论 本研究建立的mPCR-SSCP能快速、简便、特异,并有一定的敏感性检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药相关基因katG、inhA和rpoB突变,具有临床应用前景.     

不同5′-硝基咪唑类药物治疗厌氧菌性及滴虫性阴道炎临床疗效比较

目的观察甲硝唑、替硝唑和奥硝唑治疗厌氧菌性和滴虫性阴道炎的临床疗效和不良反应,了解所分离的厌氧菌和阴道毛滴虫对上述药物的敏感性。方法根据细菌学和寄生虫学实验室检查结果,将290例厌氧菌性和62例滴虫性阴道炎患者各随机分为3组,分别给予甲硝唑、替硝唑和奥硝唑治疗。采用二倍试管平皿稀释法测定厌氧菌分离株对不同药物的最低抑菌浓度(MIC),采用二倍试管稀释法测定阴道毛滴虫分离株对不同药物的最低杀虫浓度(MPC)。结果厌氧菌性阴道炎组中,甲硝唑亚组的有效率为54．6%,明显低于替硝唑亚组的68．8%(P＜0．05)和奥硝唑亚组的74．2%(P＜0．01),后两组的差异无显著性(P＞0．05)。滴虫性阴道炎组中,甲硝唑、替硝唑和奥硝唑亚组的有效率分别为90．5%、100．0%和100．0%,3个亚组间的差异均无显著性(P＞0．05)。甲硝唑不良反应总发生率明显高于替硝唑(P＜0．01)和奥硝唑(P＜0．01),但后两组间不良反应率的差异无显著性(P＞0．05)。甲硝唑、替硝唑和奥硝唑对266株革兰阴性厌氧菌MIC_(90)范围分别为4～8、1～2和1～2μg/mL,甲硝唑、替硝唑和奥硝唑对261株革兰阳性厌氧菌MIC_(90)范围分别为32～64、8～32和8～16μg/mL。甲硝唑、替硝唑和奥硝唑杀灭阴道毛滴虫的MPC分别为25、5和5μg/mL。结论与甲硝唑比较,替硝唑和奥硝唑治疗厌氧菌性阴道炎的疗效高、不良反应少,但甲硝唑的价格低廉。临床厌氧菌株对甲硝唑有较高的耐药率。3种药物抗革兰阴性厌氧菌的作用均明显高于革兰阳性厌氧菌,但革兰阳性厌氧菌对奥硝唑仍有较高的敏感性。     

胸腹水中癌胚抗原和LDH及Glu水平的临床鉴别诊断价值

目的探讨癌胚抗原(CEA)和乳酸脱氢酶(LDH)及葡萄糖(Glu)水平在良恶性胸腹水中的临床鉴别诊断意义。方法分别采用化学发光标记免疫法、速率法和葡萄糖氧化酶法检测105例患者不同性质胸腹水中CEA和LDH及Glu的浓度,检测结果采用方差分析和Dunett’C法进行统计分析。结果恶性肿瘤组患者胸腹水标本中CEA值较结核性胸膜炎组和慢性非特异性炎症组明显升高(P<0.05);恶性肿瘤组和结核性胸膜炎组标本LDH值之间差异无显著性(P>0.05),但均高于慢性非特异性炎症组(P<0.05);恶性肿瘤组和慢性非特异性炎症组标本Glu值差异无显著性(P>0.05),但均高于结核性胸膜炎组(P<0.05)。结论联合定量检测CEA和LDH及Glu对胸腹水性质的鉴别诊断有重要临床参考价值。     

瑞芝清对人胰腺癌细胞COX-2和VEGF影响

目的观察瑞芝清对人胰腺癌PANC-1细胞环氧合酶-2（COX-2）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，探讨瑞芝清抑制肿瘤血管生成机制。方法对人胰腺癌PANC-1细胞进行培养，不同浓度瑞芝清处理细胞后。用免疫组织化学染色检测COX-2和VEGF蛋白表达的变化。逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测COX-2mRNA和VEGFmRNA表达的变化。结果100，200，400μmol／L瑞芝清作用胰腺癌PANC-1细胞48h后，COX-2和VEGF蛋白表达率与对照组比较明显降低（P〈0．05），并且COX-2与VEGF之间具有良好的相关性（r=0．785，P〈0．05）；RT—PCR结果也显示，随着药物浓度的增大，COX-2mRNA和VEGFmRNA表达逐渐减弱。结论抑制COX-2表达及由此引起的VEGF表达降低，在非甾体类抗炎药抑制肿瘤血管生成机制中可能具有一定作用。     

杭州市健康人群粪便中检出O1和O139群霍乱弧菌无毒力株

目的　对杭州市饮食、服务行业人员粪便标本进行霍乱弧菌监测。方法　 2 0 0 0年 5月～ 2 0 0 1年 7月采集 2 6 2 5 2名饮食、服务行业从业人员健康体检者粪便标本 ,分别接种于碱性蛋白胨水和 4号琼脂中。通过培养特性、菌落形态、革兰染色、动力和生化试验等检查 ,对所分离的疑似霍乱弧菌菌株进行初步鉴定。采用霍乱弧菌O1群及O139群单克隆抗体的玻片凝集试验、噬菌体分型、霍乱弧菌ctxA和tcpA基因的PCR进一步鉴定各疑似霍乱菌株。 结果　上述标本中检出O1血清群和O139血清群霍乱弧菌各 2株。 2株O1血清群霍乱弧菌的噬菌体分型分别为 19k和 5k ,为埃尔托生物型非流行菌株 ;2株O139血清群霍乱弧菌的噬菌体分型分别为 2 0k和 31k ;但ctxA和tcpA基因PCR检测结果均为阴性。结论　尽管所检出的 4株霍乱弧菌均为无毒力的非流行菌株 ,但因携带者从事职业的特殊性 ,仍应引起高度重视。