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IgA类单克隆抗体血型定型试剂的实验室研究及临床应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:用实验室手段和大样本临床验证方法,研究IgA类抗血型单克隆抗体(mAb)用作人血型定型试剂的可行性。方法:根据《中国生物制品规程》、新药临床验证以及有关要求,检测规模化生产的mAb的有关指标,并在人群中用反向定型等方法进行验证。结果:所有指标均达到或超过国家标准,临床应用未出现错判和误判。结论:所生产的mAb完全可以用于中国人ABO血型定型。 相似文献
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目的 真核表达人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,SV)融合蛋白(fusion protein,),并完成蛋白纯化及纯度测定.方法 根据编码F蛋白的基因序列设计引物,CR方法扩增出3'端带His标签的F基因序列,克隆入pGEM-T-easy载体,经核酸序列分析后,进一步克隆到pcDNA3.1( )真核表达载体,限制性内切酶鉴定,用脂质体Lipofectamine2000转染COS-7细胞,2 h后再用Westem blot检测目的蛋白的表达.Ni柱亲和层析纯化COS-7细胞表达的F蛋白,高效毛细管电泳分析纯化后蛋白纯度.结果 核酸序列分析证实获得带His标签的RSV F基因序列,没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,利用Western blot方法检测到F蛋白的特异性条带,纯度达99%以上.结论 初步建立了真核表达RSV F蛋白的纯化方法,为进一步优化RSV F蛋白制备条件及单克隆抗体及诊断试剂等研究奠定了基础. 相似文献
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基因重组EB病毒gp125抗原的鼻咽癌免疫荧光血清学诊断方法 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 尝试用基因工程表达抗原建立鼻咽癌诊断血清学方法。方法 用重组痘苗病毒感染细胞为抗原片 ,用免疫荧光法检测鼻咽癌患者、其他肿瘤患者和正常人血清抗Epstein Barr病毒 (EBV)IgA/gp12 5抗体 ,同时用传统方法检测其IgA/VCA、IgA/EA和IgA/MA抗体 ,将所得结果进行比较。结果 其灵敏度远远高于IgA/EA ,接近于IgA/MA和IgA/VCA ,特异性高于IgA/MA和IgA/VCA ,接近于IgA/EA。结论 建立了一种可用于鼻咽癌的诊断和高发人群普查的灵敏、特异、经济、简便的方法 相似文献
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目的探讨β-巯基乙醇(BME)和大鼠脑匀浆上清对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为类神经元样细胞的作用。方法采用全骨髓培养法从SD大鼠骨髓中分离培养MSCs,经贴壁法体外扩增、传代和流式细胞仪鉴定。①以1mmol/L浓度BME的含血清DMEM培养基预诱导24 h,再以含5 mmol/L BME的无血清DMEM培养基诱导5 h至MSCs神经分化。②使用大鼠脑匀浆上清诱导MSCs,48 h至神经分化。免疫细胞化学染色分别检测两种诱导方法MSCs培养物神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果第5代MSCs有97.5%表达CD90抗原,1.72%表达CD45抗原。两种方法诱导后的细胞均具有神经细胞的形态特征;相比脑匀浆上清BME诱导组细胞形态变化更快。两种方法都可诱导MSCs表达NSE;鼠脑匀浆上清可诱导MSCs表达GFAP。结论MSCs具有向神经细胞分化的可塑性,相比BME,鼠脑匀浆上清具有诱导MSCs向胶质细胞分化的倾向。 相似文献
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目的 建立体外培养细胞胶原合成模型并研究三七总苷对胶原合成的影响。方法 用不同浓度和比例的新生牛血清和大鼠血清混合,筛选刺激HSC-T6细胞胶原合成的最佳条件, 继而用3H-Proline掺入法研究三七总苷对其胶原合成的影响。结果10%新生牛血清加3%大鼠血清为刺激HSC-T6细胞胶原合成最佳培养条件。培养48和72 h后,0.01,0.05,0.25,1.00 和1.25 mg8226;mL-1浓度的三七总苷对 HSC T6细胞胶原合成有明显的抑制作用(P<0.05);并呈剂量效应关系和时间效应关系,方差分析,F分别为4.517和5.832(均P<0.05)。结论 成功建立了体外培养细胞胶原合成模型,三七总苷对细胞胶原合成有明显抑制作用 。 相似文献
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背景:为模拟胞外基质对生物行为的调控功能,通常采用基质中的活性成分对钛表面进行改性,但这些单一的活性成分与天然基质仍有差距。
目的:在体外观察成骨细胞自身分泌的胞外基质修饰的钛表面对骨髓基质干细胞生物学行为的影响,为进一步指导钛种植体表面的仿生构建提供实验依据。
设计、时间及地点:细胞-材料学体外对照观察,于2008-12/2009-02在安徽医科大学医学生物工程实验室完成。
材料:SPF级新生1~3 d龄SD乳鼠2只,SD大鼠2只,由安徽省实验动物中心提供。TA2纯钛棒为宝鸡金埠钛设备有限公司产品。
方法:取SD乳鼠,采用改良组织块法培养成骨细胞。取直径12 mm的钛棒,加工成厚1 mm纯钛片,消毒后放入24孔培养板中,用DMEM培养液将成骨细胞浓度调整为3×108 L-1,取1 mL/孔接种于钛片上,经过反复冻融脱去细胞留下基质,即为基质化钛片。取SD大鼠,采用全血贴壁法培养骨髓基质干细胞,取传至第3代的细胞,分为基质化钛片组、纯钛片组,用DMEM培养液将其浓度调整为1×108 L-1,分别接种于基质化钛片和纯钛片上,1 mL/孔。
主要观察指标:通过荧光免疫组化、扫描电镜观察和MTT检测,评价两组钛片上骨髓基质细胞的早期黏附及铺展情况。
结果:接种4 h时与纯钛片组比较,基质化钛片组细胞黏附率显著升高(P < 0.05)。接种4 h后,骨髓基质干细胞在基质化钛片表面已呈现出一定的附着形态;24 h后细胞呈良好的铺展形态,紧贴附于基质化钛片表面,出现伪足突起,细胞间以这种突起建立相互联系;72 h后细胞充分铺展,胞体平铺面积迅速扩大。
结论:胞外基质的存在能够促进骨髓基质细胞的早期黏附,并且有利于细胞的进一步铺展。 相似文献
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目的探讨p16基因甲基化对非小细胞肺癌发病的影响。方法原发性肺癌患者47例及同期无呼吸系统疾病又未患任何肿瘤同性别者94例作对照,采用甲基化特异性PCR等技术,检测p16基因甲基化。结果p16基因甲基化在肺癌组织和正常肺组织中检出率分别为44.7%(21/47)和17.0%(8/47),两者有显著差异(P<0.05)。37例非小细胞肺癌吸烟者中有21例肺癌组织发生p16基因甲基化,而10例非小细胞肺癌非吸烟者中无一例肺癌组织发生p16基因甲基化。p16基因甲基化与年龄、饮酒、肺癌病理分型及肺癌临床分期之间均无明显的相关性(P>0.05)。结论p16基因甲基化与非小细胞肺癌发生的关系非常密切,p16基因甲基化与吸烟有关。检测p16基因甲基化与否,可能有助于肺癌的诊断。 相似文献
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