广西南宁地区结直肠癌患者KRAS基因突变分析

目的分析广西南宁地区结直肠癌患者KRAS基因突变的情况。方法采用突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)PCR法检测149例结直肠癌患者KRAS基因2号外显子第12和13位密码子突变情况,同时分析其突变与临床特征的关系。结果 149例结直肠癌患者中共检出29例患者KRAS基因突变(19.5%)。其中腺癌患者142例,突变率为20.4%(29/142)。女性患者KRAS基因突变率(24.5%,13/53)与男性患者KRAS基因突变率(16.7%,16/96)相比差异无显著性。≤60岁患者突变率(22.4%,22/98)与>60岁患者突变率(13.7%,7/51)相比差异无显著性。汉族患者突变率(17.3%,19/110)与壮族患者突变率(25%,7/28)相比差异无显著性。突变类型以2号外显子第12位突变为主,其中Gly12Asp突变比例最高(34.5%,10/29)。结论广西南宁地区结直肠癌KRAS基因突变以2号外显子第12位的突变为主。KRAS基因突变率与性别和年龄无相关性。     

原发性肝癌和慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平分析

目的:探讨原发性肝癌和慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平的表达及其意义.方法:采用流式细胞术(FCM)检测74例肝癌(其中47例同时伴有乙型肝炎,27例则无乙型肝炎)、58例慢性乙型肝炎患者和42例正常人外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分含量.结果:乙肝组、肝癌伴乙肝组、肝癌不伴乙肝组分别与对照组比较,CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD4+与CD3+/CD8+的比值及NK均下降,CD3+/CD8+升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);肝癌伴乙肝组、肝癌不伴乙肝组分别与乙肝组比较,CD3+/CD4+ 和NK均下降,CD3+/CD8+升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);但肝癌伴乙肝组和肝癌不伴乙肝组相比较,各项指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论:原发性肝癌和慢性乙型肝炎均会不同程度的导致机体免疫功能紊乱.     

浅谈医学院校附属医院科研实验室建设的几点问题

医学院校附属医院科研实验室的稳定运行是促进医院科研发展,提高医院综合实力的重要条件。本文结合笔者所在医院科研实验室的具体情况,从运行模式、资源配备、管理制度、人才队伍四个方面,阐述医学院校附属医院实验室建设的几点经验,并提出了存在的问题及相关解决方法。     

表达融合基因的急性B淋巴细胞白血病患者形态学和免疫表型特点

目的:分析6种常见融合基因阳性的急性B淋巴细胞白血病患者骨髓形态学和免疫表型的特点.方法:对108例初诊的急性B淋巴细胞白血病患者,分别利用多重巢式RT-PCR技术和流式细胞术检测融合基因及其免疫表型,将BCR/ABL、TEL/AML1、E2A/PBX1、TLS/ERG、MLL/AF9、MLL/AF46种融合基因阳性者分成6组,分别与融合基因均为阴性者对比,比较形态学和免疫表型的差异.结果:108例急性B淋巴细胞白血病初诊患者中,共检出阳性43例(39.8%).与阴性组相比,BCR/ABL阳性组患者CD10和CD34抗原的表达率升高;TEL/AML1阳性组和TLS/ERG阳性组患者以儿童为主,CD20抗原表达率降低;E2A/PBX1阳性组患者L1型所占比例较高,CD34抗原的表达率降低;MLL/AF9阳性组患者均高表达CD33抗原,MLL/AF4阳性患者缺乏CD13、CD33抗原的表达.结论:6种融合基因在患者年龄构成、形态学及免疫表型中具有一定的分布特点.可结合形态学和免疫表型,提高融合基因结果判读的准确率.     

广西肝癌高发区人群血清HBV标志物与HBV-DNA水平的对比研究

目的 研究广西肝癌高发区肝癌高危人群中不同乙型肝炎病毒血清标志物模式与HBV-DNA 复制水平的关系.方法 在广西肝癌高发区采集肝癌高危对象静脉血标本2 800 份,用酶联免疫法检测乙肝病毒血清标志物,荧光定量PCR 法(FQ-PCR)检测HBV DNA 复制水平.结果 在2 800份血清标本中,大三阳(即HBsAg、HBeAg、抗HBc 均阳性)1 345 例,其中HBV-DNA 检出1 319 例,检出率为98.07%,平均拷贝数为8.78 × 107/ mL;小三阳(HBsAg、抗Hbe、抗HBc均阳性)756 例,HBV-DNA 检出455 例,检出率为60.19%,平均拷贝数为3.23×106/ mL;HBsAg、HBcAb 阳性419 例,HBV-DNA 检出161 例,检出率38.42%,平均拷贝数3.31×106/ mL.结论 在HBV 血清标志物模式中,以大三阳者的HBV 复制水平最高,应加强监测.     

肝癌患者术前血清胸苷激酶1表达水平及其临床意义

目的 探讨肝细胞肝癌患者术前血清胸苷激酶1(TK1)表达水平及其临床意义.方法 采用免疫印迹增强化学发光法检测125例肝细胞肝癌患者(肝癌组)、30例肝脏良性病变患者(肝脏良性病变组)和40例健康体检者(健康对照组)血清TK1水平.分析肝癌组患者TK1水平与临床病理特征的关系.结果 肝癌组血清TK1水平和阳性表达率均明显高于肝脏良性病变组和健康对照组(P＜0.05),而肝脏良性病变组与健康对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).巴塞罗那临床肝癌分期为(B+C)期肝癌患者血清TK1水平高于(0+A)期肝癌患者(P＜0.05).结论 检测血清TK1对肝癌的诊断具有一定的临床参考价值.     

广西贵港市肝癌筛查及HBV基因型分布现况调查

目的 探讨广西贵港市防癌筛查对象的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染状况及HBV基因型的分布特征。方法 分析贵港市3个城区接受肝癌早诊早治筛查的30~59岁共67.75万居民的基本情况,根据HBsAg阳性筛查肝癌高危人群(HBsAg阳性人群),从中按地区以分层抽样的方法选取1 989例高危对象,进行HBV DNA定量检测,以选取HBV DNA病毒拷贝数大于检出限(1×103)的HBsAg携带者,采用PCR-RFLP进行HBV基因分型。结果 筛查人群中HBsAg阳性率为11.99%,其中男性HBsAg阳性率高于女性(P<0.01),不同年龄组HBsAg阳性率差异有统计学意义(P<0.01),HBsAg阳性率随年龄的增长呈下降趋势。在肝癌高危人群中,HBV DNA病毒拷贝数≥1×103 755例,其中HBV A基因型6例(0.79%)。B基因型337例(44.64%)。C基因型293例(38.81%)。D基因型18例(2.39%)。UT基因型101例(13.37%),B和C基因型在男女性中的分布差异无统计学意义(P>0.05);各年龄组间HBV 基因型的分布差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 广西贵港市3个城区肝癌早诊早治筛查人群的HBV感染率较高,HBV基因型以B和C基因型为主,肝癌早诊率较低,需进一步完善肝癌早诊早治技术方案和管理模式,提高筛查和早诊早治效果。     

脂肪酸结合蛋白5结合Vimentin蛋白在肝癌中的作用机制

目的 筛选和验证与脂肪酸结合蛋白5(FABP5)结合的互作蛋白,同时研究FABP5与候选蛋白的调控关系,进一步探讨FABP5在肝癌中的作用机制。方法 采用免疫沉淀联合串联质谱分析方法（IP-MS）筛选出与FABP5相互结合的蛋白;通过免疫共沉淀实验（Co-IP）从外源性和内源性层面验证FABP5与候选互作蛋白的结合关系;利用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光法观察敲低FABP5对肝癌细胞中波形蛋白（Vimentin）转录和翻译水平的影响;通过鬼笔环肽染色实验观察过表达FABP5对肝癌细胞骨架的影响。结果 IP-MS鉴定出336个与FABP5相互结合的潜在靶蛋白,结合文献,挑选出5个与肿瘤相关的候选蛋白,分别为PRDX1、PRSS3、PKM、HSP90AA1和Vimentin蛋白。通过外源性和内源性Co-IP实验证实FABP5与Vimentin蛋白存在结合关系。敲低FABP5对肝癌细胞中Vimentin mRNA的表达没有显著作用,但可抑制Vimentin蛋白的表达,而过表达FABP5会影响肝癌细胞的骨架。结论 FABP5促进肝癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能与FABP5结...     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变和EML4-ALK融合基因表达的研究

目的研究广西地区非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因表达的情况。方法分别采用扩增耐突变系统(ARMS-PCR)法和实时荧光定量PCR扩增检测119例NSCLC患者EGFR基因外显子18~21的突变和9种EML4-ALK融合突变体,同时分析其与临床病理特征的关系。结果 119例NSCLC患者共检出44例EGFR基因突变,检出率为37.0%,检出7例EML4-ALK融合基因阳性表达,检出率为5.9%。其中EGFR基因突变主要见于腺癌、女性、不吸烟患者;EML4-ALK融合基因表达可能与不吸烟有关,而在性别、年龄、肿瘤病理类型、淋巴转移方面比较,差异无统计学意义(P0.05);EGFR基因突变与EML4-ALK融合基因不共存。结论广西地区NSCLC患者的EGFR基因突变率与EML4-ALK融合基因阳性表达率与中国其他地区总体水平接近,均具有一定临床病理特征。     

成人和儿童急性白血病常见融合基因表达的比较

目的 比较成人和儿童急性白血病常见融合基因表达的差异.方法 采用多重巢式PCR技术检测159例成人和120例儿童初治急性白血病患者的常见融合基因,比较成人及儿童各融合基因的阳性率.结果 儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者白血病融合基因总阳性率为51.11%(46/90),高于成人ALL患者的25.53%(24/94)(P<0.05);其中儿童TEL/AML1及TLS/ERG融合基因阳性率高于成人(P>0.05).儿童急性髓系细胞白血病(AML)患者白血病融合基因总阳性率为53.33%(16/30),高于成人AML患者的26.15%(17/65)(P<0.05);其中儿童AML1/ETO融合基因阳性率高于成人(P>0.05).结论 成人及儿童急性白血病融合基因的表达存在一定差异,临床上应有针对性地进行相关融合基因的检测和判读,以提高诊疗质量.