带状疱疹伴上肢运动性麻痹2例

例1男,68岁,右侧肩颈、上肢皮疹伴疼痛、麻木无力4 d。皮肤科情况：右侧肩颈部、右上肢可见暗红斑片上密集分布米粒至绿豆大水疱,疱壁紧张,疱液清,呈带状分布,未见破溃及渗出。电生理检查提示：右上肢臂丛(上干)神经损害。诊断：带状疱疹伴右上肢运动性麻痹。予抗病毒、营养神经、止痛等治疗,11个月后肌力基本恢复正常。例2男,52岁,左上肢疼痛半个月,加重伴皮疹10 d。皮肤科情况：左手、左前臂肿胀,左手可见深在绿豆大小水疱,左上肢、肩胛部可见暗红斑片上密集分布粟粒至黄豆大水疱,疱壁紧张,疱液浑浊,呈带状分布。肌电图神经传导速度(NVC)检查提示：左尺神经运动传导速度减慢。诊断：带状疱疹伴左上肢运动性麻痹。予以抗病毒、抗炎、康复训练、针灸等治疗,4个月后左上肢近端肌力基本恢复正常。     

姜黄挥发油对皮肤鳞癌A431细胞增殖及凋亡的影响

为研究姜黄挥发油(turmeric volatile oil,TVO)对皮肤鳞癌(CSCC)A431(以下简称A431)细胞增殖及凋亡的影响并探讨其机制,该实验采用不同质量浓度(5~80 mg·L-1)TVO体外作用于A431细胞,利用细胞增殖/毒性检测试剂盒(celcounting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活性;倒置显微镜观察细胞形态变化;吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染色荧光显微镜观察A431细胞凋亡情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)表达量。结果显示,随TVO质量浓度的增加对A431细胞生长具有显著的抑制增殖作用,呈剂量依赖关系,各组间差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,不同质量浓度TVO组均出现细胞皱缩及细胞破碎现象,细胞凋亡率增加,并呈剂量依赖性,caspase-3,caspase-9的相对表达量上调,各组间差异有统计学意义(P0.05),提示了TVO能抑制皮肤鳞癌A431细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与上调caspase-3,caspase-9的表达有关。     

姜黄挥发油对黑色素瘤wm9细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究姜黄挥发油对黑色素瘤wm9细胞增殖与凋亡的影响.方法 应用不同浓度的姜黄挥发油作用于黑色素瘤的wm9细胞.用细胞增殖计数试剂盒(CCK8)检测增殖抑制率,倒置显微镜观察细胞形态学变化,ELISA法检测Caspase-3酶活性,流式细胞检测细胞周期和凋亡.结果 姜黄挥发油在不同浓度下,对黑色素瘤wm9细胞作用表现不同,当药物浓度达到40 mg/L,倒置显微镜下可见到典型的凋亡细胞;Caspase-3酶活性随着药物浓度的递增,呈现药物浓度-酶活性正相关性;经姜黄挥发油作用后的wm9细胞被阻滞在G2/M期.结论 姜黄挥发油诱导黑色素瘤wm9细胞凋亡的机制与细胞周期G2/M期阻滞、Caspase酶活化参与凋亡有关.     

依维莫司和AR-A014418联合使用促进黑素瘤细胞A375的凋亡

目的 探讨同时抑制mTORC1激酶和GSK-3β激酶活性对黑素瘤细胞4EBP1的磷酸化、帽子依赖翻译、细胞存活和凋亡的影响。 方法 分别采用二甲基亚砜（DMSO组）、5 nmol/L 依维莫司（依维莫司组）、10 μmol/L AR-A014418（AR-A014418组）、5 nmol/L 依维莫司联合10 μmol/L AR-A014418（联合处理组）处理A375细胞,Western印迹法检测4EBP1的磷酸化和生存素蛋白的表达,m7GTP pull-down实验检测eIF4E和eIF4G的相互作用,CCK8法和流式细胞仪分别检测A375细胞的增殖和凋亡。 结果 依维莫司和AR-A014418对4EBP1磷酸化和生存素蛋白表达均有一定的抑制作用,两组p4EBP1-65分别为0.74 ± 0.05和0.62 ± 0.06,生存素蛋白分别为0.71 ± 0.06和0.58 ± 0.07,与DMSO组（分别为1.00 ± 0.07和1.00 ± 0.06）相比,均P < 0.001,且联合处理组对4EBP1磷酸化（0.14 ± 0.04）和生存素蛋白表达（0.09 ± 0.05）的抑制更为显著。m7GTP pull-down实验显示,依维莫司组（0.72 ± 0.04）、AR-A014418组（0.67 ± 0.05）、联合处理组（0.12 ± 0.05）eIF4G相对值均低于DMSO组（1.00 ± 0.06）,而4EBP1相对值均高于DMSO组（分别为1.98 ± 0.16、2.32 ± 0.17、7.58 ± 0.25、1.00 ± 0.08）,且联合处理组eIF4G降低和4EBP1增加最为显著。培养24 h时,与DMSO组相比,依维莫司、AR-A014418、依维莫司联合AR-A014418均对A375细胞增殖有抑制作用（后3组抑制率分别为18.5% ± 1.3%、19.8% ± 1.8%、61.2% ± 2.1%）,且联合处理组的抑制作用最为显著;培养48 h时,依维莫司和AR-A014418对A375细胞增殖的抑制显示相同的趋势,且其抑制作用随时间的延长而增强。流式细胞仪检测显示,依维莫司和AR-A014418单独处理A375细胞24 h对其凋亡有一定的促进作用（凋亡率分别为14.28% ± 2.18%、14.57% ± 2.35%）,联合处理时细胞凋亡更为显著,凋亡率为55.18% ± 6.27%。 结论 联合使用依维莫司和AR-A014418显著抑制A375细胞中4EBP1的磷酸化,进而抑制eIF4F蛋白复合物的形成,从而抑制帽子依赖的翻译,促进黑素瘤细胞的凋亡。     

芳姜黄酮衍生物对A375人黑素瘤细胞增殖及凋亡作用的机制研究

目的：研究一种芳姜黄酮衍生物（ATD）对人皮肤黑色素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度（5、10、20、40、80μmol/L）ATD、长春新碱及芳姜黄酮体外作用A375及人皮肤成纤维细胞（HSF）48 h。CCK?8法检测细胞增殖抑制率;吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色,倒置显微镜观察细胞凋亡形态;DNA片段化检测细胞凋亡;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase?3）活性;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期。结果ATD、长春新碱及芳姜黄酮对A375细胞有抑制增殖作用,且呈剂量依赖性（ATD：R2=0.99,F=340.96;长春新碱：R2=0.99,F=349.19;芳姜黄酮：R2=0.89,F=25.41,均P<0.05）,三者IC50分别为（15.96±0.02）、（77.00±0.04）及（356.95±0.01）μmol/L。当药物浓度为5μmol/L及10μmol/L时,ATD对HSF增殖抑制率分别为（8±0.06）%和（25±0.02）%,长春新碱为（33±0.04）%和（29±0.08）%,芳姜黄酮为（49±0.09）%和（34±0.07）%;ATD对A375细胞抑制率分别为（26±0.06）%和（39±0.02）%,长春新碱为（8±0.04）%和（17±0.08）%,芳姜黄酮为（6±0.09）%和（10±0.07）%,与二甲基亚砜相比,差异均有统计学意义（P＜0.05）,且ATD对A375细胞增殖抑制活性强于长春新碱及芳姜黄酮（P＜0.05）,但对HSF细胞毒性却明显低于长春新碱及芳姜黄酮（P＜0.05）。ATD、长春新碱及芳姜黄酮均可诱导A375细胞凋亡,caspase?3活性随3种药物浓度增加而增强,且药效为ATD>长春新碱>芳姜黄酮。流式细胞仪检测证实,3种药物都能诱导细胞发生不同程度凋亡,同芳姜黄酮及长春新碱相比,ATD能显著诱导细胞凋亡,且以晚期凋亡为主。随药物浓度增加,ATD组G1期A375细胞逐渐增多,G2期及S期细胞数明显减少。结论 ATD对A375细胞有抑制增殖及促凋亡作用,该作用明显强于芳姜黄酮及长春新碱,其机制可能是激活caspase?3,使细胞周期阻滞在G1期,进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。     

松油烯-4-醇对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨松油烯-4-醇（T4O）对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。 方法 不同浓度（5~80 μmol/L）T4O体外作用于U266细胞。CCK-8法检测增殖抑制率;AO/EB染色,倒置显微镜观察细胞凋亡形态;比色法检测Caspase-3酶活性;流式细胞术检测细胞凋亡及周期;JC-1染色检测细胞线粒体膜电位。结果 T4O对U266细胞有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性（P<0.05）。T4O诱导U266细胞凋亡,呈剂量依赖性（P<0.05）,随药物浓度增加,Caspase-3酶活性逐渐增强（P<0.05）, 线粒体膜电位逐渐降低（P<0.05）,细胞周期被阻滞在G2期。结论 T4O对U266细胞有抑制增殖及促凋亡作用,其机制是激活细胞凋亡途径关键酶Caspase-3,使细胞线粒体膜电位降低,并且使细胞周期阻滞在G2期,进而抑制肿瘤细胞分化与增殖。     

松油烯-4-醇通过线粒体途径诱导宫颈癌Siha细胞凋亡的机制研究

目的 探讨松油烯-4-醇对宫颈癌Siha细胞凋亡的影响以及其可能的机制。方法 采用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养Siha细胞,并将其分为对照组、顺铂组(10μmol/L)和5、7.5、10μmol/L松油烯-4-醇组。MTT法检测不同浓度松油烯-4-醇对Siha细胞增殖的影响,TUNEL荧光染色法和Annexin V-FITC/PI法检测Siha细胞凋亡情况,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,RT-qPCR法检测Siha细胞Bax、cytochrome c、caspase9、HPV E6/E7 mRNA表达,Western blot法检测Siha细胞Bax、Bcl-2、cytochrome c、cleaved-caspase9蛋白表达。结果 松油烯-4-醇(5、7.5、10μmol/L)处理Siha细胞24 h后,细胞增殖能力减弱(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),细胞Bax、cytochrome c、cleaved-caspase9蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),...     

姜黄挥发油联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的 探讨姜黄挥发油（TVO）联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）A431细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法 取对数生长期A431细胞,用5、10、20、40、80 mg/L TVO处理,对照组用含有1％二甲基亚砜（DMSO）的DMEM高糖培养基处理,24 h后,CCK8法检测细胞增殖情况。另取部分A431细胞,分为4组,分别用含1％ DMSO的DMEM高糖培养基（对照组）、40 mg/L TVO（TVO组）、10 mg/L顺铂（顺铂组）、40 mg/L TVO和10 mg/L顺铂（TVO + 顺铂组）处理24 h后,利用CCK8法检测细胞增殖活性;倒置显微镜观察细胞形态变化;吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况;比色法检测Caspase?3、Caspase?9酶活性;Western印迹检测Caspase?3、P糖蛋白表达。结果 5、10、20、40、80 mg/L TVO作用A431细胞24 h,对细胞增殖抑制率分别是（12.83 ± 6.4）%、（16.27 ± 11.4）%、（21.61 ± 9.1）%、（33.11 ± 2.0）%和（46.00 ± 3.3）%,与对照组（4.03 ± 1.4）%比较差异均有统计学意义（P < 0.05）;24 h时抑制50%细胞增殖的TVO浓度为（61.66 ± 1.03） mg/L;TVO组、顺铂组及TVO + 顺铂组细胞增殖抑制率显著上升,与对照组比较差异均有统计学意义（P < 0.05）,联合用药有协同作用,联合指数（CI）为1.366（P < 0.05）。TVO组、顺铂组细胞均不同程度变圆并出现凋亡,TVO + 顺铂组细胞明显减少,出现大量细胞碎片。TVO组、顺铂组及TVO + 顺铂组细胞Caspase?3酶活性分别是1.117 ± 0.095、1.381 ± 0.089、1.520 ± 0.115,Caspase?9酶活性分别是1.259 ± 0.059、1.829 ± 0.171、2.760 ± 0.297,Caspase?3蛋白表达量分别是1.156 ± 0.006、1.296 ± 0.021、1.482 ± 0.016,P糖蛋白表达量分别是1.311 ± 0.011、1.169 ± 0.012、0.528 ± 0.014,其中TVO + 顺铂组细胞Caspase?3、Caspase?9酶活性及Caspase?3蛋白表达量显著高于TVO组和顺铂组,P糖蛋白表达量显著低于TVO组和顺铂组,差异均有统计学意义（P < 0.01）。结论 姜黄挥发油与顺铂联用可协同抑制人皮肤鳞癌A431细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与活化Caspase系统并降低P糖蛋白表达相关。     

芥子碱硫氰酸盐对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞增殖、上皮间质转化、转移的影响及其机制研究

目的:研究芥子碱硫氰酸盐(ST)对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞增殖、上皮间质转化(EMT)和转移的影响,并考察其可能的作用机制。方法:将人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞分为空白对照组(0.1%二甲基亚砜)和ST不同浓度组(5、10、20μmol/L),分别通过CCK-8实验、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色实验、细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力,通过Western blot实验和免疫荧光实验分别测定各组细胞中EMT相关指标N-钙黏着蛋白(N-cadherin)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)的表达水平。另将SCL-1细胞分为空白对照组(0.1%二甲基亚砜)、ST单用组(20μmol/L)、ST+NSC228155组[20μmol/L ST+100μmol/L NSC228155(EGFR激动剂)]和ST+SC79组[20μmol/L ST+20μmol/L SC79(PI3K/Akt激动剂)],分别通过CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并通过Western blot实验测定空白对照组(0.1%二甲基亚砜)和ST不同浓度组(5、10、20μmol/L)组细胞中表皮生长因子受体(EGFR)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达水平,以验证ST的作用与EGFR/PI3K/Akt信号通路的关系。另将SCL-1细胞和人正常皮肤成纤维细胞WS1分别分为空白对照组(0.1%二甲基亚砜)、ST组(20μmol/L)、ZD1839组(阳性对照,20μmol/L,EGFR抑制剂)和LY294002组(阳性对照,20μmol/L,PI3K/Akt抑制剂),采用CCK-8实验测定各组细胞的增殖能力,以评价ST的细胞毒性。结果:与空白对照组比较,5、10、20μmol/L ST组SCL-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05);Western blot和免疫荧光实验结果显示,5、10、20μmol/L ST组SCL-1细胞中N-cadherin蛋白的表达均显著下调(P<0.05),E-cadherin蛋白的表达均显著上调(P<0.05),并且细胞中EGFR、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。与ST单用组比较,ST+NSC228155组和ST+SC79组SCL-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著增强(P<0.05)。与空白对照组比较,ST组WS1细胞的增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),SCL-1细胞增殖能力显著减弱(P<0.05),ZD1839组和LY294002组两种细胞的增殖能力均显著减弱(P<0.05);与ST组比较,ZD1839组和LY294002组WS1细胞的增殖能力均显著减弱(P<0.05),但SCL-1细胞的增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ST可能通过抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路的活化而抑制人皮肤鳞癌SCL-1细胞的增殖、EMT和转移,且其毒副作用较小。     

长链非编码 RNA参与前列腺癌相关信号通路调控介导肿瘤发生进展的研究进展

前列腺癌( prostate cancer,PCa)属于一类恶性程度极高的泌尿系肿瘤,在全球新发癌症病例中前列腺癌位居第四位。由于前列腺癌具有高度异质性及耐药性,目前尚无治愈药物问世,阐明前列腺癌恶性进展的分子机制将对改善前列腺癌药物抗性,提升病人预后大有裨益。在前列腺癌发生发展的过程中各类信号通路起到了重要调控作用,包括胞内磷脂酰肌醇激酶 丝氨酸 /苏氨酸特异性蛋白激酶( PI3K-Akt)信号通路、雄激素受体( androgen receptor,AR)、无翼信号通路( WNT)、缺口信号通路( Notch)在内的多种信号通路失衡显著影响了前列腺癌的恶性进展,然而其深层的分子机制仍有待进一步阐述。长链非编码 RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是一类长度大于 200 bp的 RNA分子,在过去十多年随着测序技术的发展, lncRNA的重要作用逐渐被研究者所认知,在前列腺癌中多种 lncRNA通过影响前列腺癌中关键信号通路发挥相应作用参与调控前列腺癌的进展。该文就 lncRNA在前列腺癌相关信号通路发挥的作用及相应分子机制作一综述,以期给前列腺癌治疗提供新的思路与方案。