基于深度学习框架的循环染色体异常细胞识别

目的 循环染色体异常细胞(circulating genetically abnormal cell, CAC)检测是一种无创或微创、敏感、经济的肿瘤早期诊断方法。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)通过计算荧光探针在细胞核内产生的增益,可以准确地检测CAC中基因异常的繁殖。然而,基于FISH的CAC识别存在细胞核重叠和荧光信号形态多样的问题,人工检测荧光信号是困难的。方法 本研究基于四色荧光原位杂交肺癌图像,针对细胞核和染色信号形态特征提出一种级联细胞核分割网络(cascaded nuclei segmentation network, CACNET)和信号点检测网络(signal detection network, FISHNET)的CAC识别方案。首先使用CACNET对细胞核进行分割获取掩膜,并对应裁剪荧光染色信号图像,然后对单细胞核内的信号点使用FISHNET进行检测,最终对信号点计数并利用临床诊断方法判别细胞。其中,CACNET通过结合注意力机制和边缘约束算法提升重叠细胞核分割效果。FISHNET通过热图回归拟合染...     

T7噬菌体衣壳蛋白IOA的表达、纯化及多克隆抗体的制备

目的表达纯化T7噬菌体衣壳蛋白10A,并免疫家兔得到抗10．4多克隆抗体．为研究噬菌体展示抗体技术,进而筛选致病微生物蛋白抗体奠定基础。方法37℃培养含有17噬菌体10A蛋白质粒的大肠杆菌BLT5615,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷直接诱导表达该蛋白;SDS．PAGE鉴定表达状态,盐酸胍变性一尿素复性纯化以包涵体形式存在的蛋白并免疫家兔：辛酸一硫酸铵沉淀法纯化多克隆抗体,间接ELISA测定效价,WesternBlot鉴定特异性。结果成功表达了T7噬菌体衣壳蛋白10A。SDS—PAGE显示所表达的蛋白相对分子质量约为37kDa。主要以包涵体形式存在：复性后SDS—PAGE分析获得单一条带蛋白。利用该蛋白免疫家兔,6次免疫后抗血清的效价均达到1：160003。纯化后的多克隆抗体可以和17噬菌体衣壳蛋白10A特异结合。结论成功表达、纯化了17噬菌体衣壳蛋白10A,并制备了其多克隆抗体。