新免疫抑制剂雷帕霉素抗移植排斥作用的实验研究

作者研究了雷帕霉素（rapamycin;RPM）对C57BL/6J→BALB/c小鼠心肌和皮肤移植的抗移植排斥作用,结果表明 RPM比目前应用于临床器官移植的环孢菌素（Cyclosporine A;CsA）具有更好的抗移植排斥作用。此外还观察了 RPM对正在进行的移植心肌排斥反应的作用,RPM于小鼠心肌移植后第 7天开始给药与0天开始给药组相比较,移植心肌的平均存活天数无明显差异,表明RPM对心肌移植排斥反应有很好的治疗作用。小剂量的RPM与亚治疗剂量的CsA合用还有很好的协同作用。     

免疫抑制剂Rapamycin的研究进展

新型免疫抑制剂Ｒａｐａｍｙｃｉｎ具有优于环孢菌素、ＦＫ５０６的免疫抑制活性。它能抑制生长因子或细胞因子引起的细胞增殖。动物实验表明它对急、慢性排斥反应、加速移植排斥反应、移植物抗宿主病等均有其独到的疗效。此外它也可用于多种实验性自身免疫病的治疗。本文就Ｒａ－ｐａｍｙｃｉｎ的体内外免疫抑制作用特点，作用机制及毒副反应等研究进展作简要介绍。     

应用长链RT-PCR法扩增我国登革2、4型病毒株全长cDNA

目的：采用长链RT-PCR技术扩增登革2型及4型病毒基因组全长cDNA，为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达，深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础。方法：根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列，设计上下游引物。从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA，采用长链RT-PCR技术进行扩增。为检验扩增产物的特异性，以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的10个片段。将含有复杂二级结构的5′非编码区扩增片段，在377A型自动测序仪进行序列分析。结果：扩增出登革2、4型病毒基因组全长近11kb cDNA分子，非编码区测序结果表明扩增产物为登革2、4型病毒所特有。结论：利用长链RT-PCR首次成功扩增出登革病毒全长cDNA分子。     

免疫抑制活性物质335A对小鼠免疫功能的影响

对链霉菌 335产生的代谢产物 335 A的体外、体内免疫反应的作用进行了研究。结果表明 ,335 A体外对小鼠脾细胞的增殖反应及混合淋巴细胞反应均呈强烈的抑制作用 ,半数抑制浓度 (IC50 )分别为 2 .2和10 ng/ ml,且是一种特异的 T细胞抑制剂。以上作用并不是非特异性细胞毒作用所致。通过不同时间加入335 A,显示其作用在 T淋巴细胞活化的早期。 335 A对三种实验动物模型的免疫抑制作用的研究表明 ,4 mg/ kg的 335 A对小鼠抗绵羊红细胞抗体产生的抑制率为 98.7% ,并对绵羊红细胞诱导的 DTH反应有明显的抑制作用 ;8mg/ kg的 335 A使小鼠移植心肌的存活时间由 (8.71± 0 .4 8) d延长至 (13.0± 0 .1) d。初步的作用机制研究表明它主要抑制 Th细胞分泌淋巴因子及其受体表达。     

登革2型病毒全长cDNA克隆定点诱变的OL-PCR方法

目的 对带有登革2型病毒（DEN-2）全长cDNA的质粒pDVWS501上E62、E203位点进行定点诱变。方法 设计4对点诱变引物,运用OL-PCR（overlapPCR)法,扩增出分别在E62或E203位带有点突变的2条DNA片段,克隆至T载体,获T-TB62、T-TB203两个克隆,将T-TB62用ClaⅠ和SphⅠ分别酶切,T-TB203用SphⅠ NheⅠ酶切后,用T4连接酶分别连接至pDVWS501,获重组质粒TB62和TB203。对TB62和TB203进行序列测定。结果 成功得到分别在E62、E203位带有点突变的TB62、TB203克隆。结论 OL-PCR法是具有较高突变效率的定点诱变方法。     

新型免疫抑制剂来氟米特药效学实验研究

为验证来氟米特的免疫抑制作用,应用ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠自身溶血性贫血、Ｗｉｓｔａｒ大鼠佐剂剂性关节炎及Ｃ５７ＢＬ／６－〉ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠心肌移植模型,观察ＬＦＭ对抗自身红细胞抗体产生、炎症及移植排斥反应的预防和治疗作用。     

我国3株登革2型病毒E基因序列测定及毒力基因位点分析

目的 测定我国3株临床症状、乳鼠神经毒力不同的登革2型病毒流行株E基因序列并找到可能与毒力相关的基因位点。方法 运用RT-PCR法测定我国3株登革病毒的E基因序列。结果 DEN2-04、43、44株的核苷酸及氨基酸同源性均在95%以上,DEN2-04与DEN2-43、44共有4个氨基酸差异引起极性或电荷的变化。结论 E64、E203很可能是与毒力相关的基因位点。     

登革病毒的感染及复制研究进展

登革病毒属于黄病毒科黄病毒属,是具包膜的单股正链RNA虫媒病毒。其包膜蛋白E与细胞受体的结合介导病毒进入细胞,随后在感染细胞浆内复制。随着对非结构蛋白的深入研究,发现NS1、NS2A、NS3、NS4A及NS5蛋白均参与了病毒复制合体的形成,在成熟病毒颗粒的最终形成过程中,需要NS2B／NS3蛋白酶对C蛋白前体的切割及缩主细胞的糖基转移酶对prM、E蛋白糖侧链的正确加工。本文综述了登革病毒受体、病毒的复制及装配过程等方面的最新研究进展。     

登革病毒致病相关因素的研究进展

登革病毒引起的疾病在世界范围内的流行、暴发日益频繁，出现登革出血热及登革休克综合征的病例数亦呈显著的上升趋势，目前虽然对其发病机理尚不明了，但越来越多的研究表明病毒的毒力及宿主的抵抗力因素起着重要作用。在病毒的进化过程中，某些核苷酸的变异会导致病毒毒力的变化，出现强毒株或减毒株；它们侵入宿主后，若宿主能使病毒的合成速率减慢，可降低发生病毒血症的可能性。本文主要对这两方面的研究进展作一综述。     

扩增我国登革2型病毒全长cDNA分子的融合PCR方法

目的：建立扩增登革2型病型基因组全长cDNA的融合PCR法，为深入探讨病毒基因的结构与功能提供有效的技术途径，方法：根据我国登革2型病毒D2－43株列设计引物，首先采用长链RT－PCR技术扩增病毒基因组5‘及3‘半分子，然而以阗分子采用融合PCR法将两个半分子建成全长cDNA分子，为进一步证实所构建全长cDNA分子的特异性，再以融合PCR产物为模板扩增5‘非编码区序列，与pGEM-T载体连接，在377A型自动测序仪进行序列分析，结果：通过对逆转录反应及PCR扩增条件的优化，建立了制备大片段cDAN及构建全长cDNA分子的融合PCR方法，扩增的我国登革2型病毒的5‘及3‘半分子的半度均为5kb左右，采用融合PCR方法制备的全长cDNA长约11kb，与预期大小一致，非编码区测序结果表明扩增产物为D2－43所特有，结论：所建立的融合PCR方法是构建登革闰因组全成cDNA的有效技术。