采用均匀设计法优化PCR复合扩增的实验研究

目的探索均匀设计法在优化PCR复合扩增条件中的应用.方法采用均匀设计方法 ,对影响PCR扩增体系的MgCl2、dNTP、模板DNA和扩增循环次数等因素进行了U6(64)优化.结果获得5个条带清晰的目的 DNA扩增产物,建立了适用于5个Y-SNP位点(M130、M175、M174、M231、M45)的复合扩增反应体系.结论该优化复合扩增体系可用于法医物证学实验研究.     

17α-甲基睾酮对剑尾鱼的影响

目的 研究17α-甲基睾酮暴露对产后雌性剑尾鱼(Xiphophorus hilleri)性逆转组织形态学变化的影响,探讨剑尾鱼第二性征变化作为水环境风险评价(ERA)的有效生物学标记的可能性.方法 使用浸浴法以10wg/L 17α-甲基睾酮为剑尾鱼染毒持续7周,对实验鱼的体形、腹鳍、臀鳍、尾鳍及性腺等组织器官的变化进行观察;同时对幼鱼在实验室养殖条件下的性别分化进行统计.结果 17α-甲基皋酮对产后雌鱼有明显的影响,受诱导后出现性逆转,逐渐发育形成雄性第二性征:体形变纤细;腹鳍第1鳍条变短、第2和第3鳍条延长,臀鳍第3、4、5鳍条末端钩状化且第3鳍条变粗壮,尾鳍上下缘出现增生;体内与臀鳍相连的骨骼合并生长;受诱导的雌鱼性腺呈现退化趋势并伴有卵细胞坏死现象,生殖能力受到负面影响.结论 剑尾鱼臀鳍和尾鳍变化可作为水环境雄激素物质污染监测的有效生物学标记.     

应用全基因组扩增技术对α地中海贫血进行植入前遗传学诊断的效果分析

目的研究α地中海贫血患者囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断的效果。方法回顾分析本中心2015年1月至2016年11月α地中海贫血PGD周期资料,共139个周期,对比分析卵裂球活检后直接应用荧光PCR进行诊断(诊断方法一)与囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断(诊断方法二)的结果。结果两组在女方年龄、获卵数、正常受精数均无统计学差异(P0.05),但方法二(7.61±3.05)的平均活检个数显著小于方法一(9.48±3.66)(P0.05)。两种方法的正常胚胎率(35.22%vs.25.87%)、杂合子胚胎率(30.11%vs.50.19%)、异常胚胎率(30.11%vs.23.94%)、诊断失败率(16.21%vs.2.81%)有统计学差异(P0.05),临床妊娠率(50.00%vs.52.17%)无统计学差异(P0.05)。结论囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断的效果明显好于卵裂球活检后直接应用荧光PCR进行诊断。     

补中益气汤辅助治疗乔本氏甲状腺炎患者疗效的临床观察

目的 探讨补中益气汤辅助治疗桥本甲状腺炎患者疗效的临床观察.方法 选取2019年2月～2020年1月我院收治的桥本甲状腺炎患者96例,随机分为研究组和对照组各48例.对照组采用常规左甲状腺素片药物治疗,研究组在对照组基础上服用补中益气汤.对比治疗后两组患者毒副反应及治疗前后两组患者中医症候积分.结果 治疗后,研究组患者...     

改良技术在腹腔镜肾部分切除中的应用及患者选择

目的 比较常规阻断缝合及早期松开阻断(EU)联合单层缝合(SLS)在腹腔镜肾部分切除(LPN)中"三连胜"及"五连胜"成功率的差异,评估改良技术的安全性及肾功能保护价值,寻找新技术的适应证.方法 纳入80例接受LPN患者,40例采用改良技术,40例采用常规技术.收集患者基线、围手术期及随访资料并进行分析.结果 两组并发症发生率、手术切缘阳性率、复发转移率及"三连胜"达成率差异无统计学意义.改良组"五连胜"达成率显著高于常规组,常规组内年龄过大、肿瘤直径过大及术前肾小球滤过率(eGFR)过低是导致"五连胜"失败的独立危险因素.肿瘤直径＞ 35 mm、年龄＞64岁、术前eGFR＜ 73 ml/(min·1.73 m2)为导致"五连胜"失败临界值.结论 改良技术不增加各种并发症发生风险,在肿瘤体积较大、肾功能较差及高龄患者中使用该技术有利于患肾功能保护及"五连胜"目标的达成.     

参麦注射液对心绞痛患者血液流变学的影响

目的 :观察参麦注射液对心绞痛患者血液流变学的影响。方法 :应用参麦注射液对 86例心绞痛患者静脉滴注治疗 10天 ,观察对患者临床表现、体征、血液流变学影响。结果 :患者临床表现、体征明显改善 ,全血粘度、血浆粘度、聚集指数及红细胞压积等均显著降低 ,而肝肾功能、血电解质及心率、血压无变化。结论 :参麦注射液疗效确切 ,应用安全。     

腹腔镜下根治性全膀胱切除+原位新膀胱术治疗进展

膀胱癌是泌尿系统发病率最高的恶性肿瘤,近年来其发病率仍然居高不下。全膀胱切除+尿流改道是手术治疗金标准。近年来腹腔镜手术以其创伤小、恢复快的优势逐渐进入人们的视野,腹腔镜下全膀胱切除术也逐渐被人们所接受。本文主要针对腹腔镜膀胱癌手术现状作一综述。     

膀胱癌中eya4基因启动子区甲基化状态及其临床意义

目的 探讨膀胱癌细胞系和膀胱移行细胞癌组织中EYA转录共激活磷酸酶4(eya4)基因启动子区CpG岛甲基化状态及在临床病理特征中的意义.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测eya4基因在5株膀胱癌细胞系、1株膀胱永生化上皮细胞系和75例膀胱移行细胞癌组织及癌旁组织,并结合临床病理特征行统计学分析.结果 eya4基因启动子区在5株膀胱癌细胞系中,有4株出现甲基化,其甲基化率为80%;在人正常膀胱细胞系中甲基化阴性.eya4在膀胱癌组织中的甲基化率为70.7%(53/75),显著高于癌旁组织(24%,18/75),差异有统计学意义(x2=32.760,P<0.01).eya4基因启动子区CpG岛甲基化在临床病理特征中如单发膀胱肿瘤与多发膀胱肿瘤相比,直径≤3 cm的膀胱肿瘤与＞3 cm的膀胱肿瘤相比,低级别膀胱肿瘤与高级别膀胱肿瘤相比,浅表性膀胱肿瘤与浸润性膀胱肿瘤相比,差异均有统计学意义(P<0.05),但与年龄和性别无关.结论 基因eya4启动子区甲基化与膀胱癌的发生发展有关,可能作为膀胱移行细胞癌诊断的一个新的标志物.     

膀胱癌中miR-203的表达及其对吉西他滨化疗敏感性的影响

目的 探讨microRNA-203(miR-203)在膀胱癌中的表达以及其对吉西他滨化疗敏感性的影响.方法 应用Vita-Blue法检测膀胱癌细胞系对吉西他滨的敏感性差异并测定半数抑制浓度(IC50)值.应用探针法实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Taqman-qRT-PCR)检测27例膀胱癌组织和癌旁组织以及膀胱癌细胞系5637、Um-Uc-3、J82、SCaBER、 T24、Biu87中miR-203的表达水平.同时构建带有四环素诱导表达系统的miR-203超表达载体(pINDUCER21-EGFP-miR-203), 在吉西他滨化疗耐受的 Um-Uc-3细胞中转染 pINDUCER21-EGFP-miR-203,并用多西环素诱导表达,未诱导表达的为阴性对照,在化疗敏感的T24细胞中分别转染 miR-203 Antagomir 和 Antagomir control,同样使用 Taqman-qRT-PCR 和Vita-Blue方法检测膀胱癌细胞系中miR-203表达水平的变化及对吉西他滨的敏感性.结果 在膀胱癌组织中miR-203的表达显著低于癌旁组织,在膀胱癌细胞系 T24中miR-203的表达水平最高,Um-Uc-3细胞系中表达水平最低(P＜0.01).膀胱癌细胞系T24和Um-Uc-3细胞中对吉西他滨的IC50值分别为(0.46 ±0. 08)ng/ml和(5. 94 ± 0. 53)ng/ml(P＜0.01);pINDUCER21-EGFP-miR-203(D +)可以明显增加Um-Uc-3细胞的化疗敏感性,而miR-203 An-tagomir可以显著抑制T24细胞对吉西他滨的化疗敏感性.结论 miR-203与膀胱癌的发生发展相关,其高表达水平将提高膀胱癌对吉西他滨的化疗敏感性.