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1.
目的:观察自噬相关蛋白Atg5是否介导双酚A(bisphenol A,BPA)所致的肝脏脂质沉积。方法:将Hep G2肝细胞分为对照组、BPA不同浓度(1、10μmol/L)干预组、阳性对照组即200μmol/L油酸(oleic acid,OA)联合400μmol/L软脂酸(Palmitic acid,PA),分别给予上述不同干预24 h。采用化学酶促-比色法定量检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)含量,油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况。Real-time PCR及Western blot、免疫荧光方法检测在不同干预情况下Hep G2细胞内Atg5的表达水平。结果:1不同浓度BPA干预后,Hep G2细胞内TG含量均有不同程度的升高,其中10μmol/L BPA组升高具有统计学意义(0.197±0.033;0.094±0.014,P=0.031);2油红O染色结果与TG定量一致。3Real-time PCR结果表明,与对照组相比10μmol/L BPA组Atg5 m RNA表达并无明显变化(0.93±0.088;1.017 5±0.062 4,t=0.811,P=0.428);Western blot结果显示与对照组相比10μmol/L BPA组其蛋白表达明显减少(0.519±0.059;1,t=0.8101,P=0.000);免疫荧光进一步检测发现,与对照组相比10μmol/L BPA组Atg5荧光小点数量明显减少。结论:自噬相关蛋白Atg5可能介导BPA所致的肝脏脂质沉积的发生。 相似文献
2.
目的:基于二型大麻受体(CB2)的信号传递通路,建立体外高通量筛选CB2受体激动剂的药物模型。方法:将目的基因质粒pIRES2-EGFP-CB2、报告基因质粒pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro]、内参质粒PRL-TK共转染CHO细胞,通过检测双荧光素酶报告基因的表达水平变化来筛选人CB2受体的激动剂。并对加入激动剂的浓度和作用时间进行优化及考察模型的稳定性。结果:给予10μmol/L JWH-015 6 h后能取得最大相对诱导率。成功建立CB2受体激动剂的高通量筛选模型,筛选模型Z’因子为0.81,表现为良好的稳定性。结论:成功地建立了CB2受体激动剂的筛选模型,为从中药中高通量筛选有效物质奠定了良好的基础。 相似文献
3.
目的:探讨妊娠期糖尿病患者胎盘组织11β-HSD1和11β-HSD2表达的分子机理。方法:选择正常胎盘组织体外给予游离脂肪酸(PA)组、地塞米松(DEX)组、胰岛素(INS)组以及3种混合液(MIX)组刺激24h后,检测11β-HSD1和11β-HSD2基因和蛋白水平。结果:与基础状态相比,PA组、DEX组、INS组、MIX组胎盘组织中11β-HSD1mRNA的表达均降低(1.00±0.01、0.54±0.03、0.63±0.10、0.42±0.04、0.61±0.07,P0.05),11β-HSD2mRNA的表达均升高(1.00±0.01、1.46±0.12、1.48±0.13、1.53±0.08、1.93±0.09,P0.05);11β-HSD1蛋白水平表达均降低(0.99±0.01、0.43±0.05、0.18±0.02、0.71±0.09、0.54±0.06,P0.05),11β-HSD2蛋白水平表达均提高(1.04±0.04、2.27±0.16、4.10±0.98、3.10±0.39、3.98±0.32,P0.05)。结论:高脂血症、高皮质醇、高胰岛素可以作为独立因素调节胎盘组织中11β-HSDs的表达,妊娠期糖尿病患者高脂血症、高皮质醇血症、高胰岛素血症可能是引起11β-HSDs调控变化的分子机理。 相似文献
4.
Efflux transport of[~3H]GABA across blood-brain barrier after cerebral ischemia-reperfusion in rats 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究脑缺血/再灌后[3H]GABA通过大鼠血脑屏障的外排转运是否增强及其机制.方法:将[3H]GABA或GABA(或丙磺舒)与其联合注射到缺血/再灌大鼠大脑皮层顶二区后,测定[3H]GABA的脑外排指数(BEI)及iv依文思蓝(EB)后EB的脑摄取量.结果:10min缺血/再灌30min、2h、6h和24h大鼠的BEI分别为67%,83%,92%和87%,显著高于对照值(58%),EB脑摄取量也显著增加;GABA或丙磺舒明显降低正常及再灌6h大鼠的BEI,但对再灌5min大鼠的BEI无明显影响.结论:大鼠脑缺血/再灌后[3H]GABA通过血脑屏障的外排转运显著增强. 相似文献
5.
6.
目的 研究妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者胎盘组织中脂联素(adiponectin,APN)及其受体(Adipo R)与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)、白介素-6(IL-6)变化关系.方法 GDM和糖耐量正常孕妇(CON)各20例,采用全自动生化分析仪检测... 相似文献
7.
目的通过早期营养过剩建立肥胖小鼠模型,探讨肥胖对哮喘小鼠肺部炎症及气道反应性的影响。方法采用小窝喂养的方法建立早期营养过剩肥胖小鼠模型,实验组采用鸡卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏及雾化吸入激发的方法建立哮喘模型,对照组采用等量生理盐水腹腔注射及雾化吸入,分组为肥胖哮喘组、单纯哮喘组、单纯肥胖组和正常对照组。最后一次激发后行肺功能测定检测肥胖对哮喘气道反应性的影响,行肺泡灌洗术分析灌洗液中炎症细胞总数和分类、肺组织HE染色检测肥胖对哮喘炎症的影响。结果 1)哮喘小鼠气道反应性明显高于对照组,肥胖哮喘小鼠较单纯肥胖组和哮喘组小鼠气道反应性明显升高(P均0.05)。2)与哮喘组和肥胖组相比,肥胖哮喘组灌洗液炎症细胞总数和分类炎症细胞明显升高(P均0.05),与对照组相比,单纯肥胖组炎症细胞总数和巨噬细胞增多(P均0.05),其他炎症细胞无差异(P均0.05)。3)与肥胖组相比,肥胖哮喘组支气管周围和肺泡间隙炎症细胞明显增多(P均0.05),与哮喘组相比,仅表现为支气管周围炎症细胞增多(P0.05)。结论早期营养过剩诱导的肥胖小鼠可明显增加哮喘小鼠气道反应性及肺组织炎症。 相似文献
8.
目的:探讨噻唑烷二酮类(thiazolidinediones,TZDs)新型衍生物CMHX003在3T3-L1细胞中的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)部分激动活性及促进脂肪细胞分化的作用。方法:用双荧光素酶报告基因检测方法测定HEK293细胞中对照组、CHMX003(1 μmol/L)、CHMX003(10 μmol/L)和罗格列酮(rosiglitazone,Rosi)(10 μmol/L)对PPARγ的激动活性。采用经典鸡尾酒诱导法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,诱导过程中分别加入CHMX003(1 μmol/L)、CHMX003(10 μmol/L)和Rosi(10 μmol/L)处理,诱导分化第7天,用油红O染色观察细胞分化情况,real-time PCR检测细胞脂联素和脂肪酸结合蛋白(aP2)基因mRNA表达水平;ELISA法测定细胞培养上清液中脂联素水平。结果:CMHX003对PPARγ的激动活性低于Rosi(2.46±0.08,3.31±0.15,F=132.19,P=0.008);CMHX003促进3T3-L1前脂肪细胞分化及细胞内脂质沉积的作用较Rosi弱;而增强脂联素基因表达(59.41±3.01,107.91±16.49,χ2=9.031,P=0.112)及增加脂联素分泌水平(74.61±16.94,140.07±30.67,χ2=9.051,P=0.135)的作用和Rosi相似,且较少增强aP2基因的表达(3.07±1.86,75.95±26.04, χ2=8.868,P=0.049)。结论:新型TZDs 衍生物CMHX003具有PPARγ部分激动活性,有望成为安全有效治疗2型糖尿病和代谢紊乱的新型药物。 相似文献
9.
目的:探讨雌激素替代治疗(estrogen replacement treatment,ERT)对卵巢切除(ovariectomy,OVX)大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘的影响。方法:对10~11月龄的雌性SD大鼠进行双侧卵巢切除术,术后1月将成功切除卵巢的大鼠随机分为安慰剂对照组(OVX+O组)和雌激素替代治疗组(OVX+E组),前者给予连续4周安慰剂(芝麻油)处理,后者给予连续4周17β-雌二醇替代治疗,4周后采用Morris水迷宫对2组大鼠的空间学习能力进行测试,用化学发光法测定2组大鼠体内循环雌激素浓度,用透射电子显微镜和体视学方法对两组大鼠海马CA1区有髓神经纤维及其髓鞘进行定量研究。结果:OVX+E组大鼠体内循环雌激素浓度明显高于OVX+O组(t=5.688,P=0.000);OVX+E组大鼠空间学习能力明显提高(F=9.645,P=0.006)。2组大鼠CA1区体积(t=1.451,P=0.181)、有髓神经纤维体积(t=-1.158,P=0.294)、有髓神经纤维髓鞘体积(u=-0.642,P=0.521)、有髓神经纤维平均直径(t=0.630,P=0.545)和有髓神经纤维髓鞘厚度(u=-1.746,P=0.081)均不存在统计学差异,但是OVX+E组直径在0.6~0.7 μm的有髓神经纤维髓鞘厚度比OVX+O组大鼠增加14.1%(t=2.428,P=0.038),OVX+E组直径在0.8~0.9 μm的有髓神经纤维直径与轴突直径差比OVX+O组大鼠增加18.2%(t=2.432,P=0.038)。结论:短期雌激素替代治疗可以改善大鼠空间学习能力并对海马CA1区有髓神经纤维髓鞘具有保护作用。 相似文献
10.
代谢编程是指在人类和其他哺乳类动物胚胎期及分娩后各重要器官发育成熟的关键阶段.营养及其他环境因素能改变生物体内的表观遗传特征,从而影响这些器官的正常发育和成熟,使其在器官发育、物质代谢、免疫应激等方面发生相应改变,最终导致功能和代谢的永久改变,增加成年后多种慢性疾病发病的易感性.由于代谢编程异常的不利结局存在于两代人中间,并可能在"亲代—子代—亲代"之间形成恶性循环,所以其影响巨大,严重威胁几代人的健康,已成为全世界主要的健康与经济负担.肖晓秋研究团队多年来一直致力于打破这种恶性循环,本文就课题组已取得的研究进展进行工作综述,力图为从源头上控制代谢性疾病的发生和发展提供新的依据. 相似文献