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目的 运用转录组测序及生物信息学技术,探讨镉通过调控微小RNA(microRNA, miRNA)引起小鼠睾丸间质细胞(TM3)毒性的机制。方法 选取TM3为细胞模型,分为对照组(不予镉处理)和镉染毒组(20μmol/L CdCl2),24 h后收获细胞提取总RNA,通过RNA质量检测后上机执行测序程序得到miRNA的表达谱。以差异倍数(fold change, FC)>2,P<0.05作为标准筛选显著差异表达miRNA,并采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)对差异表达miRNA进行验证。同时,利用miRanda软件预测其靶基因,构建miRNA-靶基因互作网络并对靶基因进行基因本体学(gene ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)功能富集分析。结果 筛选出镉致TM3细胞毒性相关的26个显著差异表达miRNA,其中19个显著上调,7个显著下调。qRT-PCR对其中3个差异miRNA进行表达... 相似文献
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