抗乙肝病毒核心抗体抗独特型抗体的研究 Ⅱ.制备抗人HBcAb的抗独特型抗体的探讨

为了研究抗独特型抗体对乙型肝炎免疫反应的调节作用,我们用人的多克隆抗HBc作为免疫原,制备单克隆抗独特型抗体(抗-Id)。将人HBcAb用亲和层析纯化,并经SPA-Sepharose 4B柱提取Fac片段。用4株抗正常人IgG的单克隆抗体与人HBcAb复合,制成免疫复合物,再用作免疫原,采用3种不同的免疫方案,除了采用国内外公认的抗原-抗体结合抑制试验检测外,还做     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,其脾细胞与Sp 2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞株(HE_(20)IB_8、HE_(21)IIG_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2～6.4×10~6。因相捕捉HBeAg、HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂中的包被抗体配合人抗HBe-HRP与Abbott试剂结果非常一致。     

匹多莫德对反复呼吸道感染患儿免疫功能及临床疗效的影响

目的 探讨匹多莫得辅助治疗小儿呼吸道反复感染的临床疗效及其对患儿免疫功能的影响。方法 选择广元市妇幼保健院2013年8月—2016年1月收治的呼吸道反复感染患儿150例,随机分为2组,每组75例,对照组患儿接受常规抗生素治疗,治疗组患儿在对照组治疗基础上加用匹多莫得治疗,持续治疗2个月,治疗结束后随访4个月,比较两组患儿治疗期间临床症状以及机体免疫功能的变化,同时比较随访期间两组患儿的临床疗效。结果 治疗后,治疗组患儿咳嗽、发热、扁桃体发炎以及肺部哮鸣音消失的时间显著短于对照组（P＜0.05）。治疗后,两组患儿血清免疫球蛋白水平较治疗前有所升高（P＜0.05）,其中治疗组患儿升高更为明显,与对照组比较具有统计学意义（P＜0.05）;治疗后两组患儿T细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺以及NK细胞相对活性都明显升高（P＜0.05）,且CD4+/CD8+相对含量同样升高（P＜0.05）,同时比较两组患儿治疗后各细胞水平,统计结果表明治疗组患儿改善情况更为明显（P＜0.05）。治疗后,治疗组患儿治疗总有效率显著高于对照组（P＜0.05）,且治疗组患儿随访期间感染复发的次数显著少于对照组（P＜0.05）,且复发持续时间明显较短（P＜0.05）。结论 匹多莫得联合抗菌药物治疗小儿呼吸道反复感染效果显著,有效改善机体免疫功能,减少感染复发次数,值得临床推广应用。     

抗HBV PreS2单链噬菌体抗体基因在噬菌体载体中的克隆及初步表达

本文利用基因工程技术,在成功构建抗HBV PreS2 3B9mAb单链可变区抗体(ScFV)基因的基础上,在389 ScFv基因中引入限制性内切酶位点,克隆的噬菌体表达载体pCANTAB5噬菌粒中。经转染TG1     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,取该鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞系(HE_(20)1B_8,HE_(21)2C_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2×6.4×10~6。因相捕捉HBeAg,HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验均证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂包被抗体,配合人抗HBe-HRP,结果与Abbott试剂非常一致。     

单克隆抗-HBc抗体亲和层析纯化大肠杆菌合成的HBcAg转化为HBeAg的研究

本文报道了用单克隆抗-HBc抗体亲和层析柱大量纯化大肠杆菌合成的HBcAg。经单克隆抗-HBc抗体亲和层析柱一步纯化的HBcAg,它的比活性从94·12单位/mg蛋白提高到12851.40单位/mg蛋白,提高了136.54倍。纯化的HBcAg紫外光谱分析证明是单一的蛋白成分。免疫电镜观察结果证明,纯化的大肠杆菌来源的乙肝病毒核心抗原相似于肝脏来源的乙肝病毒核心抗原的典型形态和大小。 亲和层析纯化的E-HBcAg,用SDS和2-巯基乙醇处理后,纯化的E-HBcAg转化为E-HBeAg。转化的E-HBeAg能被抗-HBe抗体特异性地完全中和。而不被抗-HAV、抗-HBs、正常人血清、小牛血清中和。但是,它能部分的被纯-HBc抗体中和。     

抗乙肝病毒核心抗体的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

用单克隆抗体HBc免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选到1C12、2G12两株分泌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株,经鉴定属于IgG2a亚类。经ELISA独特型结合试验,抗原—抗体结合抑制试验进行鉴定,证实为抗乙肝病毒核心     

一种新的、敏感的检测HBsAg方法-嵌合抗体红细胞免疫技术的建立及初步应用(一)

近年来,随着生物检验技术及单克隆抗体的进展,建立了各种检测HBsAg的方法,其中酶联免疫吸附试验(ELISA)的敏感性已接近放射免疫试验(RIA)。但由于酶和底物易受环境因素如温度、条件等影响,ELlSA的不稳定性和局限性较大。而且传统的血凝方法和补体方法等敏感性又较低,因此需要建立一种既敏感特异又简便快速的免疫学方法,以弥补     

应用原位杂交技术检测人肝组织中输血传播病毒核酸

目的　探讨输血传播病毒 (transfusiontransmittedvirus,TTV)在人肝组织中的分布状况及其意义。方法　采用地高辛标记探针 ,对肝组织中的TTV基因进行原位杂交定位检测。结果　原位杂交染色阳性者为细胞核团块状。 5例正常人中有 1例阳性 ,5例乙型肝炎患者有 3例阳性 ,4例丙型肝炎患者有 2例阳性 ,3例戊型肝炎患者有 1例阳性。结论　TTV可感染肝细胞并在肝细胞核内复制。正常人及不同型肝炎病人的肝细胞内均可感染TTV。     

2007年萍乡市甲乙类传染病监测分析

目的了解萍乡市甲乙类传染病特征,为政府制定传染病防治对策提供依据。方法对2007年萍乡市法定传染病报告系统常规疫情资料进行分析。结果2007年萍乡市共报告16种乙类传染病6814例,发病率371.46/10万,无甲类传染病报告;传染病构成以血源及性传播疾病为主;发病前五位疾病较上年度无明显变化,仍然是病毒性肝炎、肺结核、梅毒、痢疾、淋病;艾滋病已成为萍乡市传染病死亡的首位死因。结论预防控制血源及性传播疾病是今后防治工作的重点和难点,应加强病毒性肝炎、肺结核、梅毒、细菌性痢疾、淋病的监控力度,进一步抓好艾滋病防治工作,加快艾滋病救治体系建设。