结缔组织生长因子在血管新生中作用的研究进展

结缔组织生长因子(CTGF)是CCN家族的成员,可以促进内皮细胞生长、迁移、粘附和存活,在调控内皮细胞功能和促进血管新生中具有重要作用。CTGF可促进其他血管新生分子(如bFGF、VEGF)以及与细胞外基质完整性和稳定性相关分子(如胶原、MMPs、TIMPs)的表达或活性,通过直接或间接作用机制在多个环节上调控血管新生,并有望成为抗肿瘤血管新生的新靶向因子。     

Sonic Hedgehog在血管新生中的作用

Sonic Hedgehog介导的信号传导通路是血管生成中一个重要调节环节,可调控血管直径加粗、变长和分叉,影响基质细胞分泌众多的血管新生因子以及动脉血管的发生。Sonic Hedgehog可能通过3种机制(COUP-TF Ⅱ、SHH／GLI／SMO、P13K通路)调控血管生成,并有望成为血管新生研究的新靶向因子。     

淫羊藿甙对巨噬细胞iNOS和TNF-αmRNA的影响

目的淫羊藿甙(icariin,ICA)和脂多糖(LPS)共同作用于培养小鼠巨噬细胞(Mψ)后,观察其对Mψ中iNOS和TNF-αmRNA影响.方法培养小鼠腹腔Mψ分为5组,分别为正常对照组、LPS模型组(10mg/L)、ICA3种剂量作用组(ICA1.0;0.1;0.01μg/ml与LPS同时孵育).分别作用培养4h后留取细胞和培养上清,用RT-PGR法测定Mψ中TNF-α和iNOSmRNA的基因表达情况.放射免疫法测细胞培养上清中TNF-α的含量.硝酸还原酶法测定细胞培养上清中NO的含量.结果Mψ加LPS培养后吞噬中性红的能力减弱(P＜0.05);ICA作用组细胞吞噬能力增强,并呈剂量依赖关系.LPS模型组中TNF-α基因表达和iNOSmRNA均增加,NO含量升高(P＜0.05);加用ICA与LPS共同培养后TNF-α基因表达下降、iNOS表达和NO明显降低(P＜0.05),并呈剂量效依赖关系.结论ICA可增强培养Mψ的吞噬功能,并可降低TNF-α、iNOS的表达.     

hCTGF基因真核表达载体的构建及在HUVECs中的表达鉴定

目的 构建人结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体，并在哺乳类细胞人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中获得表达。从而为进一步研究CTGF基因在血管新生的作用打下基础。方法 根据人CTGF基因的cDNA序列，设计合成一对5′端分别含有Xba Ⅰ和HindⅢ酶切位点的特异性引物，运用RT-PCR方法扩增JIVECs中CTGF，回收PCR产物，并将其连接至克隆载体PIM-18中，重组的PUMT-18在大肠杆茵DH5α内扩增后，经质粒提取、XbaⅠ和HinsⅢ酶切，筛选出阳性重组子，并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有CTGFcDNA全长的酶切片段，然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3．1(-)连接，重组质粒经XbaⅠ和HindⅢ酶切予以鉴定。并将其转染到HUVECs中，Western blotting法证实其表达。结果 RT-PCR产物含有CTGFcDNA，基因测序显示重组的PUMT-18中含有正确的人CTGFcDNA全长编码序列，重组的pcDNA3．1(-)含有人CTGFcDNA全长编码序列，Western blotting证实重组的真核表达载体在人脐静脉内皮细胞成功转染并表达。结论 成功构建人结缔组织生长因子CTGF基因的真核表达载体。     

高龄产妇不良妊娠结局及影响因素研究

目的 探讨高龄产妇不良妊娠结局及影响因素。方法 选取512例≥35周岁产妇为高龄组,512例<35周岁产妇为适龄组,比较两组的不良妊娠结局发生率,分析不良妊娠结局发生的影响因素。结果 高龄组的不良妊娠结局发生率为28.52%,高于适龄组的15.63%(P <0.05)。单因素和Logistic回归分析显示,年龄、流产史、被动吸烟、妊娠并发症、妊娠合并症、多胎妊娠为不良妊娠结局的影响因素(P <0.05)。结论 高龄产妇的不良妊娠结局发生率高于适龄产妇,年龄、流产史、被动吸烟、妊娠并发症、妊娠合并症、多胎妊娠是不良妊娠结局的影响因素。     

绿原酸对脂多糖诱导的巨噬细胞的影响

目的 研究绿原酸(CHA)对小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB表达的影响。方法 巨噬细胞分别用脂多糖(LPS)作用和LPS加CHA共同作用。以流式细胞术检测细胞NF-κBp65表达率，并分别测定培养上清中NO含量和GSH-Px活陛。结果 LPS作用2h后．NF-κBp65表达率升高，并持续至4h，LPS与CHA共同作用后，其表达率明显下降。NO含量在用LPS作用6h后仍持续上升．加CHA作用后明显下降。GSH-Px活性在LPS作用6h后仍持续降低．加CHA作用后明显升高。结论 绿原酸的抗炎机理之一可能是通过降低NF-κBp65的水平来抑制NO的表达，另外也可能与抗氧化酶的活性增加有关。