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目的 将叠氮溴化乙锭 (ethidium monoazide bromide,EMA)与PCR技术相结合,建立一种有效、快速检测活肠出血性大肠杆菌O157∶H7的方法。方法 以rfbE为PCR检测靶基因,O157∶H7培养物经EMA处理后制备模板进行PCR检测,并对EMA使用浓度、作用时间等进行优化。结果 不抑制O157∶H7活菌PCR扩增的最大EMA浓度为10 μg/mL;抑制2×107 CFU/mL死菌PCR反应的最小EMA浓度为0.5 μg/mL;该法对O157∶H7检测的灵敏度为2×104 CFU/mL,结果显示能检出混合体系中含有的1%的活菌。结论 EMA-PCR技术能有效检测活的O157∶H7,在突发公共卫生事件的快速检测中具有良好的应用前景。 相似文献
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目的 建立简便有效的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)总RNA提取方法。 方法 采用5种方法,分别为160、240和400 W超声波联合Trizol法(简称“160 W超声法”、“240 W超声法”和“400 W超声法”)、玻璃珠(简称“玻珠”)联合Trizol法(简称“玻珠法”)和Trizol法(简称“不加玻珠法”),对结核分枝杆菌标准株H37Rv进行破壁,提取总RNA。通过荧光定量逆转录PCR评价不同破壁方法对Mtb总RNA提取效果的影响,以灭菌超纯水代替模板为阴性对照。每种方法分别提取3份样本进行检测。最后结果为3份标本的平均值。 结果 玻珠法检测组Ct值为20.67,△Rn值为0.644;400 W超声法检测组Ct值为22.09,△Rn值为0.571;240 W超声法检测组Ct值为21.86,△Rn值为0.503;160 W超声法检测组Ct值为25.21,△Rn值为0.411;不加玻珠法检测组Ct值为28.40,△Rn值为0.299;阴性对照Ct值为40.00,△Rn值为0.000。 结论 直观地从试验结果来看,玻珠法对结核分枝杆菌破壁效果好于超声法。 相似文献
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新型冠状病毒感染的肺炎(简称“新冠肺炎”)疫情对高校公共卫生工作提出了新的挑战。本文分析了高校新冠肺炎疫情的防控特点,并总结某高校发生新冠肺炎疫情后高校医疗机构的防控实践经验,得到以下启示:重视高校医疗机构专业队伍建设;健康教育内容要新颖,形式要多样;提早启动心理干预;加强与所在地的卫生行政部门、疾病预防控制机构、上级医疗机构(定点医院发热门诊)的沟通合作等,以冀对今后类似突发公共卫生事件的防控工作提供参考。 相似文献
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