微量随机尿液中多种氨基酸和有机酸定量方法及其在维生素B12营养状况及相关代谢的初步应用

目的 建立一种高效液相色谱-串联质谱同时定量微量随机尿液中多种氨基酸和有机酸的方法。方法 10μl随机尿液样本经乙腈沉淀蛋白后使用饱和的盐酸正丁醇进行衍生化,衍生后的样本经ACE Excel 2 AQ(50×2.1 mm, 2μm)色谱柱分离,采用电喷雾离子源,在正离子扫描和多反应监测模式下检测。参照现有指南,从灵敏度、特异性、准确度、精密度、回收率、基质效应、稳定性等方面完成系统方法学确证。并检测70例健康儿童、27例维生素B12可疑缺乏儿童及3例甲基丙二酸血症cblC型患儿尿液中的19种目标待测物。结果 19种目标待测物定量下限为0.01～1.00μmol/L,标准曲线线性良好,R²均>0.990。准确度良好(相对误差均<±15%),日内、日间精密度均<15%。分析时间为8 min,除精氨酸外,其余待测物未见明显基质效应,加标回收率为80.20%～114.97%,室温8 h和3个冻融循环稳定性良好。健康儿童尿液中目标待测物测定值在Labcorp实验室公布的儿童参考区间内,维生素B12可疑缺乏儿童尿液中甲基丙二酸(P=0.030)和同型半胱氨酸...     

应用末梢全血干血斑评估学龄前儿童维生素A营养状况的可靠性研究

目的 评估应用末梢全血干血斑(DBS)诊断边缘性维生素A(VA)缺乏(MVAD)的可靠性，为临床科学评估VA营养状况提供参考依据。方法 2018年选择130名赵县地区2～7岁儿童，采集末梢全血制备干血斑，其中48名儿童同时采集静脉血浆。采用超高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测两种生物基质中视黄醇水平。应用两种校正方法将干血斑视黄醇转化为其同源血浆中视黄醇水平。采用组内相关系数(ICC)和Bland-Altman评估转换后视黄醇水平与血浆视黄醇水平的一致性。应用敏感性、特异性、准确性指数(AI)、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)评估DBS诊断MVAD的可靠性。结果 DBS视黄醇经两种方法校正后与同源血浆中水平一致性良好，ICC值均大于0.8,其中系数校正后的等效血浆视黄醇更接近血浆真实值。应用系数校正后DBS视黄醇分析目标人群MVAD患病率为45.00%,与血浆视黄醇诊断的MVAD患病率一致(45.83%),系数校正后DBS视黄醇诊断MVAD的灵敏度及特异性分别为77.78%,81.82%,AI为80.00%,PPV为77.78%,NPV为81.82%。赵县1...