干细胞来源的外泌体影响子宫内膜蜕膜化的研究进展

<正>在现代生活中,不孕不育是影响个体生理和心理的主要问题之一。解剖学、生理学及遗传学因素皆可能导致个体不孕。滋养外胚层和子宫内膜上皮之间的细胞通讯是胚胎成功植入的关键,最终确立妊娠。子宫内膜蜕膜化在胚胎着床和妊娠中起着重要作用,因不孕而进行试管婴儿治疗的患者最关心的均是妊娠率问题。影响试管婴儿妊娠率的因素有很多,其中一个重要原因就是蜕膜化是否存在缺陷。干细胞来源的外泌体提高和恢复受损组织的正常功能进而提高蜕膜化水平,     

CEA 迷你基因串联体疫苗的体内抗肿瘤活性观察

目的:观察已构建的含有CEA625-667 基因单倍体疫苗pcDNA-CEA625-667 及三串联体的DNA 疫苗pcDNA-triCEA625-667 对荷瘤小鼠体内肿瘤的抑制情况及小鼠存活时间的改变。方法:建立小鼠肝细胞癌实验动物模型,应用单倍体疫苗pcDNA-CEA625-667 及三串联体DNA 疫苗pcDNA-triCEA625-667 免疫小鼠,以生理盐水为对照组,观察各实验组小鼠皮下肿瘤生长情况,记录皮下肿瘤生长曲线,观察疫苗对荷瘤小鼠肿瘤生长速度的影响以及疫苗对荷瘤小鼠生存时间的影响。结果:与生理盐水对照组相比,两种疫苗均能明显抑制CEA 阳性荷瘤小鼠的肿瘤体积以及生长速度(P <0.01),其中,pcDNA-triCEA625-667 疫苗组的抑制作用明显优于pcDNA-CEA625-667 疫苗组(P<0.01),而二者均不能抑制CEA 阴性荷瘤小鼠的肿瘤生长。pcDNA-CEA625-667 疫苗组平均生存时间为(48.50±6.73)d,与生理盐水对照组(39.00±6.64)d 相比有显著差异(P<0.01);pcDNA-triCEA625-667 疫苗组生存时间(48.50依6.73)d 明显高于生理盐水对照组和pcDNA-CEA625-667 疫苗组(P<0.01)。两组疫苗均不能延长CEA 阴性荷瘤小鼠的生存时间。结论:无论是单倍体还是三串联体的DNA 疫苗,均能够明显抑制CEA 阳性荷瘤小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长其生存时间(P<0.01),而对CEA 阴性荷瘤小鼠则无治疗作用。     

应用rmIL-18 诱导肿瘤特异性CTL 治疗肝癌的实验研究

目的:研究rmIL-18 在体外培养系统(Coculture system in vitro,CCs)诱导肿瘤特异性细胞毒性T 淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)及在小鼠体内发挥的抗肝癌效果。方法:采用Stem SepTM 免疫磁性细胞分离方法分离培养小鼠脾脏NK 细胞、T 细胞及DCs,建立体外培养系统;采用不同途径,不同剂量CTL 免疫肝细胞癌荷瘤小鼠,研究CTL 对荷瘤小鼠肿瘤生长速度和生存时间的影响。结果:rmIL-18 能够在体外培养系统中诱导并促进CTL 介导的肿瘤特异性杀伤效应;CTL能够明显抑制荷肝癌小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长荷瘤小鼠生存时间(P<0.01),并且这种作用随rmIL-18 浓度的增加而增强(P<0.01),且肿瘤内注射均优于腹腔内注射(P<0.01)。结论:rmIL-18 可以在体外诱导肿瘤特异性CTL 并在小鼠体内发挥抗肝癌作用。     

p21 蛋白激活激酶4 在乳腺癌上皮间质转化中的作用研究

目的:探讨p21 蛋白激活激酶4(PAK4)在乳腺癌细胞上皮间质转化中的作用。方法:在乳腺癌MCF7 细胞中超表达PAK4,而在乳腺癌MDA-MB-231 细胞中干扰PAK4 表达,通过迁移和侵袭实验检测其对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响,荧光定量法和免疫印迹分析检测PAK4、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin mRNA 和蛋白质表达量变化,免疫印迹法检测EMT 相关转录激活因子Snail、Slug 表达量变化。结果:MCF7 细胞超表达PAK4 后,细胞的迁移侵袭能力显著增加,并且上皮标志分子E-Cadherin 蛋白表达下调,而间质标志分子N-Cadherin 和Vimentin 蛋白则表达上调,EMT 相关转录激活因子Slug 表达量增加;MDA鄄MB鄄231 细胞中,抑制内源PAK4 表达能显著降低细胞的迁移侵袭能力,上调E-Cadherin 蛋白表达,下调N-Cadherin、Vimentin 和Slug 蛋白的表达。结论:PAK4 通过上调Slug 促进乳腺癌发生上皮间质转化,可作为抑制乳腺癌转移的分子靶点。     

miR-126 在乳腺癌中与VEGF 表达关系及其抗肿瘤效果

目的:探讨miR-126 与VEGF 在乳腺癌中的表达情况,及miR-126 发挥的抗肿瘤效果。方法:以qRT-PCR 检测和Western blot 分析miR鄄126 与VEGF 在乳腺癌组织和细胞中的表达情况;以miR-126 mimics 转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,检测miR-126 对VEGF 的表达影响,MTT 法和细胞划痕实验验证miR-126 对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响。结果:miR-126 在乳腺癌组织和细胞中呈低表达,VEGF 表达与其呈负相关,上调miR-126 可以降低VEGF 的表达,抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力。结论:miR-126 可以通过下调VEGF 表达来实现降低乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,从而发挥抗肿瘤效果。     

重组鼠白细胞介素18在肝癌小鼠体内的抗肿瘤作用

目的：探讨不同剂量和输注方式的重组鼠白细胞介素18（rmIL-18）对肝癌小鼠生存时间和肿瘤生长的影响,阐明rmIL-18在体内抗肿瘤的合理应用方式。方法：60只Babl/C小鼠皮下接种小鼠肝癌H22细胞（1×10⁶个）,随机分为5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组、细胞毒性T淋巴细胞（CTL）腹腔内注射治疗组、CTL肿瘤内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组,每组10只。从接种肿瘤细胞的第10天起,各rmIL-18组小鼠每隔1d进行对应剂量和方式的注射治疗,CTL组小鼠分别腹腔和肿瘤内注射肿瘤特异性CTL（1×10⁶/只）,生理盐水腹腔注射对照组小鼠腹腔内注射注射等体积（100μL）生理盐水,共计10次。每周测量小鼠肿瘤直径,并记录生存时间。结果：与0.5μg、5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组比较,0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度减慢（P<0.01）,小鼠生存时间延长（P<0.01）;与0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组比较,CTL腹腔内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低（P<0.01）,小鼠存活率升高（P<0.01）;与0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组比较,CTL肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低（P <0.01）,小鼠存活率升高（P <0.01）。结论：rmIL-18抗肿瘤作用的最好途径为瘤内注射,并存在剂量依赖性。     

miR-100靶基因BAZ2A在肝癌迁移侵袭中的机制研究

目的:探讨miR-100和BAZ2A基因在肝癌细胞中的表达及对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响。方法:以qRT-PCR检测和Western blot分析miR-100与BAZ2A在肝癌细胞中的表达情况;以miR-100 mimics转染肝癌细胞SMMC-7721,检测miR-100对BAZ2A表达的影响,细胞划痕实验和Transwell小室实验验证miR-100对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响。结果:miR-100在肝癌细胞中呈低表达,BAZ2A表达与其呈负相关,上调miR-100可以降低BAZ2A的表达,抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力。结论:miR-100可以通过抑制BAZ2A的表达来降低肝癌细胞的迁移侵袭能力,达到抗肿瘤的效果。     

褪黑素对过氧化氢诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧化应激的改善作用及其机制

目的:研究褪黑素对过氧化氢(H2O2)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)氧化应激损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法:体外培养SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞分为对照组、H2O2组、不同浓度褪黑素组和2-苯基-N-乙酰色胺(Luzindole)组.对照组为正常培养SH-SY5Y细胞,H2O2组加入...     

人脐带间充质干细胞培养上清对米非司酮处理的人子宫内膜基质细胞存活、凋亡和子宫内膜容受性的影响

目的：探讨人脐带间充质干细胞培养上清（hUCMSCs-Sup）对米非司酮（Ms）处理的人子宫内膜基质细胞（hEndoSCs）增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组,MTT法检测各组细胞存活率。hEndoSCs分为对照组、40μmol·L-1 Ms组和60μmol·L-1 Ms组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值。hUCMSCs-Sup作用后,hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组,MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ（LC3B-Ⅱ）和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ（LC3B-Ⅰ）蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值,实时荧光定量P...     

基于乳酸代谢基因的肺腺癌预后模型的建立和评价

目的：探讨肺腺癌（LUAD）组织中乳酸代谢相关基因以及基于乳酸代谢基因构建LUAD预后评分模型,阐明其预测LUAD预后的能力。方法：采用癌症基因图谱（TCGA）数据库筛选LUAD相关乳酸代谢基因。采用单因素和多因素Cox回归及LASSO回归分析获得关键基因并构建LUAD的乳酸代谢评分模型,采用Kaplan-Meier生存分析和受试者工作特征（ROC）曲线对模型的预测能力进行验证,TIMER法评估该模型与患者临床特征和免疫细胞浸润丰度之间的关系。结果：成功筛选出16个乳酸代谢基因并构建评分模型;生存分析,低风险组患者的总生存时间（OS）明显高于高风险组（P<0.01）,且有较高的预测预后能力,ROC曲线下面积（AUC）均高于0.7;多因素Cox回归分析,23个乳酸代谢基因是LUAD患者的独立的预后基因;乳酸评分与B淋巴细胞（r=-0.326,P<0.001）、CD4 T淋巴细胞（r=-0.196,P<0.001）、CD8 T淋巴细胞（r=-0.094,P=0.036）、巨噬细胞（r=-0.198,P<0.001）和树突状细胞（r=-0.119,P=0.008）百分...