慢病毒介导shRNA质粒TRPV2和TRPV4基因双沉默模式在大鼠脊柱侧弯模型椎间盘退变中的实验研究

目的探究慢病毒介导shRNA质粒TRPV2和TRPV4基因双沉默模式在大鼠脊柱侧弯模型椎间盘退变中的作用。方法本研究采用经典的双足大鼠脊柱侧弯模型构建的方法。根据siRNA干扰原理,构建shRNA-TRPV2和shRNA-TRPV4干扰载体,根据实验目的将SD大鼠分成4组,即模型组,shRNA-TRPV2组,shRNA-TRPV4组和双基因沉默组。利用X射线对上述动物模型进行摄片,利用Masson染色检测成骨组织,利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞活性,利用RT-PCR检测BMP,BGP和ALP的mRNA表达水平。结果 shRNA-TRPV2的慢病毒转染效率较高,为(92.3±2.7)%,shRNA-TRPV4的慢病毒转染效率较高,为(91.5±3.3)%,影像摄片结果显示,双基因沉默组大鼠模型Cobb角度相较于模型组具有明显改善(P0.05)。Masson染色结果显示,双基因沉默组大鼠模型新生成骨组织明显多于模型组(P0.05)。TRAP染色结果显示,双基因沉默组大鼠模型破骨细胞活性及数量明显多于模型组(P0.05)。RT-PCR结果显示,双基因沉默组大鼠模型的BMP-2,BGP和ALP的mRNA相对表达量要明显高于模型组和单基因沉默组(P0.05)。结论 shRNATRPV2和shRNA-TRPV4双基因沉默可以促进骨组织的生成,促进脊柱侧弯动物模型的修复。     

地高辛联合福辛普利治疗老年高血压心力衰竭的疗效观察

目的探讨地高辛片联合福辛普利片治疗老年高血压心力衰竭的临床疗效。方法选取2016年9月—2017年10月武汉市第五医院心内科收治的老年高血压心力衰竭患者82例,依据治疗方法的不同分为对照组和治疗组,每组各41例。对照组口服福辛普利钠片,初始剂量为10 mg/次,依据患者耐受性、血压、心率等情况逐渐增加剂量至40 mg/次,1次/d。治疗组在对照组治疗的基础上口服地高辛片,0.125～0.25 mg/次,1次/d。两组患者均连续治疗30 d。观察两组的临床疗效,比较两组的心功能指标。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为78.05%、92.68%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)显著降低,左心室射血分数(LVEF)显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组心功能指标明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论地高辛片联合福辛普利片治疗老年高血压心力衰竭具有较好的临床疗效,可改善患者心功能指标,安全性较好,具有一定的临床推广应用价值。     

PD98059对离体四氯化碳刺激肝星状细胞周期和细胞内Ca2+浓度影响

目的 探讨特异性有丝分裂原活化蛋白激酶抑制剂PD98059对离体四氯化碳(CCl4)刺激的肝星状细胞(HSC)周期和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响.方法 HSC常规复苏传代培养,同步化后分为空白对照组、CCl4组和CCl4+PD98059(100 μmol/L)组.检测细胞周期以反映细胞增殖情况,用钙离子荧光探针进行荧光染料负载,用激光扫描共聚焦显微镜测定[Ca2+]i.结果 流式细胞结果可见CCl4刺激HSC后,S/G2期细胞增多,G1期细胞减少(P＜0.05),PD98059对这一过程有抑制作用(P＜0.05);激光扫描共聚焦显微镜检测可见CCl4组的[Ca2+]i较空白对照组增强(P＜0.05),CCl4+PD98059组细胞内[Ca2+]i降低(P＜0.05).结论 PD98059可以降低CCl4刺激的HSC中[Ca2+]i,对细胞从静止期进入活动期有抑制作用.     

胺碘酮与普罗帕酮治疗阵发性心房颤动的疗效比较

心房颤动(房颤)是心房呈无序激动和无效收缩的房性节律,是临床最常见的心律失常类型之一.     

PD98059对体外CCl4刺激的肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原纤维表达的影响

目的 探讨特异性MEK抑制剂PD98059对体外肝星状细胞增殖及I型胶原纤维表达的影响.方法 将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃、5％CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为3组:对照组、CCl4组、CCl4+不同剂量PD98059(20、50、100 μmol/L),用透射电镜观察细胞超微结构,MTT比色法检测细胞增殖情况及免疫细胞化学法测定Ⅰ型胶原纤维表达.结果 透射电子显微镜可见PD98059组比CCl4组凋亡细胞显著增多,细胞数目减少;CCl4刺激HSC后,细胞明显增殖(P＜0.05),各剂量组PD98059对细胞增殖均有抑制作用(P＜0.05),抑制率分别为21.84％、38.27％、46.65％;CCl4组HSC中的Ⅰ型胶原表达与对照组比较显著增加(P＜0.05),PD98059明显抑制Ⅰ型胶原表达(P＜0.05).结论 PD98059对CCl4刺激HSC增殖及Ⅰ型胶原的表达具有抑制作用.     

NF-κB在AngⅡ介导THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出及ABCA1表达调控过程中的作用研究

目的：探讨核因子NF-κB活化对AngⅡ诱导的THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1基因表达、胆固醇含量的影响。方法：体外培养THP-1细胞以构建泡沫细胞模型，以AngⅡ和NF-κB活化抑制剂TPCK孵育细胞；以RT-PCR法、Western blot法测定THP-1源泡沫细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达状态；采用酶法，通过荧光分光光度计检测细胞内胆固醇含量，应用液体闪烁技术仪检测胆固醇流出的变化；借助Sandwich ELISA法测定核因子NF-κB活化／核易位情况。结果：AngⅡ可即刻激活NF-κB表达活性，并导致干预24小时后泡沫细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达下调；若预先用TPCK孵育，则TPCK可抑制AngⅡ对NF-κB的激活，且24小时后泡沫细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达下调幅度减小。结论：AngⅡ能引起THP-1源性泡沫细胞胆固醇含量显著增高（P〈0．05）、ABCA1表达显著减少（P〈0．05）。机制可能与AngⅡ即刻激活NF-κB信号途径，早期活化的NF-κB可阻遏THP-1源泡沫细胞ABCA1基因和蛋白的表达，继而影响泡沫细胞内胆固醇的流出有关。     

直接与延迟经皮冠状动脉介入术对急性心肌梗死患者血流动力学、左心室重构的影响比较

目的比较直接与延迟经皮冠状动脉介入术(PCI)对急性心肌梗死患者血流动力学、左心室重构的影响。方法选择2016年1月—2017年6月武汉市第五医院收治的急性心肌梗死患者142例,根据PCI时机分为对照组67例和观察组75例。在常规治疗基础上,对照组患者行延迟PCI,观察组患者行直接PCI。比较两组患者发病后1周、6个月血流动力学指标、左心室重构指标。结果发病后1周两组患者平均左房室瓣压差(m MPG)、肺动脉平均压(m PAP)比较,差异无统计学意义(P0.05);发病后6个月观察组患者m MPG、m PAP低于对照组(P0.05)。发病后1周两组患者左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心房内径(LAD)比较,差异无统计学意义(P0.05);发病后6个月观察组患者LVEDD、LVESD、LAD短于对照组(P0.05)。结论与延迟PCI相比,直接PCI能更有效地改善急性心肌梗死患者血流动力学,抑制左心室重构。