地方医学院校“1234”实验室安全管理模式的构建与实践

针对地方医学院校实验室安全管理的现状及存在的现实问题,构建了一套制度、组织和责任体系,学生、教师两个主体,学校、院(系、部)、实验室三级督查和基础条件、信息技术、教育培训、安全文化四重保障的“1234”实验室安全管理模式,可为相关高校提供有益参考,推动实验室安全管理工作持续发展。     

应用鸡胚活体电转GFP示踪技术观察脊髓左右两侧神经元纤维投射

目的:探索鸡胚发育过程中,脊髓左右侧神经元经纤维之间的联系,为脊髓两侧神经纤维投射提供形态学基础;方法:采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3天,通过活体电转基因,将pCAGGS-GFP质粒0.1～0.5μl准确注射到脊柱,在电压18 V、每次脉冲60 ms,间隔100 ms,电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后6小时开始到10天,分别收集胚胎,甲醛固定冰冻切片,DAPI染细胞核观察组织形态结构变化。结果:电转后6小时便可以观察到GFP的表达,24小时后可以看到GFP标记细胞纤维的投射,3天可以清晰的观察到转入GFP一侧脊髓的运动神经元纤维束投射到另外一侧脊髓。结论:电转GFP成功标记运动神经元纤维在脊髓左右两侧的投射。     

新乡地区居民对甲沟炎认知情况的调查分析

目的了解新乡地区居民对甲沟炎认知情况,为甲沟炎预防提供参考依据。方法以随机抽样的方法在新乡地区抽取500人,采用问卷调查的方式进行现场调查。结果新乡地区居民对甲沟炎的知晓率为48.78%,对甲沟炎发病原因的知晓率仅为10.86%,被动了解甲沟炎和基本不了解甲沟炎的各占25.69%,54.12%。结论人群对甲沟炎的知晓率较低,尤其对甲沟炎的发病原因认知情况了解更少。对甲沟炎的认知情况与调查对象的年龄、文化程度有关。甲沟炎是一种可预防性疾病,我们需要加强对甲沟炎防治知识的宣传,引起人们对甲沟炎的重视,降低甲沟炎的发病率。     

葛根素对高糖诱导HUVEC-12细胞氧化损伤的保护作用

目的研究葛根素对高糖诱导人脐静脉内皮细胞HUVEC-12氧化损伤的保护作用。方法用含100 mmoL/L葡萄糖和10、25、50μmo L/L葛根素的培养基共同孵育HUVEC-12细胞36 h后,测定细胞存活率,细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性,细胞内活性氧(ROS)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平。qPCR检测细胞中SIRT1、PGC-1α mRNA表达,酶联免疫吸附法检测培养液中SIRT1、PGC-1α蛋白含有量。结果葛根素可增加HUVEC-12细胞存活率,抑制细胞LDH释放,清除ROS,降低MDA含有量与Caspase-3活性,增加SOD、CAT活性和GSH含有量。同时,葛根素还能提高SIRT1、PGC-1α mRNA表达及蛋白含有量。结论葛根素能通过激活SIRT1/PGC-1α通路来保护高糖诱导HUVEC-12细胞氧化损伤。     

抗环瓜氨酸肽抗体胶体金定量检测方法的建立

目的  建立一种检测人血清中抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体含量的胶体金定量检测方法。方法  采用间接胶体金技术,对胶体金最佳标记抗体pH、最低标记抗体量、最佳T线包被浓度、金标定量仪最佳读数时间、批内批间精密性、回收率、临床标本检测等研究,建立抗CCP抗体胶体金定量检测方法并评价其性能。结果  实验确定胶体金标记最佳pH及最低标记抗体量为1 ml胶体金溶液中加入0.2 mol/ml 碳酸钾K2CO3 3μl、鼠抗人IgG 8.8μg;T线包被浓度选择CCP-BSA偶联抗体1.5 mg/ml;使用金标定量仪时,最佳读数时间为14 min。性能评价结果显示建立的检测方法线性范围为50～500 RU/ml,R2=0.993;精密性质控品L1批内CV= 2.6%,批间CV=4.52%;精密性质控品L2批内CV=2.5%,批间CV=4.28%;高、中、低值血清的回收率为100.96%、97.17%、91.46%;与国外试剂盒平行检测40份抗CCP抗体临床血清,结果显示两者相关性较好,回归方程：Y=1.004X+7.968,R2=0.955。结论  初步建立一种检测人血清中抗CCP抗体含量的胶体金定量检测方法,该方法具有较高的准确性和精密性。