直接注入式串联质谱法测定氨基酸含量

目的利用直接注入式串联质谱(direct-infusion tandem mass spectrometry,DI-MS/MS)建立一种耗时短、准确度高的同时测定13种氨基酸(amino acids)含量的方法。方法用内标工作液对干血滤纸片中的氨基酸进行提取,取上清液氮气吹干后加入自制的衍生试剂盐酸正丁醇,水浴加热65℃反应20 min,将反应物吹干后用水-乙腈-甲酸(体积比为100∶100∶0.05)的混合溶液复溶,取上清液直接使用串联质谱进行定量分析。使用电喷雾离子源(electrospray ion source,ESI)正离子模式,采用选择性反应监测(selected reaction monitoring,SRM)模式。采用内标法,用峰高加校正因子定量。结果方法的低浓度回收率为85.6%～114.4%、中浓度回收率为92.4%～114.4%、高浓度回收率为88.9%～113.6%,日内和日间变异系数(RSD)分别为2.3%～9.6%、2.5%～10.3%。不同浓度的氨基酸实际浓度与真实浓度之间的相关系数为0.996 1～0.999 7。结论所建立的直接注入式串联质谱法可以同时对干血滤纸片中多种氨基酸进行定量分析。可作为一种与氨基酸代谢相关疾病的检测手段。     

泽兰中迷迭香酸含量测定方法学研究

目的:建立泽兰中迷迭香酸的含量测定方法,为《欧洲药典》泽兰专论的质量标准提供研究数据。方法:采用高效液相色谱法。基于样品提取和色谱条件的优化结果建立迷迭香酸的分析方法,同时对该方法进行系统的方法学验证,包括采用单变量分析(OVAT)进行方法的耐用性研究及按照《欧洲药典》的方法测定该色谱系统的滞留体积。结果:迷迭香酸检测质量浓度线性范围为5.02~60.30μg·m L~(-1)(r=0.999 9);加样回收率为95.5%~101.6%,RSD=2.1%(n=9);重复性、中间精密度、稳定性及耐用性试验的RSD均小于3.0%;该色谱系统滞留体积为2.4 m L。结论:该方法操作简单,重复性、准确度及耐用性良好,可作为泽兰中迷迭香酸的含量测定方法列入《欧洲药典》泽兰专论的质量标准草案。     

西南忍冬化学成分的研究（Ⅰ）

西南忍冬化学成分的研究（Ⅰ）相婷１）吴立军董梅周晓川（沈阳药科大学天然药物化学研究室，沈阳１１００１５）黄岐张伯崇２）（中国人民解放军４６６医院药剂科，北京１０００８１关键词西南忍冬；绿原酸乙酯；核磁共振忍冬属植物西南忍冬（Ｌｏｎｉｃｅｒａｂｏｕｒｎ...     

儿科护患纠纷8起原因分析及对策

随着患者自我保护意识的增强和对医疗保健需求水平的增高,护患纠纷发生率也逐渐上升。儿科2006-01/2008-01护患纠纷8起,针对8例纠纷进行原因分析,并制定相应的对策,效果满意,现报告如下。1临床资料穿刺技术不满意3例,服务态度差、工作责任心不强3例,对收取费用有异议1例,对环境不满意1例。2原因分析2.1患儿及家属方面的因素家长因素:患儿家长过分疼爱孩子,患儿是全家人的掌中宝,一旦生病牵动三代人,全家生活秩序打乱,精神紧张,情绪烦躁,担心患儿生病及打针受罪,一旦穿刺不成功便可引起纠纷和不满。患儿因素:由于疾病影响导致血管虚瘪,多次输液,肥胖等原因都可造成穿刺困难,且大多数患儿表现恐惧心理,不能配合操作,使穿刺成功率下降,或在输液过程中不注意保护,导致针头脱出或药液外渗。观念的改变:随着家长法律、经济意识的增强,对治疗效果和护理人员的要求越来越高,若治疗效果不理想或执行告知制度不严格,达不到家属的心理期望值时,往往把不良情绪发泄到执行操作的护理人员身上。2.2医护人员及医院管理方面业务技术不熟练:由资料看出,此为主要因素,目前患儿家长更注重护理服务的质量,特别对儿科的穿刺技术有更高的要求,而护理队伍的年轻...     

3β-反式对羟基肉桂酰氧基-2α-羟基齐墩果酸的NMR研究

应用1H，13CNMR、HSQC、HMBC等核磁共振技术，对女贞子中的3β-反式对羟基肉桂酰氧基-2α-羟基齐墩果酸的13C，1HNMR信号进行了明确的归属，为该类化合物的结构研究提供了光谱学依据。     

西南忍冬花蕾中的三个新三萜皂苷

从西南忍冬ＬｏｎｉｃｅｒａｂｏｕｒｎｅｉＨｅｍｓｌ花蕾中分离得到三个新的三萜皂苷,通过理化性质和谱学分析(ＭＳ、1ＤＮＭＲ、2ＤＮＭＲ),确定结构分别为3Ｏ[βＤ吡喃葡萄糖基(1→2)βＤ吡喃葡萄糖基]23羟基羽扇豆烷20(29)烯28酸28Ｏ[βＤ吡喃葡萄糖基(1→6)βＤ吡喃葡萄糖]酯,命名为西南忍冬皂苷Ｃ.3Ｏ[βＤ吡喃葡萄糖基(1→2)βＤ吡喃葡萄糖基(1→6)βＤ吡喃葡萄糖基]23羟基羽扇豆烷20(29)烯28酸28ＯβＤ吡喃葡萄糖酯,命名为西南忍冬皂苷Ｄ.3Ｏ[βＤ吡喃葡萄糖基(1→2)βＤ吡喃葡萄糖基]羽扇豆烷20(29)烯28酸28Ｏ[βＤ吡喃葡萄糖基(1…     

中药共线生产的风险评估和清洁验证

多品种共线是药品生产普遍存在的情况,多产品共线的污染、交叉污染控制是药品生产质量管理规范检查中重点关注内容。中药品种间共线生产较普遍,且由于中药成分复杂、作用机制不明确、微量成分定量困难等原因,使中药品种共线生产的风险评估和清洁验证的考量点更复杂。归纳了中药共线生产和清洁验证存在的问题,探讨中药共线生产和清洁验证的主要考量点,并进行了中药共线生产清洁风险评估,以期为中药共线生产提供参考。     

头孢呋辛酯片的制备及其溶出度研究

目的制备头孢呋辛酯片,并与市售头孢呋辛酯片进行体外溶出度比较。方法采用微晶纤维素、交联聚维酮、微粉硅胶压制成头孢呋辛酯片,分别以pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水、0.1mol.L-1盐酸溶液作为溶出介质,用桨法实验,绘制不同溶出介质中的溶出曲线,并计算出相似因子(f2)。结果在4种溶出介质中,自制头孢呋辛酯片和市售头孢呋辛酯片的溶出曲线相似因子(f2)分别为73,68,65和82。结论自制头孢呋辛酯片和市售片的溶出行为一致。     

款冬花欧盟质量标准研究

目的:根据《欧洲草药植物专论研究指导原则》建立款冬花药材的质量标准,主要包括薄层鉴别方法和含量测定方法。方法:薄层鉴别选用款冬酮作为指标成分,以环己烷-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂,展开后喷以硫酸乙醇试液加热显色,置于紫外灯365 nm下检视;含量测定采用YMC-Pack ODS-A色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温:35℃,流速:0.8 mL·min~(-1),检测波长:220 nm。结果:薄层鉴别方法专属性强,主成分条带清晰,辨识度高;含量测定方法学结果表明款冬酮在3.074~153.7μg·mL~(-1)内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.9%(RSD=2.0%),重复性、中间精密度、稳定性及耐用性考察RSD均小于2.0%。结论:本研究中建立的薄层色谱鉴别方法和含量测定方法可准确测定款冬花中款冬酮的含量,为《欧洲药典》款冬花专论提供研究数据。     

LC-MS/MS方法检测血中甲基丙二酸含量及应用分析

目的 建立一种LC-MS/MS方法 测定血清MMA,用于MMA血症的诊断以及治疗效果的监测.方法 收集2009年4-12月205份健康体检者和146份患者血清,用液-液萃取方法 萃取样本,用自制饱和盐酸-正丁醇进行衍生,采用氮气吹干,色谱柱为Discovery C18(50 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇和水(含0.1%甲酸,V/V),梯度洗脱,液相分离后进入串联质谱进行分析测定,选择性反应监测模式,以标准品制作标准曲线,同位素内标法定量,以血清样本测定2、25、80μg/L3个浓度的加样回收率,以质控样本测定准确度、精密度和稳定性.检测205份健康人血清,用于临床验证.数字表法随机抽取13份血清,测定结果 与德国MDI实验室进行比对,用配对t检验分析测定数据.结果 方法 线性范围2～100μg/L,标准曲线相关系数R2＞0.995.MMA衍生物保留时间为10.5 min,在此实验条件下丁二酸与MMA不互相干扰,批内RSD≤6.4%,批间RSD≤5.0%,回收率为96.42%～103.33%,检出限为1 μg/L,分析准确度94.2%～108.2%.样本常温放置至少6 h稳定、-20℃下至少可以存放70 d稳定、冻融10次稳定,衍生物在4 ℃下至少存放5 d稳定.溶血样本组与未溶血样本组测定值中位数(四分位数)分别为102.53(13.84～302.33)μg/L和39.52(11.94～203.08)μg/L,差异有统计学意义(T=8,P＜0.05).本实验室与德国MDI实验室测定结果 中位数(四分位数)分别为32.82(24.50～100.42)μg/L和32.20(26.65～93.30)μg/L,差异无统计学意义(T=7,P＞0.05).健康成年人(18～58岁)158名,血清MMA测定值(18.46±10.49)μg/L,健康未成年人(1～17岁)47名,血清MMA测定值(22.38±11.45)μg/L.结论 成功建立了LC-MS/MS方法 准确测定血清MMA浓度,样本前处理简单,方法 灵敏度高,特异性强,可重复性好,可以用于MMA血症的筛查、诊断和治疗效果的监测.