干细胞移植在治疗视网膜疾病中的应用研究

干细胞移植是指应用自体、异体或者异种干细胞,经体外加工处理后回输或植人体内.干细胞移植在视网膜疾病中的应用尚处于实验动物阶段.本文从胚胎干细胞和成体干细胞等方面介绍干细胞移植在视网膜疾病中的应用情况,结合国内外有关干细胞移植的文献作一综述.     

25G玻璃体切除手术联合玻璃体腔注药治疗糖尿病性玻璃体积血

目的探讨应用25G玻璃体切除手术联合玻璃体腔注药治疗糖尿病性玻璃体积血的效果。方法回顾性病例对照研究。选择行玻璃体切除手术的糖尿病性玻璃体积血患者65例（71眼）,根据患者术前是否行雷珠单抗治疗分为单纯组和联合组,联合组（36眼）术前5 d予玻璃体腔注射雷珠单抗0.5 mg后,再行25G玻璃体切割手术;单纯组（35眼）单纯行25G玻璃体切除手术。对2组患者的手术时间、新生血管出血次数、电凝使用次数、医源性视网膜裂孔发生率等术中指标进行比较;并对比分析术后1周,1、3、6个月2组间的玻璃体积血复发情况,最佳矫正视力（BCVA）、手术后并发症的发生情况。2组间数据比较采用独立样本t检验、卡方检验。结果单纯组和联合组的手术时间分别为（94.5±21.3）min和（65.2±16.2）min（t=-7.005,P＜0.001）,新生血管出血次数分别为（1.8±1.1）次和（0.6±0.6）次（t=-4.686,P=0.001）,电凝使用次数分别为（1.1±0.8）次和（0.4±0.6）次（t=-3.552,P=0.007）,差异均有统计学意义。单纯组的术中医源性视网膜裂孔发生率（13%）高于联合组（4%）（χ2=5.207,P=0.022）,术后1周和1个月玻璃体积血复发率明显高于联合组（χ2=3.92、3.47,P=0.03、0.03）。联合组术后1周及1个月BCVA提高率高于单纯组（χ2=6.27、4.13,P=0.02、0.03）,2组术后视网膜前膜、一过性高眼压以及新生血管性青光眼等并发症的发生率差异无统计学意义。结论25G玻璃体切除手术联合玻璃体腔注药可以减少术中以及术后出血,缩短手术时间,降低玻璃体积血复发率,提高患者的视力。     

阿柏西普与雷珠单抗治疗湿性黄斑变性的效果比较

目的:比较阿柏西普与雷珠单抗玻璃体内注射治疗湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)的临床效果。方法:前瞻性随机对照研究。收集2019年4至6月郑州市第二人民医院湿性AMD 79例(79眼)随机分为两组。阿柏西普组,39例(39眼),玻璃体内注射阿柏西普;雷珠单抗组,40例(40眼),玻璃体内注射雷珠单抗。术后6个月及12个月...     

Caspase抑制剂对兔视神经损伤后闪光视觉诱发电位的影响

目的观察Caspase抑制剂对兔外伤性视神经损伤后闪光视觉诱发电位(F-VEP)的影响。方法中国纯种大耳白兔40只,每组分为1、4、7、10、14d5个亚组,右眼为实验眼,左眼为对照眼。应用液压冲击颅脑损伤仪建立兔视神经损伤模型,实验眼术后30min玻璃体腔注射Caspase抑制剂3μL/kg,对照眼注射同等量的2%二甲基亚砜(DMSO)液。所有眼均进行F-VEP检测。结果与对照眼相比,实验眼F-VEP在术后7、10、14d主波潜伏期明显缩短,振幅明显升高(P<0.05)。结论 Caspase抑制剂能够有效改善F-VEP的潜伏期及振幅。     

外伤性视神经损伤动物模型的建立及F—VEP评价

目的建立视神经损伤和视神经损伤复合晶状体损伤动物模型,了解2种模型损伤后不同时间闪光视觉诱发电位（F—VEP）的变化规律。方法应用液压冲击颅脑损伤仪（FPI）建立兔外伤性视神经损伤模型和视神经损伤复合晶状体损伤模型。于损伤前及损伤后1、2、4、7、10、14、21、28d行F—VEP检查并进行比较,并于上述各时间点制作视网膜切片,采用免疫组织化学法检测视网膜中巨噬细胞的数量,用焦油紫染色标记存活的视网膜神经节细胞（RGCs）,对存活的RGCs进行计数。结果损伤后1d,实验组与对照组的P100波隐含值和振幅降低,与损伤前相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。损伤后实验组P100波隐含值延长的时间与对照组相比持续的时间短（P〈0．05）,14d后实验组比对照组P100波隐含值恢复得更快（P〈0．05）。实验组随着损伤时间的延长巨噬细胞数量明显增加（P〈0．05）,而RGCs存活数逐渐减少（P〈0．05）,至损伤后28d有所恢复。对照组表现出相同的变化趋势。结论应用FPI可以成功建立外伤性视神经损伤动物模型。视网膜组织病理学检测结果印证了F—VEP的检查结果。     

量化评价半胱氨酸蛋白酶-3抑制剂治疗兔外伤性视神经损伤

目的 量化评价特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)抑制剂z-DEVD-FMK治疗外伤性视神经损伤的疗效,并分析相关因素.方法 将144只中国白兔根据不同给药剂量随机分为低剂量组(1.5μg/kg,48只)、中剂量组(2.5μg/kg,48只)和高剂量组(3.5 μg/kg,48只),各组根据治疗后不同观察时间,分为1、4、7、10、14和21d亚组,每组8只.采取自身对照法,右眼为治疗眼,左眼为对照眼.应用液压冲击颅脑损伤仪建立标准化兔外伤性视神经损伤动物模型.治疗眼于损伤后30 min玻璃体腔注射z-DEVD-FMK,对照眼注射2%二甲基亚砜.所有眼均行闪光视觉诱发电位检查、HE染色和视网膜神经节细胞计数以及Western印迹分析检测caspase-3蛋白表达量.结果 中剂量组治疗眼视网膜caspase-3前体及其切割片段呈低水平表达,对照眼均呈高水平表达.中、高剂量组视网膜神经节细胞(RGCs)计数比值均随给药时间的延长逐步增高(P＜0.01);治疗10d后,中、高剂量组RGCs计数比值高于低剂量组(P＜0.01).随给药时间的延长,低、中、高剂量组治疗眼潜伏期缩短、振幅增高(P＜0.01),中剂量组潜伏期比值1d为0.99±0.15,21 d为0.51±0.08,振幅比值1d为0.97±0.18,21 d为1.57±0.44.结论 z-DEVD-FMK对视功能的保护作用自治疗后7 d逐渐明显.z-DEVD-FMK通过阻断caspase-3的作用而有效抑制RGCs凋亡,达到了视神经保护的作用.     

标准化大鼠外伤性视神经损伤动物模型建立

目的建立标准化外伤性视神经损伤动物模型。方法应用液压冲击颅脑损伤仪(FPI)分别以(6.9±0.6)atm和(2.4±0.2)atm的冲击力打击Wister大鼠右、左眼眶内贴近眼球部的视神经,建立两组程度不同的视神经损伤模型。通过闪光视觉诱发电位(F-VEP)、眼眶磁共振成像(MRI)、视网膜病理、视神经电镜等方法对正常及损伤后1、3d,1、2、4、6、8周大鼠的双眼进行检测。结果(1)损伤后大鼠F-VEP与伤前相比,潜伏期延长、振幅降低,此变化具有统计学意义(P<0.05)。损伤程度越重,伤后主波潜伏期延迟及振幅降低越明显,波形变化趋于稳定所需时间也越长。(2)伤后1 d眼眶MRI显示视神经受损部位信号增高、眶内结构紊乱;伤后8周视神经受损部位的高信号仍较明显、损伤部位靠近眼球侧视神经信号不均匀。轻、重两组差别不明显。(3)光镜下伤后1 d视网膜神经节细胞层(GCL)出血,伤后4周视网膜各层细胞稀疏、排列欠整齐,GCL散在核染色质浓集、边聚的节细胞,伤后8周视网膜各层细胞明显减少,GCL内大量空化节细胞。(4)电镜下损伤后4周视神经轴索萎缩变性,髓鞘肿胀、板层松解分离,伤后8周在血管和星形胶质细胞突起的附近有新生轴突,呈簇分布、生长良好。重伤组新生轴突枝芽少于轻伤组。结论应用FPI可以成功建立标准化大鼠外伤性视神经损伤动物模型。     

玻璃体腔注射康柏西普治疗早产儿视网膜病变的临床疗效

目的：观察玻璃体腔注射康柏西普治疗早产儿视网膜病变（ROP）的安全性和有效性。方法：回顾性病例研究。选择2015年2月至2016年5月郑州市第二人民医院和登封市妇幼保健院ROP筛查并诊断为 急进性后极部早产儿视网膜病变（AP-ROP）、阈值期ROP或阈值前期1型ROP的患儿26例（52眼）。其中Ⅰ区病变17例,Ⅱ区病变9例。所有患儿在确诊后24 h内玻璃体腔注射10 mg/ml康柏西普0.025 ml （含康柏西普0.25 mg）。随访时间为21～49（31.2±12.5）周。病情复发或对康柏西普治疗无反应者,给予重复康柏西普注射或激光光凝治疗。随访期间观察患儿视网膜血管变化情况以及眼部或全身不良反应发生情况。结果：52眼中,经单次康柏西普治疗有效为46眼（88%）,病变完全消退,视网膜血管发育至Ⅲ区。重复康柏西普注射治疗2眼,占4%;经补充激光光凝治疗4眼,占8%,其中3眼病变复发行玻璃体切割术,占所有患眼的6%,纤维增生膜持续加重,发生视网膜脱离,2眼术后视网膜完全复位,1眼术后视网膜部分复位,包括AP-ROP 1眼,阈值期ROP 2眼,均为Ⅱ区病变,复发时间为10～17（13.2±1.8）周。所有患儿随访期间均未发生局部及全身不良反应。结论：康柏西普注射治疗ROP患儿安全有效。部分治疗无反应者,需手术联合激光光凝治疗。     

Caspase-3抑制剂Z-DEVD—FMK对兔外伤性视神经的保护作用

目的观察caspase-3抑制剂Z—DEVD—FMK对兔外伤性视神经损伤后的神经保护作用。方法中国纯种大耳白兔104只,从中随机选取8只兔（16只眼）作为空白对照组（N组,不作任何处理）,其余96只（192只眼）作为实验组,实验组再分为玻璃体腔注射组和眼周注射组．每组48只（96只眼）。玻璃体腔注射组中每只兔的右眼为caspase-3抑制剂注射组（A组）,左眼为玻璃体腔DMSO液注射组（B组）。眼周注射组中每只兔的右眼为球周caspase-3抑制剂注射组（C组）,左眼为球周DMSO液注射组（D组）。又根据给药后不同的观察时间将每组分为1d组、4d组、7d组、10d组、14d组、21d组六个亚组,每个亚组8只眼。应用液压冲击颅脑损伤仪（fluid percussion brain ijury device,FPI）建立免视神经损伤动物模型,分别于术后第1、第4、第7、第10、第14、第21天进行闪光视觉诱发电位（flash—visual evoked potential．F—VEP）、眼眶核磁共振（nuclear magnetic resonance imaging,MRI）检查,并应用TUNEL技术检测视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell,RGC）的凋亡。数据采用SPSS12．0统计软件,行单因素以及析因方差分析。结果①F—VEP：在术后第7、第10、第14和第21天,A组和C组的主波潜伏期逐渐缩短．振幅逐渐升高．与B组和D组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。A组和C组主波潜伏期在术后第4天虽然仍在延长,但与B组和D组比较差异有统计学意义（P〈0．05）,A组伤后第21天的潜伏期和振幅分别为（65．46±6．97）ms和（6．75±2．75）mV,C组分别为（72．06±6．57）ms和（6．02±1．98）mV．两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。空白对照组潜伏期和振幅与其他各组的相应时间点比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。②MRI：A组和C组的视神经MRI可见,伤后第7天粗大的视神经开始消退,至第14、第21天水肿