双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体蛋白质的损伤

目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)滋养体蛋白质的损伤作用。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体;设立实验组(DHA组)和正常对照组(C组)。实验组用含双氢青蒿素的培养基(含LC50=200μg/mL的DHA)培养;对照组培养基不含药物。提取各组虫体总蛋白,经Brad-ford法进行蛋白质定量,样本经2D-电泳和硝酸银染色后,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量和种类,获取蛋白质点匹配信息,挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF MS)分析。结果经双氢青蒿素作用后虫体总蛋白质含量(0.6993μg/mL)明显低于对照组(4.8241μg/mL),二者差异有显著性(P0.001)。蛋白质二维电泳凝胶图分析结果显示,正常对照组(C组)蛋白点密集,约1253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高(蛋白点颜色深且清晰、明亮);与此相反,实验组(DHA组)蛋白点显著减少,DHA作用6h后约617个点,作用12h后约326个点,蛋白表达量明显降低(蛋白点颜色浅,不清晰)。其次,正常对照组与双氢青蒿素组的12kDa~30kDa、等电点pI3.0~7.6范围内蛋白点表达量存在明显差异,即实验组该范围内大多数蛋白点完全消失,45kD~60kDa的蛋白点仅剩6个点。质谱分析鉴定结果显示,在正常对照组胶图所选的80个匹配良好的蛋白点中,鉴定出6种骨架蛋白(14个点),而实验组(DHA组)蛋白胶图中相对应的蛋白点消失。结论双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的蛋白质具有明显的损伤作用,其中包括细胞骨架蛋白。     

川陈皮素对糖尿病认知功能障碍大鼠神经细胞损伤改善的实验研究

目的探讨川陈皮素对糖尿病大鼠认知功能的改善及作用机制。方法选取12周龄SD大鼠40只,随机分为正常对照组,糖尿病模型组,α-硫辛酸组,高、中、低剂量川陈皮素组,每组至少6只动物,采用腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)溶液建立糖尿病大鼠模型,其中低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按照10、20和30 mg/kg给予川陈皮素,α-硫辛酸组给予60 mg/kgα-硫辛酸,每日1次,连续8周,于大鼠22周龄时行Morris水迷宫试验,采用电子显微镜观察海马组织,western blot检测海马组织Nrf2、HO-1蛋白表达。结果高剂量组逃避潜伏期分别为(16.62±1.99)s,明显低于糖尿病模型组、低剂量组和中剂量组(P0.05),与α-硫辛酸组比较差异无统计学意义(P0.05),但仍高于正常对照组(P0.05);高剂量组穿越目标区次数分别为(7.11±1.12)次,明显高于糖尿病模型组、低剂量组和中剂量组(P0.05),与α-硫辛酸组比较差异无统计学意义(P0.05),但仍低于正常对照组(P0.05);低剂量组、中剂量组、高剂量组和-硫辛酸组大鼠海马神经元细胞结构较糖尿病模型组有所改善,其中高剂量组和α-硫辛酸组形态结构接近正常对照组;高剂量组海马组织Nrf2和HO-1蛋白相对表达量分别为(0.812±0.113)和(0.877±0.117),明显高于糖尿病模型组、低剂量组和中剂量组(P0.05),与α-硫辛酸组比较差异无统计学意义(P0.05),仍低于正常对照组(P0.05)。结论川陈皮素能有效改善糖尿病大鼠认知功能以及海马组织神经元结构,上调Nrf2和HO-1表达。     

川陈皮素治疗糖尿病大鼠认知功能障碍的实验研究

目的探讨川陈皮素治疗糖尿病大鼠认知功能障碍的实验效果及其作用机制。方法取12周龄健康雄性Sprague-D awley大鼠,清洁级,40只,其中随机选取32只(腹腔注射1%STZ溶液诱发糖尿病大鼠模型)分为模型组8只、低剂量组6只、中剂量组6只、高剂量组6只、阳性对照组6只,余下8只作为正常组,模型组和正常组给予等量生理盐水治疗、高中低剂量组分别给予川陈皮素30、20、10 mg/kg,阳性对照组给予α-硫辛酸60 mg/kg,干预时间8周。结果低、中、高剂量组的血清5-羟色胺(5-HT)、褪黑素(MT)、褪黑素受体(MTR)水平、穿越平台的次数显著低于阳性对照组(P<0.05),低、中、高剂量组的血清5-HT、MT、MTR水平、穿越平台的次数逐渐升高(P<0.05);低、中、高剂量组及阳性对照组的血清5-HT、MT、MTR水平、穿越平台的次数显著高于模型组(P<0.05);低、中、高剂量组的Morris水迷宫实验逃避潜伏期、海马组织中CA1区Nrf2蛋白、Caspase-12蛋白表达水平高于阳性对照组(P<0.05),低、中、高剂量组的Morris水迷宫实验逃避潜伏期、海马组织中CA1区Nrf2蛋白、Caspase-12蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05);低、中、高剂量组及阳性对照组的Morris水迷宫实验逃避潜伏期、海马组织中CA1区Nrf2蛋白、Caspase-12蛋白表达水平低于模型组(P<0.05)。结论川陈皮素治疗糖尿病大鼠认知功能障碍能显著的升高血清5-HT、MT、MTR水平、降低海马组织中CA1区N rf2蛋白表达水平,逐渐改善糖尿病大鼠的认知功能水平,并且与川陈皮素的剂量有关。