抗兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶单克隆抗体的制备和鉴定

背景与目的:制备抗兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR]的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.材料与方法:以基因工程重组兔NRDR为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌兔NRDR mAb的细胞株.以间接ELISA法筛选阳性克隆、鉴定Ig亚类、细胞培养上清及腹水效价,同时采用Western blot方法检测mAb的特异性.结果:获得3株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(NR1、NR2和NR5).其抗体亚类均为IgG1,细胞培养上清效价依次为1∶20、1∶40和1∶20,腹水效价分别为1∶106、1∶107和1∶106.Western blot结果显示NR1、NR2和NR5抗体均能有效识别兔肝组织中的NRDR及重组表达的兔NRDR.结论:成功地建立了稳定分泌兔NRDR mAb的杂交瘤细胞株,为NRDR生物学功能的进一步研究打下了基础.     

正常肝和肝癌细胞中DHRS4L2基因选择性剪接亚型的克隆及其表达调控研究

目的：鉴定正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞Hep-G2中DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型,并探讨其表达调控机制。方法：应用RT-PCR,3′RACE和生物信息学方法发现并鉴定DHRS4L2基因的选择性剪接新亚型;去甲基化药物5-aza-dC处理HL-7702和Hep-G2细胞,通过RT-PCR和real-time PCR方法检测DHRS4L2的表达情况。结果：发现了2个新的DHRS4L2剪接亚型DHRS4L2A和DHRS4L2A3,2个新亚型均出现了新的第1个外显子,命名为Ea,前者缺失外显子1,后者缺失外显子1和3;在正常肝细胞中去甲基化后含DHRS4L2外显子1的转录产物比处理前明显增加,在肝癌细胞中则比处理前减少。结论：获得2个新的DHRS4L2剪接亚型,并发现DHRS4L2的表达和甲基化调控相关,且甲基化的调控作用在正常肝与肝癌细胞之间存在差异,其机制尚待进一步探讨。     

我国医院质量管理现状——基于五省调研

本研究通过对5个省开展实地调研,发现我国三级医院、县级医院、民营医院之间医疗质量管理的发展水平有很大差距。三级医院的质量管理体系最为健全;县级医院由于人力资源匮乏和运营压力而无力完善薄弱的质量管理体系;民营医院的医疗质量管理水平则呈现两极分化的趋势。其中存在的具体问题包括:省级质量监管机构监管能力薄弱,运行缺乏保障;医院内部质量管理组织架构不完善,专业质管人员缺乏,人员培训不足;医院信息化发展程度不均衡,信息共享不足。针对上述问题,本文建议:提升第三方监管机构的隶属层次,加强对质控中心的运行保障;完善县级医院、民营医院内部质量管理组织架构,保障人员配置,加大经费投入,开展全员质量管理培训;制定医院信息化建设的基本框架,加强对县级医院、民营医院信息化建设的经费补贴,尽快颁布全国统一的疾病编码,促进医院信息共享。