PCR 检测产 A、B、E、F 和 G 型肉毒神经毒素梭菌的神经毒素基因

肉毒神经毒素分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ和Ｇ七个血清型，其中Ａ、Ｂ、Ｅ和Ｆ型引起人类肉毒中毒。为此，选取肉毒神经毒素的保守序列设计了一对简并引物，对１８株肉毒梭菌和８株相关梭菌进行了检测，表明该引物可特异扩增Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ和Ｇ型肉毒梭菌及产Ｅ型肉毒神经毒素的丁酸梭菌，产物为２６４ｂｐ，敏感性达１０ｐｇ细菌ＤＮＡ。采有酚－氯仿抽提法、固相载体捕获法和热裂解法处理产毒菌株，结果表明热裂解法安全、简便、快速，所制模板扩增效果明显。因此，此ＰＣＲ方法可用于快速敏感地检测引起人类肉毒中毒的梭菌。     

细菌感染诱导机体细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是指细胞接受某种信号或受到某些因素刺激后的一种主动的、由凋亡相关基因调控的细胞“自杀”过程。它为维持细胞内环境稳定所必需,可在许多生理和病理情况下发生。近年来研究发现在细菌感染性疾病中亦存在着许多细胞凋亡现象。 细菌引起细胞凋亡或抗凋亡的机制目前尚不十分清楚,主要是与致病菌的毒力因子有关,这些毒力因子包括毒素、超抗原、Ⅲ型分泌装置等,本文拟对此的研究进展作一概述。     

金黄色葡萄球菌随机扩增DNA多态性分型研究

目的建立金黄色葡萄球菌随机扩增ＤＮＡ多态性（ＲＡＰＤ）分型技术，以应用于临床菌种鉴定及流行病学调查。方法对临床分离的１５株金黄色葡萄球菌，酚氯仿法提取其ＤＮＡ后行ＲＡＰＤ分型，同时进行噬菌体分型。结果１５株临床分离株大多数产生独特而稳定的ＲＡＰＤ带型，可分成５个噬菌体型和１４个ＲＡＰＤ谱型。采用同一反应体系，产肠毒素金黄色葡萄球未出现ＲＡＰＤ谱型。结论ＲＡＰＤ基因分型技术不需已知核酸序列，分型率高，分辨力强，简便快捷，可为金黄色葡萄球菌临床分离株提供分型标志，是分子流行病学研究的有效方法     

金黄色葡萄球菌医院感染的临床和基因遗传聚类分析

目的为控制医院金黄色葡萄球菌感染,揭示其病原体特性及流行病学规律。方法对２８例金黄色葡萄球菌感染患者的临床资料和病原菌的药敏试验和ＰＲＡＤ基因聚类进行分析。结果医院感染患者ＭＲＡＳ占６０．７１％,ＭＳＳＡ３９．２８％,病原体对青霉素耐药率达８６．１％,对常用一二代头孢菌素和喹诺酮药物的敏感率低于４０％。噬菌体Ⅲ型构成比占６０．７％,ＰＲＡＤ聚类分型产生３个聚类群。结论对感染患者进行临床和细菌病原学特征分析,可提供病原菌传播与生存的本质资料     

金黄色葡萄球菌随机扩增DNA多态性分型研究

目的建立金黄色葡萄球菌随机扩增ＤＮＡ多态性（ＲＡＰＤ）分型技术，以应用于临床菌种鉴定及流行病学调查。方法对临床分离的１５株金黄色葡萄球菌，酚氯仿法提取其ＤＮＡ后行ＲＡＰＤ分型，同时进行噬菌体分型。结果１５株临床分离株大多数产生独特而稳定的ＲＡＰＤ带型，可分成５个噬菌体型和１４个ＲＡＰＤ谱型。采用同一反应体系，产肠毒素金黄色葡萄球菌未出现ＲＡＰＤ谱型。结论ＲＡＰＤ基因分型技术不需已知核酸序列，分型率高，分辨力强，简便快捷，可为金黄色葡萄球菌临床分离株提供分型标志，是分子流行病学研究的有效方法。     

2型糖尿病患者脂蛋白脂酶基因多态性与冠心病关系的研究

高甘油三酯 (ＴＧ)血症是 2型糖尿病 (ＤＭ )常见并发症 ,而且是其并发冠心病 (ＣＨＤ)的独立危险因子 ,其机制尚未阐明。本研究旨在探索 2型ＤＭ患者脂蛋白脂酶 (ＬＰＬ)基因多态性与血脂及ＣＨＤ的关系。一、对象和方法1.对象 :2型ＤＭ患者 2 16例 (2型ＤＭ组 ) ,年龄 (5 8±12 )岁 (4 0～ 89岁 ) ,男 114例 ,女 10 2例 ;77例并发ＣＨＤ(伴ＣＨＤ组 ) ,年龄 (5 9± 11)岁 ,男 40例 ,女 37例 ;139例不伴ＣＨＤ(不伴ＣＨＤ组 ) ,年龄 (5 7± 14)岁 ;正常人 6 3例作为对照。2 .方法 :(1)空腹新鲜血标本测定空腹血糖 (ＦＢＧ)、总胆固醇 (ＴＣ…     

PCR检测食品标本中A,B,E和F型肉毒梭菌

ＰＣＲ检测食品标本中Ａ、Ｂ、Ｅ和Ｆ型肉毒梭菌军事医学科学院微生物流行病所（北京１０００７１）王颖群严共华雷祚荣用常规方法从食物中分离鉴定出肉毒梭菌至少需４天，不能达到快速监测食品的目的。为此，我们通过检索肉毒神经毒素的基因序列，选择保守区设计简并引物...     

脑缺血诱导的基因表达

长期以来,人们一直致力于研究卒中的病理生理机制,认为缺血会触发脑的损伤机制,如细胞能量丧失,离子平衡紊乱,兴奋毒性,Ca2 内流等。但是近年来随着分子生物学研究手段的运用,人们认识到脑对缺血的反应并非只是离子通道、受体等激活而导致神经元死亡,相反,在脑中存在完善的适应     

中国人胶质细胞源神经营养因子基因的克隆及测序

目的 为了克隆中国人胶质细胞源神经营养因子（GDNF）基因，从而为开发重组人GDNF治疗神经变性疾病打下基础。方法 根据从GeneBank中调出的人GDNF基因全序列设计引物，以中国人外周血白细胞提取的基因组DNA为模板，通过PCR扩增出中国人GDNF基因片段，克隆到pGEM-T载体上，进行序列分析。结果 我们得到的一种425bp DNA片段。经与GeneBank中已注册的GDNF基因片段，克隆到pGEM-T载体上，进行序列分析。结果 我们得到的一种425bp DNA片段。经与GenBank中已注册的人GDNF基因比较，序列完全相同。结论 正确的中国人的GDNF基因已克隆成功。     

聚合酶链反应快速检测胃组织和唾液中的幽门螺杆菌

针对幽门螺杆菌（HP）尿素酶A基因设计一对引物进行聚合酶链反应，检测1株HP标准株和7株临床分离株均阳性，而4株其它肠道菌均阴性，特异性100％。10倍系列稀释试验表明敏感性达到100pgDNA水平。从35例胃镜检查者取幽门旁组织块进行快速和常规尿素酶试验，细菌培养及PCR检测，15例HP阳性者PCR检测也为阳性，其中7例阳性者有3例唾液PCR检测为阳性，表明HP确存在于口腔中。本研究采用直接热裂解法处理临床标本，取其粗提物行PGR免除复杂的酚-氯仿抽提步骤，该法简便快速，且损失小，成功率高，在临床实验诊断中有推广价值。