噬菌体随机肽库对肝癌细胞特异性结合短肽的筛选及鉴定

目的:通过噬菌体随机肽库,筛选人肝癌细胞结合短肽,并对其与肝癌细胞的特异结合能力进行生物学鉴定.方法:以L-02为阴性消减细胞,HepG2为靶细胞,对噬菌体随机七肽库进行4轮消减筛选.并随机挑取26个阳性噬菌体克隆进行序列测定及同源性分析.以ELISA法鉴定噬菌体与HepG2细胞的结合活性.通过免疫细胞化学染色、免疫组织化学染色鉴定H3噬菌体克隆与肝癌细胞结合的特异性.人工合成短肽HBP3,利用免疫荧光技术观察其与肝癌细胞的结合特异性.结果:4轮筛选使噬菌体在靶细胞HepG2上出现明显富集.所挑取的26个阳性噬菌斑,经测序得到各噬菌体单克隆的多肽插入序列,最终产生5条氨基酸序列.经BLAST分析发现,在蛋白质数据库中未发现与这些短肽序列具有较好同源性的蛋白质分子.ELISA分析鉴定显示,5个阳性克隆在HepG2和L-02细胞上有差异性结合,其中H3噬菌体克隆对两种细胞的结合差异性最大.免疫细胞化学染色及免疫组织化学染色均显示,H3噬菌体克隆对肝癌细胞的结合靶向性明显高于对照细胞.免疫荧光显色证实,FITC-HBP3能特异性地结合于肝癌细胞的胞膜及核周胞质.结论:H3噬菌体克隆所呈现的七肽HBP3能与靶细胞高亲合性结合,为进一步研制用于治疗肝癌的高靶向性药物奠定实验基础.     

HL-60细胞内一种新的全反式维甲酸应答基因的克隆

利用差示PCR 技术从HL60 细胞内克隆出一个新的、差异表达的cDNA 片段,并将其命名为W1 基因。Northern 印迹杂交证实,用全反式维甲酸(ATRA) 诱导HL60 细胞分化时,W1 基因的转录水平在诱导早期增加而在诱导24 h 后关闭。推测W1 基因可能在HL60 细胞早期分化中有一定作用     

泌尿生殖道标本检出病原微生物分析

本文对１８０例疑难性病患者进行了淋病奈瑟氏菌（淋球菌）、支原体（人型支原体及解脲脲原体）及假丝酵母菌的培养、生化检测和沙眼衣原体抗原的单克隆抗体检测。结果表明，淋球菌的阳性检出率为１２７％，支原体、沙眼衣原体及白色假丝酵母菌的阳性检出率分别为１２２％、２８８％和２５％，二种或二种以上微生物合并感染者占２６％。表明了多项检测对临床上减少漏诊是极为重要的     

夜间低空弹射跳伞成功1例分析

跳伞脱离失事的飞机,是每个飞行员都可能遇到的情况。随着飞机性能的不断改进,救生装备的不断改善,紧急情况下的跳伞成功率也在提高。但高速飞机的低空跳伞仍存在一定的危险性和技术问题。我部一名飞行员曾因夜航飞机失事,被迫跳伞成功。现报告如下。     

量子点荧光标记及其应用

量子点（quantum dot，QD）又称为半导体纳米晶体（semiconductor nanocrystal），是一种由Ⅱ-Ⅷ或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的纳米颗粒，直径约1～100nm。在激发光的诱导下，量子点会产生荧光。     

不连续亲和电泳测定糖化血红蛋白及其临床应用

利用血红蛋白吸管在醋酸纤维膜上划线加样，不连续亲和电泳的方法分离糖化血红蛋白，并直接洗膜比色。本法去掉染色步骤，减少了检测时间和仪器设备。同时用琼脂法进行盲法检测对照，并比较该法的可靠性。两法同时测定３２名健康人及３４名糖尿病人，ＧＨｂ分别为（７５１±１０２）％及（７２±１２）％，（１６２４±３３４）％及（１５４２±２４）％。两法结果经相关处理，其相关系数γ＝０８１０；两法无显著差异（Ｐ＞００５）；两组ＧＨｂ测定结果有非常显著差异（Ｐ＜０００１）。该检测方法有利于临床医生对糖尿病人近期血糖变化观察，追踪以及胰岛素用量调整。经追踪糖尿病人的首次ＧＨｂ，发现凡ＧＨｂ＞１２５％者，其病情进展变化可能性大，合并症多，必须严格对该组病人血糖给予控制。建议糖尿病人每２～３个月复查一次ＧＨｂ，以掌握病情进展     

量子点荧光标记及其应用

量子点(quantum dot,QD)又称为半导体纳米晶体(semiconductor nanocrystal),是一种由Ⅱ-Ⅷ或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的纳米颗粒,直径约1～100 nm.在激发光的诱导下,量子点会产生荧光. 一、量子点的基本特性     

人工关节置换术治疗老年股骨颈骨折

随着我国向老龄化社会的发展,伴有心血管、呼吸、内分泌、泌尿、代谢系统等多系统合并症的老年股骨颈骨折病人逐渐增多.笔者自2003年5月～2008年5月,采用人工髋关节置换治疗52例老年股骨颈骨折,报告如下: