基于超高效液相色谱-串联质谱法评价右美沙芬对大鼠CYP450酶活力的影响

目的基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定大鼠血浆中5种探针药物(安非他酮、美托洛尔、咪达唑仑、非那西丁和甲苯磺丁脲),5种探针药物分别是细胞色素P450同工酶CYP2B6、CYP2D6、CYP3A4、CYP1A2和CYP2C9底物,评价右美沙芬对大鼠CYP450酶活性影响。方法将大鼠随机分成右美沙芬低剂量组36 mg/kg、高剂量组100 mg/kg、可待因组20 mg/kg和对照组4组。右美沙芬低剂量组、高剂量组灌胃给予右美沙芬30 d,可待因组灌胃给予可待因30 d,对照组灌胃给予生理盐水30 d。5种探针药物通过灌胃给予大鼠,用UPLCMS/MS测定血浆药物浓度。结果右美沙芬组和对照组对比结果中,安非他酮、美托洛尔、咪达唑仑、非那西丁和甲苯磺丁脲药代动力学差异均有统计学意义(P0.05)。右美沙芬组中美托洛尔、甲苯磺丁脲AUC比对照组高(P0.05),但安非他酮、咪达唑仑AUC比对照组低(P0.05)。结论研究中,大鼠灌胃右美沙芬可能诱导大鼠CYP450亚型CYP2B6、CYP3A4、CYP1A2酶活性,可能抑制大鼠CYP2D6、CYP2C9酶活性。     

人血浆中马钱子碱的LC-MS/MS法测定

建立了LC-MS／MS法测定人血浆中马钱子碱浓度。采用C18柱，流动相为乙腈-0．2％甲酸溶液（60：40），乌头碱为内标。电喷雾离子源（ESI），正离子检测，采用多反应监测方式进行定量分析，检测离子分别为m／z395→324、263（马钱子碱），m／z646→586、526（内标）。血浆中马钱子碱浓度在4-400ng／ml范围内线性关系良好，最低定量限为4ng／ml。马钱子碱的萃取回收率为86．0％～91．0％，日内及日间RSD分别低于6％和7％。     

HPLC法测定术后疲劳综合征大鼠骨骼肌ATP,ADP,AMP的含量

目的:建立改良的高效液相色谱(HPLC)法测定术后疲劳综合征(POFS)大鼠骨骼肌5’-三磷酸腺苷(ATP)、5’-二磷酸腺苷(ADP)、5’-磷酸腺苷(AMP)的含量。方法:采用色谱柱Hypersil ODS2(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温25℃;流动相为100 mmol.L-1磷酸盐缓冲液(含12 mmol.L-1的磷酸氢二钠和88 mmol.L-1的磷酸二氢钠,pH=6.5)-甲醇(99.9∶0.1,体积比);流速1.0 mL.min-1;紫外波长为254 nm;进样量20μL。结果:ATP、ADP、AMP色谱峰在10 min内得到了较好的分离,在测定范围内均呈良好的线性关系,r分别为1.000,0.9996,0.9994;精密度试验日内RSD≤4.1%,日间RSD≤3.5%;稳定性试验RSD≤4.8%;重复性试验RSD≤2.3%;回收率在97.1%～105.4%之间,RSD≤4.8%。应用改良的方法对模型组大鼠和对照组大鼠骨骼肌ATP、ADP、AMP的含量进行检测。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠骨骼肌ATP含量在术后第1,3 d明显下降(P<0.05),ADP含量在术后第7 d明显升...     

HPLC测定牛黄解毒片中黄芩苷与大黄酚的含量

目的利用梯度洗脱法,建立一种简便测定牛黄解毒片中黄芩苷和大黄酚含量的高效液相方法。方法色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-CBC8柱（4.6×150mm,5μm）,流动相为乙腈-磷酸缓冲溶液（磷酸0.24%,磷酸氢二钾6.31mmol·L^-1）梯度洗脱,检测波长256nm;流速1.0mL·min^-1。黄芩苷保留时间为4.417min,大黄酚保留时间为14.934min。结果黄芩苷进样量在0.020～1.000μg时呈良好的线性关系（r=0.99987）,大黄酚进样量在0.013～0.650μg时呈良好的线性关系（r=0.99982）;加样回收率分别为99.13%（黄芩苷）,99.33%（大黄酚）,RSD分别为0.59%,0.98%。结论本方法操作简便,灵敏度高,重现性好,分离效果理想。     

HPLC法测定前列舒丸中丹皮酚的含量

目的建立以HPLC法测定前列舒丸中丹皮酚含量的方法。方法色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18（4．6×150mm,5μm）。流动相为甲醇-水（70：30）,流速为1．0mL·min^-1。检测波长为274nm。结果丹皮酚在8．2--41．0μg·mL^-1浓度范围内与峰面积积分值呈良好线性关系（r=0．9997）;加样回收率为99．30％（RSD=0．66％）。结论该方法简便、快速、灵敏、准确,稳定性、重现性好,可作为产品的质量控制方法。     

基于GC-MS技术研究八角枫对大鼠血浆与尿液代谢的影响

目的:基于气相色谱-质谱法(GC-MS)技术探讨八角枫对大鼠血浆与尿液代谢的影响。方法:将32只SD大鼠分为对照组及八角枫低、中、高剂量组,每组8只。对照组给予生理盐水灌胃,八角枫低、中、高剂量组分别按0.25、0.50、1.00 g/(kg·d)的剂量灌胃八角枫煎煮液,共14 d。第15天收集各组大鼠血浆与尿液样本,衍生化处理后,进行GC-MS分析。结果:各组间偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)评分分离效果不佳,各组间互相有交叉,但血浆的分离效果要好于尿液样本;八角枫各剂量组与对照组偏最小二乘回归3D模型(PLS-3D)评分可以区分;且PLS-3D评分结果较PLS-DA评分结果好。与对照组比较,八角枫高剂量组大鼠血浆中尿素含量升高(P<0.05),尿液戊二酸降低(P<0.05);八角枫中、高剂量组大鼠葡萄糖、黄胺酸和琥珀酰胺酸含量降低(P<0.05);八角枫低剂量组尿液中木糖醇升高(P<0.05)。结论:基于GC-MS技术的代谢组学研究发现,八角枫可诱导大鼠血浆与尿液代谢紊乱,可为其临床安全用药提供毒理、药理等方面的参考。     

紫外鉴别时扫描数据的聚类分析

目的：探讨紫外鉴别时扫描数据的聚类分析方法。方法：以六种药品为材料,采集不同浓度时的紫外扫描数据,采用吸收度最小值归零后除以最大吸收值的方法将扫描数据标准化（吸光系数比值曲线）,用SPSS软件,分别以相关系数和类内平均链距离为统计量进行聚类处理。结果：原始数据按类内平均链距离分析时,把不同浓度的不同药物都聚成一类,标准化后的数据能把六种药物正确聚类,两类数据按相关系数都能正确聚类。结论：在用聚类分析鉴别药物时,对吸光系数比值曲线聚类是一种可接受的方法。     

LC-APCI-M/SMS测定全血中苯妥英钠的含量

目的:建立了LC-APCI-MS/MS法测定全血中苯妥英钠的血药浓度。方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C18(4.6×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(50:50)。大气压喷雾离子源(APCI),正离子检测,采用多反应监测方式进行定量分析,检测离子为m/z 253→182(苯妥英钠),m/z 316→270(内标氯硝西泮)。结果:全血中苯妥英钠浓度在4~2400 ng/ml范围内线性关系良好,最低检测限为2 ng/ml。苯妥英钠的萃取平均回收率为71.45%~87.27%,日内及日间RSD都低于6%。结论:该法操作简便、快速、灵敏度高,可用于苯妥英钠的临床毒物分析。     

超高效液相色谱-串联质谱仪同时检测大鼠血浆中5种CYP450探针药及其应用

目的以地西泮为内标,使用超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS/MS)同时测定大鼠血浆中5种探针药物(安非他酮、美托洛尔、咪达唑仑、非那西丁和甲苯磺丁脲),这5种探针药物分别是细胞色素P450同工酶CYP2D6、CYP3A4、CYP1A2、CYP2B6、和CYP2C9底物。方法血浆样品用乙腈沉淀法去除蛋白,色谱分离采用UPLCBEHC18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)柱,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,采用电喷雾离子化,MRM多反应监测模式进行定量。结果日间精密度和日内精密度12%,准确度为90.3%~111.4%,提取回收率为78.6%~98.8%,基质效应为93.8%~109.5%,血浆标准曲线在1 ng/ml~2 000 ng/ml内呈良好线性关系,相关系数r≥0.995。结论该方法快速、灵敏,并成功应用到拉帕替尼对大鼠CYP450酶活性影响研究,表明拉帕替尼对大鼠CYP2B6、CYP2D6、CYP3A4、CYP1A2酶都有不同程度的诱导作用。     

气相色谱-质谱法检测黑面神对大鼠肝肾机体代谢的影响

目的通过采用气相色谱-质谱法(GC-MS)结合代谢组学方法以阐明南方"傣族"少数民族治疗慢性支气管炎和炎症的民间药物黑面神(大戟科)对大鼠肝肾机体代谢的影响。方法将大鼠分为对照组、黑面神(2 g/kg)组和10%酒精处理组,连续给药7 d。第8 d,从3组大鼠收集肝脏和肾脏样本,衍生化处理后,进行GC-MS分析。结果根据肝脏和肾脏的代谢组学偏最小二乘法鉴别分析(PLS-DA),结果显示黑面神组与对照组和10%酒精处理组区别开来。在肝组织中,黑面神组与对照组之间没有发现差异,而黑面神组与10%乙醇处理组之间的核糖醇和D-葡萄糖含量差异有统计学意义(P0.05)。在肾组织中,黑面神组相对10%酒精处理组,硬脂酸含量升高(P0.05)。结论 PLS-DA结果表明,黑面神诱导代谢扰动,而10%的酒精也可能诱发代谢扰动。