水疱性口炎病毒对小鼠乳腺癌4T1 细胞荷瘤小鼠抗肿瘤免疫、移植瘤生长与肺转移的影响

目的：探究野生型水疱性口炎病毒印第安纳株（VSV-IN）对小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞移植模型小鼠的免疫调节及肿瘤转移的影响。方法：VSV以MOI=1、MOI=10、MOI=100 感染4T1细胞12、24、48 h后,CCK-8法检测4T1细胞死亡率,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,qPCR 检测细胞中E-cadherin、MMP-2、MMP-9 mRNA 的表达。于雌性 BALB/c 小鼠脂肪垫接种1×106个/mL 的4T1 细胞0.1 mL,构建4T1 细胞荷瘤小鼠模型,待小鼠肿瘤体积达200 mm3 ,分别向移植瘤内注射PBS、紫杉醇（TAX）（15 mg/kg）、VSV-IN（1×106 pfu/只）,每周1次。给药4次后,处死小鼠、剥离完整移植瘤组织,测量肿瘤体积及质量,肺组织病理切片经H-E 染色后观察肿瘤肺部转移结节,流式细胞术检测脾组织中T 细胞亚群比例,ELISA 法检测小鼠血清IL-6 及TNF-α水平,利用GEPIA 在线分析乳腺肿中迁移相关蛋白mRNA的表达,免疫组化法检测肿瘤中MMP-2、MMP-9 与E-cadherin的表达,利用蛋白-蛋白对接技术预测VSV-IN 的G 蛋白、M 蛋白与ERK2、E-cadherin 的亲和力。结果：经MOI=10、100的VSV-IN 处理48 h 后,4T1 细胞死亡率显著高于对照组（均P<0.01）;与对照组相比,VSV-IN 组（MOI=10）细胞迁移率明显降低（P<0.01）,MMP-9 mRNA的相对表达量明显降低（P<0.05）;与对照组小鼠相比,VSV-IN 组移植瘤生长较对照组减缓且终点体积显著减小（P<0.05）,VSV-IN 组小鼠肺转移结节数量显著减少[（12.86±1.86） vs （24±3.67）个,P<0.01],脾内CD4+ T、 CD8+ T 细胞比例显著升高（均 P<0.05）,血清 TNF- α、IL-6含量显著升高（均P<0.01）;GEPIA分析发现在乳腺癌中E-cadherin、 MMP-9表达水平均高于癌旁组织（P<0.05）;VSV-IN 组小鼠肿瘤细胞内MMP-9表达明显低于对照组（P<0.05）;VSV-IN 的G、M蛋白与ERK2的结合自由能分别为–11.7 kcal/mol、–6.4 kcal/mol。结论：野生型VSV-IN 可抑制4T1细胞荷瘤小鼠的移植瘤生长及转移,这可能与其促进抗肿瘤免疫及调控迁移相关蛋白表达有关。     

晚期氧化蛋白产物对妊娠滋养细胞生物学功能的影响

目的观察晚期氧化蛋白产物（AOPP）对妊娠滋养细胞（HTR8/SVneo）功能的影响。 方法体外培养HTR8/SVneo细胞株,用次氯酸（HClO）氧化鼠白蛋白（MSA）体外制备AOPP-MSA,将HTR8/SVneo滋养细胞与不同浓度（50 μg/ml组、100 μg/ml组或200 μg/ml组）的AOPP-MSA共同培养。四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测滋养细胞的增殖能力,以平均吸光度（A）值表示;侵袭小室检测滋养细胞侵袭能力,以穿膜细胞数表示;检测上清液中滋养细胞分泌的β-HCG水平评价滋养细胞分化能力;Hoechest33258染色检测滋养细胞凋亡。采用单因素方差分析比较不同浓度AOPP下,滋养细胞的增殖能力、侵袭能力、细胞分泌β-HCG、细胞凋亡数的差异。 结果与对照组比较,AOPP浓度为50 μg/ml时,对HTR8SVneo滋养细胞增殖、侵袭、分化能力及凋亡影响不明显（P>0.05）;AOPP浓度为100 μg/ml和200 μg/ml时,AOPP明显抑制滋养细胞增殖、侵袭和分化能力,并促进滋养细胞凋亡（P<0.05）。 结论AOPP可以抑制滋养细胞的增殖、侵袭、分化能力及诱导滋养细胞凋亡。降低血浆中AOPP水平可能有利于改善滋养细胞生物学功能。     

小鼠组织总RNA制备方法及样本储存时间对qRT-PCR影响的探讨

目的 探讨适合现代医学实验室的高效组织总RNA提取方法,以及组织样本储存时间对后续实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测有效性的影响。方法 分别采用全自动样本处理器+磁珠法全自动核酸提取(方法1)、全自动样本处理器+离心柱法(方法2)、手工匀浆器+磁珠法全自动核酸提取(方法3)和手工匀浆器+离心柱法(方法4)4种方法制备小鼠新鲜心、肝、肾组织总RNA,比较各方法制备的总RNA质量。评价方法1和方法4制备的新鲜、-80℃储存1年和2年的小鼠肝组织总RNA质量及其对qRT-PCR检测结果的影响。结果 方法1制备的小鼠新鲜组织总RNA浓度、完整性均优于其他3种方法。方法1制备的1年和2年肝组织总RNA完整性均明显优于方法4。3个不同储存时间肝组织样本的Ct值范围分别为18～19、21～22和27～28,2年肝组织样本总RNA降解明显。结论 方法1是最佳的组织总RNA制备方法,尤其针对保存2年内的稀有生物样本。用于qRT-PCR检测的生物样本于-80℃储存时间最好不超过1年。     

妊娠期阴道乳杆菌含量变化的研究

目的:研究妊娠期阴道pH和阴道乳杆菌含量的变化及两者相互变化的关系.方法:妊娠旱、中、晚各期及非孕期妇女各30例,乳杆菌革兰染色及菌落计数探讨其在妊娠期及非妊娠期含量变化情况,精密pH试纸检测阴道分泌物pH.结果:①妊娠期阴道乳杆菌菌株无明显变化.②早、中、晚孕各期之间阴道pH比较,差异有统计学意义(P<0.05);非孕期与旱、中、晚孕各期之间阴道pH比较,差异有统计学意义(P<0.05).③非孕期与早、中、晚孕各期之间阴道乳杆菌含量比较差异有统计学意义(P<0.05);早、中孕期阴道乳杆菌含量比较差异无统计学意义(P>0.05);晚孕期阴道中乳杆菌含量与早、中孕期比较差异有统计学意义(P<0.05).④整个妊娠期阴道pH与阴道乳杆菌含量变化呈负相关(P<0.05).结论:妊娠期阴道乳杆菌菌株无明显变化,阴道pH随孕期的递增而升高,阴道乳杆茵含量随孕周的递增而下降,整个妊娠期阴道pH与阴道乳杆菌含量的变化呈负相关.     

自拟葛花解酒涤脂汤对酒精性脂肪肝小鼠肝脏脂肪沉积及PXR表达的影响

目的了解自拟葛花解酒涤脂汤对酒精性脂肪肝(AFLD)小鼠肝脏脂肪沉积的影响,并观察其对肝组织孕烷受体(PXR)及其调控靶基因CYP3A11、CYP3A25蛋白及mRNA表达的影响。方法将29只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组(5只),模型组(8只),高剂量干预组(8只)、低剂量干预组(8只)。采用美国国立卫生研究院酒精滥用和酒精中毒研究所(NIAAA)方法制备AFLD小鼠模型,分别灌胃给予高、低剂量葛花解酒涤脂汤水煎剂干预,连续9 d。采用酶联免疫吸附法检测血清中谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)水平,组织病理学油红O染色检测肝脏脂肪沉积情况;实时荧光定量PCR及免疫组织化学方法分别检测PXR、CYP3A11、CYP3A25 mRNA及PXR蛋白的表达。结果与模型组比较,干预组小鼠肝脏脂肪沉积显著减轻,呈剂量依赖性,具有比模型组和正常组显著增加的PXR、CYP3A25表达水平(P0.01);模型组小鼠血清ALT水平显著增加(P0.01),其余各组相似;各组CYP3A11mRNA转录水平差异无显著性(P≥0.05)。结论自拟葛花解酒涤脂汤对实验小鼠AFLD具有明显的治疗作用,可能与促进PXR及其靶基因CYP3A25表达有关。     

以HELLP综合征首发的系统性红斑狼疮1例

<正>1 病例报告患者,29岁,因孕31~(+5)周,头痛6小时,于2018年7月31日入深圳市人民医院产科。末次月经2017年12月20日,预产期2018年9月27日。停经30~+天自测尿hCG(+),孕4~+月自觉胎动。孕12~+周于外院建立围产保健手册,并定期规律产前检查,建册时基础BP 110/70 mmHg,随机尿蛋白阴性,唐氏筛查低风险,地中海贫血筛查、孕中期彩超筛查及口服葡萄糖耐量试验(OGTT)结果均未提示异常。孕18+周产前检查时测     

产后出血患者血栓弹力图与常规凝血参数相关性分析

目的探讨血栓弹力图(TEG)与常规凝血、血常规试验参数之间的相关性,评价TEG与常规凝血参数在检测产后出血患者凝血状态中的差异与共性。方法选择2017年1月1日至12月31日在该院产科分娩,发生产后出血的患者42例,于发现产后出血时采患者静脉血样3份,同时作TEG、常规凝血和血常规检测。结果最大振幅(MA)与纤维蛋白原(Fbg)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)均具有一定相关性(P0.05);α角与Fbg、APTT、PT、INR均具有一定相关性(P0.05);反应时间(R)与INR呈正相关(P0.05);K与PT呈正相关(P0.05);凝血综合指数(CI)与Fbg呈正相关(P=0.005);患者中有3例纤溶率(LY30)7%,提示纤溶亢进;LY30与HGB呈负相关(P0.05)。结论 TEG与常规凝血、血常规参数之间有显著相关性;TEG可检出产后出血纤溶亢进,指导用药。     

GLP-1介导PI3K/Akt通路拮抗AOPP诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡的作用

目的:探究磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路在胰高血糖素样肽链-1(GLP-1)拮抗晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导妊娠滋养细胞凋亡的保护作用机制。方法:体外培养妊娠滋养细胞HTR-8/SVneo,将细胞分为对照组、AOPP组、GLP-1组、AOPP+GLP-1组、AOPP+GLP-1+LY294...     

贵州省贵阳地区HPV分型及宫颈病变情况分析

目的 分析贵阳地区人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus, HPV)流行病学特征及感染后宫颈病变情况,为此地区宫颈癌筛查、防治和疫苗接种提供临床依据。方法 收集2017—2022年在贵州中医药大学某医院就诊,自愿行HPV分型检查女性为研究对象,采用实时荧光定量PCR对28种HPV进行检测,采用液基薄层细胞学检查(thin-prep cytology test, TCT)检测宫颈病变情况,应用Excel 2010和SPSS 22.0软件对数据进行整理和统计分析,组间比较采用χ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 2017—2022年共检测妇科门诊就诊女性19 426例,HPV检出率为20.45%(3 972/19 426),HPV单一型别感染率为15.15%(2 944/19 426),多重感染率为5.29%(1 028/19 426),高危型HPV感染率高于中危型和低危型,差异有统计学意义(χ²=9.743,P=0.002)。不同年龄组均以单一高危型感染为主,其中<20岁年龄组常见感染亚型为HPV52、...     

葛花解酒涤脂汤对酒精性脂肪肝小鼠肝脏核受体PXR,CAR表达的影响

目的:探讨葛花解酒涤脂汤对小鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的干预作用及对肝组织孕烷受体(PXR),组成性雄甾烷受体(CAR)表达的影响。方法:将29只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,葛花解酒涤脂汤高、低剂量组。采用美国国立卫生研究院酒精滥用和酒精中毒研究所(NIAAA)方法制备AFLD小鼠模型,经鉴定成功后,分别灌胃给予高、低剂量葛花解酒涤脂汤(4.9,2.45 g·kg-1·d-1)。9 d后处死小鼠,收集血清及肝组织样本。酶联免疫吸附法检测血清中游离胆固醇(FCHOL)及甘油三酯(TG)水平,苏木素伊红(HE)染色检测肝组织损伤情况;实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法(Western blot)分析肝组织PXR,CAR mRNA和蛋白表达,及其调控的细胞色素P450氧化酶(CYP3A11,CYP3A25,CYP2B9,CYP2B10)基因表达水平。结果:与模型组比较,葛花解酒涤脂汤组小鼠肝脏脂肪变性显著减轻,并呈剂量依赖性。与模型组和空白组比较,葛花解酒涤脂汤组可显著上调PXR,CYP3A25表达水平(P0.01),明显增加CAR mRNA水平(P0.05)。与正常组比较,模型组血清游离胆固醇及甘油三酯水平水平显著增加(P0.01)。结论:葛花解酒涤脂汤能够显著改善小鼠AFLD,其作用机制可能与肝脏PXR及其调控基因CYP3A25表达的活化有关。