燃煤型氟中毒病区成人血清骨形态发生蛋白-2和骨形态发生蛋白-3水平的调查

目的探讨燃煤型氟暴露对成人血清骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和BMP-3表达的影响。方法于2013年9月,对贵州省六盘水市水城县陡箐乡(氟病区)和花嘎乡(对照区)成人进行氟斑牙诊断和尿氟检测,使用酶联免疫吸附法检测血清BMP-2、BMP-3浓度。结果燃煤型氟中毒病区成人氟斑牙检出率为72.58%(90/124),高于对照区[8.96%(6/67)],且病区成人尿氟浓度高于对照区,差异均有统计学意义(P0.01);病区成人血清BMP-2、BMP-3浓度与对照区比较,差异均无统计学意义(P0.05);氟病区及对照区成人血清BMP-2、BMP-3浓度在不同性别间比较差异无统计学意义(P0.05);氟病区18~39岁组成人血清BMP-2浓度较对照区高,差异有统计学意义(Z=-2.186,P0.05);而其余各年龄段成人血清BMP-2、BMP-3浓度均无明显变化。氟病区成人血清BMP-2、BMP-3浓度在不同氟斑牙分度及尿氟浓度间比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论过量的氟可能导致成人血清BMP-2浓度升高,氟可能是影响血清BMP-2表达的因素之一。     

氟化钠对大鼠成骨肉瘤细胞UMR-106成骨活性标志物的影响

目的研究氟化钠(Na F)对大鼠成骨肉瘤细胞UMR-106成骨活性标志物的影响。方法体外培养的UMR-106细胞,分别以0,500,1 000,2 000μmol/L Na F处理24h、48h、72h。应用实时荧光定量PCR法检测各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、I型胶原蛋白(Col I)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)mRNA的表达;采用磷酸苯二钠法及蛋白免疫印迹法检测各组ALP活性和Col I、Runx2蛋白表达。结果 Na F处理UMR-106细胞24h后,各浓度Na F均能刺激BGP基因表达;与对照组比较,Na F浓度高于1 000μmol/L时,ALP、Runx2、BMP-2基因表达减弱;Na F处理72h后,500μmol/L组ALP、Runx2、BGP基因表达上调;Na F处理48h、72h后,当Na F浓度高于1000μmol/L时,ALP、Runx2、BMP-2表达及Ⅰ型胶原的合成随着Na F浓度的增高,抑制作用逐渐增强。UMR-106细胞及细胞培养液中ALP活性在24h 2 000μmol/L组及48h,72h 1 000μmol/L组明显升高,随着Na F浓度的升高,UMR-106细胞Col I蛋白的表达呈下降趋势。Runx2蛋白在2 000μmol/L组降低,差异有统计学意义。结论氟化钠对成骨肉瘤UMR-106细胞成骨活性具有双向作用,与氟化钠剂量及细胞因子间联合作用有关。     

氟化钠对大鼠成骨肉瘤细胞增殖活性及碱性磷酸酶活力和骨钙素mRNA表达的影响

目的探讨氟化钠(NaF)对成骨样细胞大鼠骨肉瘤(UMR-106)细胞增殖活性及主要成骨活性标志物碱性磷酸酶(ALP)活力和骨钙素(BGP)mRNA表达的影响。方法将处于对数生长期的UMR-106细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、5×10、10~2、5×10~2、1×10~3、5×10~3、1×10~4、2×10~4、4×10~4、8×10~4μmol/L NaF的DMEM培养液中孵育24、48 h,采用CCK-8检测细胞活性。将处于对数生长期的UMR-106细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、1×10~3、2×10~3、4×10~3μmol/L NaF的DMEM培养液(不含FBS)继续培养12、24、48 h,测定细胞培养液和细胞ALP的活力及细胞中BGP mRNA的表达水平。结果与对照组比较,1×10~3~8×10~4μmol/L NaF染毒24 h和5×10~8×10~4μmol/L NaF染毒48 h时大鼠UMR-106细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.05)。5×10、1×10~3、5×10~3、1×10~4、2×10~4μmol/L NaF染毒48 h时大鼠UMR-106细胞的存活率均低于染毒24 h时,差异有统计学意义(P0.05)。各浓度NaF染毒组UMR-106细胞培养液和细胞中ALP活力均较对照组高,除1×10~3μmol/L NaF染毒24 h的细胞培养液和1×103μmol/L NaF染毒48 h的细胞内ALP活力外,差异有统计学意义(P0.05)。随着NaF染毒浓度的升高,UMR-106细胞培养液和细胞中ALP活力均呈上升趋势;随着NaF染毒时间的延长,细胞培养液中ALP的活力呈上升趋势,而细胞中ALP的活力呈先升高后下降的趋势。2×103、4×103μmol/L NaF染毒组UMR-106细胞的BGP mRNA表达水平均较对照组高,差异有统计学意义(P0.05)。随着NaF染毒浓度的升高,UMR-106细胞BGP mRNA的表达水平呈上升趋势;随着NaF染毒时间的延长,UMR-106细胞BGP mRNA的表达水平呈下降趋势。结论在本实验浓度下,NaF对UMR-106细胞的增殖呈抑制作用,但可促进其成骨活性标志物ALP活力及BGP mRNA的表达。     

氧化苦参碱对砷致大鼠脑组织氧化损伤的影响

目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对砷暴露大鼠脑组织氧化损伤的影响。方法将64只健康成年清洁级雄性Wistar大鼠按体重随机分为4组,分别为正常对照(去离子水)组、亚砷酸钠染毒(5.0 mg/kg)组和低(25 mg/kg)、高剂量(50 mg/kg)氧化苦参碱干预组,每组16只。亚砷酸钠染毒组和各剂量氧化苦参碱干预组采用经口灌胃的方式进行染毒,每天1次,每周6 d,连续染毒16周。适应性喂养1 d后,各剂量氧化苦参碱干预组采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,每周6 d,连续染毒8周;亚砷酸钠染毒组灌胃去离子水。分别于亚砷酸钠和氧化苦参碱染毒结束后,每组选择8只大鼠,检测脑组织总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)水平、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和砷、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果在亚砷酸钠染毒及OMT干预结束后,亚砷酸钠染毒组和各剂量OMT干预组大鼠的脑砷含量均高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);亚砷酸钠染毒组和各剂量OMT干预组大鼠的脑砷含量间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。在亚砷酸钠染毒及OMT干预结束后,与正常对照组比较,亚砷酸钠染毒组和各剂量OMT干预组大鼠脑组织T-SOD水平、GSH-Px活力均较低,而MDA含量均较高,差异有统计学意义(P0.05)。在OMT干预结束后,与亚砷酸钠染毒组比较,各剂量OMT干预组大鼠脑组织T-SOD水平、GSH-Px活力均较高,而MDA含量均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着OMT染毒剂量的升高,亚砷酸钠染毒大鼠脑组织T-SOD水平、GSH-Px活力均呈上升趋势,而MDA含量呈下降趋势。结论 OMT能有效地拮抗砷致大鼠脑组织的氧化损伤作用。