异柠檬酸裂解酶的制备及其抑制剂筛选模型的建立

目的 制备结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶(isocitrate lyase,ICL)并建立ICL抑制剂筛选模型.方法 通过四步层析法或金属螯合层析法纯化大肠埃希菌BL21(DE3)表达的ICL,并以异柠檬酸为底物,用纯化的ICL裂解舁柠檬酸,生成乙醛酸可与苯肼反应生成苯腙,苯腙在324nm波长下产生光吸收峰,测定酶促反应体系在324nm波长下光吸收检测异柠檬酸裂解酶的活性,根据待测样品对酶活性的抑制程度,筛选异柠檬酸裂解酶抑制剂.结果 用金属螯和层析法得到纯度为90%、比活力为2.8U/mg的ICL,建立并优化ICL抑制剂筛选模型,模型的信噪比(S/N)远大于3,变异系数(CV)远小于10%.结论 通过金属螯合层析法获得了特异性高、稳定性好的ICL抑制剂筛选模型,该模型可有效的应用于异柠檬酸裂解酶抑制剂的高通量筛选.     

耳后带蒂肌皮瓣在外耳道成型术中应用

外耳道成型术常因皮瓣选择不当 ,形成挛缩疤痕致外耳道狭窄或闭锁 ,远期疗效往往不够理想。本文将我科从 1993年 10月～ 1999年 10月 ,6年间因外耳道狭窄或闭锁行耳后全层带蒂肌皮瓣外耳道成型术2 1例 2 1耳进行分析如下。1　临床资料1·1　一般资料　男 13例 ,女 9例 ,年龄 6～ 64岁 ,住院天数 15～ 4 2ｄ ,平均 2 8 5ｄ。因外耳道肿瘤 (乳头状瘤、皮脂腺囊肿 )摘除术、外伤及烧伤后闭锁狭窄 11耳 ,中耳胆脂瘤、肉芽行乳突根治术继发闭锁狭窄 6耳 ,先天性外耳道闭锁 4耳。 2 1耳中 ,12耳为第一次外耳道成型术 ,9耳为第二次外耳道成型术。狭…     

溶脲脲原体蛋白UreG抗体对小鼠体外受精的影响

目的:探索与人精子膜存在交叉反应的溶脲脲原体蛋白UreG抗体对小鼠体外受精的影响。方法:提取溶脲脲原体总DNA,用自行设计的引物扩增UreG全序列,PCR产物经TA克隆后,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切,克隆到表达载体pET-28a(+)中。在E.coliBL21中,异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达His融合蛋白。用亲和层析纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,获取多克隆抗体。观察该抗体对小鼠体外受精的影响。结果:对表达重组蛋白的质粒进行DNA测序以及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,证实获取了目的蛋白。ELISA检测证实,免疫小鼠产生了高效价的抗体。该抗体能够抑制小鼠精卵的融合。结论:与人精子膜存在交叉反应的溶脲脲原体蛋白UreG抗体,可导致小鼠精卵结合率降低。     

16例气管癌误诊原因分析

我院自 1 990年 5月至 1 999年 1 0月 ,共收治原发性气管癌 (下称气管癌 ) 2 1例 ,其中 1 6例被误诊 ,报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　 1 6例患者中 ,男 1 0例 ,女 6例 ,年龄32～ 66岁 ,平均 4 9岁 ,主要临床表现有咳嗽、气急、咳血或咳中带血、胸痛、发热等 ,行胸部后前位Ｘ线摄片 ,两肺纹理增多紊乱者 4例 ,纵隔块状阴影者 2例 ,肺内结核者 2例 ,其余均未见异常。行气管平面体层摄影者 7例 ,6例显示气管肿块影 ;行ＣＴ检查者 1 2例 ,1 0例显示气管内块状影。经纤维支气管镜检查 ,细胞学及病理学确诊为鳞癌 8例 ,腺样囊性癌 5例 ,腺…     

α-L-艾杜糖苷酶活性测定诊断粘多糖贮积症I型

目的:用二种酶活性测定方法诊断粘多糖贮积症I型(MPS I)患者及杂合子.方法:用4MU-α-L-iduronide及phenyl-α-L-iduronide二种底物测定临床疑似MPS I型的患者及杂合子的白细胞α-L-艾杜糖苷酶活性,与正常人对照做出诊断.结果:用4MU-α-L-iduronide做为底物,α-L-艾杜糖苷酶活性正常人均值为1 h 14.98nmol/mg蛋白,杂合子7.01,患者范围0～0.09.用phenyl-α-L-iduronide做为底物,正常人均值为18 h 225 nmol/mg蛋白,杂合子均值为125,患者范围0～7.7.结论:二种方法均可以应用于MPS I型诊断,以荧光法为优.phenyl-α-L-iduronide法诊断杂合子宜慎重.     

微生物转化植物甾醇产物20-羟基-23,24-二降胆-4-烯-3-酮的鉴定

目的：鉴定微生物转化植物甾醇过程中一未知产物的结构。方法：将待鉴定产物用柱色谱、制备HPLC分离纯化后送质谱、^1H-NMR、^13C-NMR、Dept、Cosy和Noesy分析。结果：待鉴定产物为20-羟基-23，24-二降胆-4-烯-3-酮。结论：此产物为胆固醇边链切除过程中一中间产物的类似物。     

得力生注射液联合TP方案治疗非小细胞肺癌的临床获益分析

目的观察得力生注射液配合TP方案治疗中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的临床综合获益。方法联合组50例患者接受得力生注射液配合TP方案治疗,对照组48例单用TP方案;两组均以21d为1个周期,重复3个周期。结果联合组和对照组的有效率分别为52%和45.8%,两组差异无统计学意义（P〉0.05）;生活质量改善率分别为84%和%52.1%,两组差异有统计学意义（P〈0.05）;联合组主要毒副作用发生率低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论得力生注射液联合TP方案对进展非小细胞肺癌有效,对临床症状的改善,提高生存质量和减轻毒副作用均有较好的作用。     

超声评价原发性睾丸淋巴瘤

目的探讨原发性睾丸淋巴瘤的超声诊断价值。方法回顾性分析经病理证实的9例原发性睾丸淋巴瘤患者(7例患者单侧睾丸肿大伴有胀痛,2例患者双侧睾丸肿大伴胀痛)的超声声像图表现。结果超声检查显示3例患者病灶位于左侧,4例患者病灶位于右侧,2例患者病灶位于双侧,肿瘤大小为2.8~5.5cm;病灶均呈低回声,弥漫分布,占据大部分睾丸实质,彩色多普勒检查在病灶内部探及丰富的血流信号;8例超声诊断为睾丸恶性肿瘤,但未能作出睾丸淋巴瘤的诊断,1例误诊为睾丸炎症;7例患者经手术确诊,2例患者经超声引导穿刺活检确诊。结论原发性睾丸淋巴瘤的临床及超声表现无特异性,临床诊断需综合分析,对疑似病例应行超声引导下穿刺活检明确诊断。     

三维适形放疗治疗肺癌上腔静脉综合征23例

目的 探讨三维适形放疗在肺癌上腔静脉综合征治疗中的即期疗效和应用价值.方法 23例上腔静脉综合征患者第1～3周放疗为每次1.25～1.5Gy,每天2次,间隔6小时,每周连续照射5天;第4周开始适形放疗,设5～7个非共面照射野,90%等剂量线剂量为4～5Gy/次,3次/周.依肿瘤病理类型,完成根治性照射剂量65～75 Gy.结果 治疗2周、4周时症状缓解率为52.2%和89.1%,治疗后完全缓解率96.3%,未观察到严重的早期并发症.结论 适形放疗治疗较常规放射治疗并发症低,有较好的即期疗效,能被患者耐受,是治疗SVCS有效方法,值得临床推广应用.     

脾脏低回声病变的超声造影诊断

目的:探讨超声造影对脾脏低回声病变的诊断价值。材料和方法:经外周静脉团注声诺维(SonoVue),使用对比脉冲序列(CPS)技术,对9例脾脏低回声病变行超声造影检查。结果:2例脾血管瘤造影剂廓清慢于脾组织,实质期回声强于脾实质。5例脾淋巴瘤、1例脾转移癌及1例脾炎性假瘤造影剂廓清均快于脾组织,实质期回声低于脾实质。结论:超声造影对脾脏低回声病变的诊断和鉴别诊断具有一定的价值。