UpIb启动子-Smac重组体促膀胱癌细胞凋亡的实验动物研究

目的：探讨携带Smac基因的膀胱癌细胞特异性表达质粒peDNA3．1-UpIb promoter-Smac用脂质体包裹后注射到实验动物瘤体内的表达及促癌细胞凋亡的效应。方法：将人膀胱癌细胞株BIU-87注射到Balb／e-nu／nu雄性裸鼠的皮下，构建膀胱癌皮下移植瘤模型：当移植瘤长至直径约0．5era时，用脂质体将pcDNA3．1-Uplbpromoter-Smac包裹后隔天1次连续3次注射到瘤体内，间隔1天后，连续3天瘤体内注射适量丝裂霉素C诱导凋亡。设三组对照：单用脂质体质粒组、单用丝裂霉素C组和空白组。RT-PCR检测瘤组织SvaaemRNA的表达，免疫组织化学法检测瘤组织Smac蛋白的表达，苏木素伊红染色镜检、DNALadder带凝胶电泳分析和TUNEL-荧光标记检测观察瘤组织癌细胞的凋亡情况。结果：膀眈癌裸鼠移植瘤模型构建成功。瘤体内注射脂质体包裹的pcDNA3．1-Uplbpromoterm Smac后．与未注射脂质体质粒的对照组比较，Smac的表达增强约2．1倍：先注射脂质体质粒后丝裂霉素C处理和单用丝裂霉素C处理的瘤组织均可见典型的凋亡细胞，但前者的凋亡率为49．8％，显著高于后者的23．5％（P〈0．01）。结论：膀胱癌裸鼠移植瘤模型瘤体内直接注射脂质体包裹的pcDNA3．1-Uplbpromoter-Smac后，所携带的Smac基因能够在癌组织中有效表达，并对丝裂霉素C诱手的瘤细胞凋亡有显著的促进作用。该质柱配合丝裂霉素C等凋亡诱导药物的应用，可望为膀胱癌的靶向基因治疗提供一新的治疗模式。     

基于生物信息学分析转移性嗜铬细胞瘤的机制

目的通过生物信息学分析鉴定转移性嗜铬细胞瘤的关键基因及分析相关的生物学通路, 为临床诊断及治疗提供参考。方法从GEO数据库中下载51例样本(转移性嗜铬细胞瘤11例, 对照组40例)的RNA表达谱数据, 利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)分析识别与转移性嗜铬细胞瘤最为相关的模块。提取与转移性嗜铬细胞瘤密切相关的模块基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。接着, 以基因显著性(GS)>0.4;成员之间相关性(MM)>0.6为阈值对模块基因进行初步筛选。为了防止过拟合, Lasso回归算法对初步鉴定的基因进一步筛选。最后采用受试者工作特征(ROC)曲线计算数据集的曲线下面积(AUC)值。结果通过对数据集进行WGCNA分析, 共获得24个基因模块, 其中浅蓝色基因模块与转移性嗜铬细胞瘤相关性最高(r=0.65), 共包含218个基因。GO分析结果提示模块基因主要富集于细胞连接、细胞黏附分子等生物学功能;KEGG分析提示模块基因主要集中在"Wnt信号通路"等信号通路。对浅蓝色模块初步筛选, 得到候选关键基因77个。通过Lasso回归算法进一步分析...     

胸腺素β4基因沉默对膀胱移行细胞癌上皮间质转化的逆转作用

目的 观察胸腺素β4(Tβ4)基因沉默对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的逆转,探讨其在肿瘤侵袭转移中的作用机制.方法 使用针对Tβ4的慢病毒载体(knti-Tβ4)转染膀胱癌细胞株T24.采用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测Tβ4、整合素连接激酶(ILK)和上皮性标记基因E-cadherin、β-catenin的表达改变;Immunofluorescence法检测ILK、E-cadherin、β-catenin在转染后124细胞中的表达改变;细胞划痕实验、Boyden小室体外侵袭实验、AO/EB荧光染色法反映细胞转移潜能和凋亡的变化.结果 转染后48 h的T24细胞,Tp4、ILK、β-catenin mRNA或蛋白表达开始下降,以转染后96 h明显;而上皮标记基因E-cadherin在转染96h后,表达显著增加(P<0.05);Immunofluorescence显示ILK和β-catenin在细胞质、细胞核中表达减弱,而E-cadherin在胞膜中表达增强,细胞形态向正常上皮细胞转化;转染后的324细胞体外迁移能力与侵袭力下降[(10.4±1.2)%比(73.5±1.4)%],细胞凋亡增多(12.3%比36.6%).结论 肿瘤细胞中的Tβ4表达下调可以逆转肿瘤细胞的间质表型,而向正常上皮表型转化,降低肿瘤转移潜能.     

应用集中度与圆形分布法分析2012—2018年长沙市手足口病季节性特征

目的 探讨长沙市2012—2018年手足口病季节性特征,为制定手足口病防控措施提供科学依据。方法 对长沙市2012—2018年手足口病监测数据进行统计分析,采用集中度和圆形分布法分析其季节性特征。结果 2012—2018年长沙市共报告205 988例病例,年均报告发病率是389.91/10万。发病人群以<4岁儿童(83.34%)为主,以散居儿童(75.29%)和幼托儿童(21.71%)为主。发病集中度M=0.32具有一定的季节性;圆形分布r=0.31,α=175.82°(87.02°,264.62°)(Z=18 648.533,P<0.001),发病高峰日为6月27日,流行高峰期为3月29日—9月25日。结论 2012—2018年长沙市手足口病发病具有一定的季节性,应在该疾病流行期前和流行期间加强重点人群防控。     

曲古菌素A对肾癌细胞增殖及对去乙酰化酶1、金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察曲古菌素A(TSA)对肾癌细胞7860增殖抑制作用及对组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度(100、200、400、800nmol/L)、不同时间(12、24、36、48 h)TSA作用后7860细胞的抑制率.吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双重染色检测细胞凋亡.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测HDAC1、MMP9的表达.结果 不同浓度TSA作用24h后,细胞生长抑制率分别为32%、45%、58%、62%.TSA作用后部分细胞发生凋亡形态改变.HDAC1、MMP9基因在TSA作用后mRNA表达降低(P<0.01).与空白组、阴性组比较,HDAC1蛋白在TSA作用后表达分别下调18.6%～87.5%(P<0.01)、21.3%～91.4%(P<0.01),MMP9蛋白表达分别下调24.6%～95.7%(P<0.01)、20.8%～89.2%(P<0.01).结论 TSA可抑制肾癌细胞增殖,并可能通过下调HDAC1、MMP9的表达抑制细胞的增殖.     

血β—HCG联合孕酮测定在异位妊娠诊断中的价值

目的探讨同时检测血清人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）和孕酮（P）在异位妊娠早期诊断中的价值。方法将确诊异位妊娠病人32例以及正常宫内妊娠者20例,同时检测并比较两组患者血清β—HCG并进行统计学处理。结果宫内孕组和宫外孕组血p—HCG均升高,宫外孕组略低于宫内孕组,两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;而P值,宫外孕组明显低于宫内孕组,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血β—HCG联合P测定对异位妊娠的诊断有重要意义。     

流行性感冒数学建模研究进展

由于缺乏无干预情况下的疫情数据,流感防控策略(包括药物干预和非药物干预)的效果很难通过传统的流行病学设计得以评价。因此,数学建模成为了制定和评估流感流行应对策略的重要手段。现按照流感疫情和流感监测归类,对近年来常用模型研究与热点进行归纳,综述各类数学模型的研究现况,为流感数学建模提供参考。