红细胞置换加量子血疗法抢救重度一氧化碳中毒4例

红细胞置换加量子血疗法抢救重度一氧化碳中毒４例６２８０１７四川省广元市急救中心王永芬张进王明蓉本中心从１９９６年１２月～１９９７年６月共收治重度一氧化碳（ＣＯ）中毒患者４名，经采用红细胞置换加量子血疗法（ＵＢＩ）取得确切疗效，现报告如下。１临床资料与...     

抗体药物的设计及其研究进展

先进的展示技术为重组抗体的筛选和改造提供了有效而灵活的方法.通过展示技术可以获得更适用于诊断和治疗的优化分子,而后者不能直接通过动物免疫接种的方式获得.展示技术可通过自动化或与新一代测序技术和阵列技术联合应用得到进一步提高,形成高通量筛选技术平台,用于筛选多种对应大量基因组编码靶标的抗体.从头设计抗体已开始成为制造新抗体的一种策略,但仍具有技术挑战性.然而,抗体-抗原结构数据库的不断增加和计算工具的不断开发,都表明这些挑战是可以克服的.预计未来以物理分子模拟知识为基础的计算方法,将成为提高抗体设计准确性和成功性的主要驱动力.     

调和胃气法治疗失眠临床体会

《内经》曰：“胃不和则卧不安，此之谓也。”笔者从多年临床实践中体会到，凡以失眠为主的神经衰弱患者，在其发病过程中，多兼纳差、脘腹胀满、胸闷嗳气、呕吐吞酸、大便失调等胃气不和症状，这正与以上经文所论相吻合，据此以调和胃气法治之屡获佳效，现介绍如下。     

长效重组人胰岛素原类似物的高密度细胞培养的研究

本文以长效重组人胰岛素原类似物(SIIA-0801)的大肠埃希菌工程菌为研究对象,针对采用高细胞密度培养技术表达包涵体重组融合蛋白的关键参数,重点研究了诱导培养基成份(包括碳源、氮源、无机盐、微量元素)、种子细胞密度、IPTG诱导剂的加入量及诱导时间,诱导温度等因素与包涵体表达产量的相关性。结果发现其融合蛋白的最佳表达培养基:1.5%蛋白胨,1%酵母粉,0.5%NaCl,0.8%葡萄糖和0.2%磷酸盐缓冲液(22mmol/LKH2PO4,40mmol/LK2HPO4)。最佳诱导表达条件为:25%接种量,诱导温度37℃,接种培养1h后添加0.5mmol/L     

替考拉宁生物合成的研究概况

本文综述了近年临床上用于治疗多重耐药菌感染的糖肽类抗生素--替考拉宁的研究状况,其中包括其化学结构、产生菌的发现和高产菌株的不同选育方法、发酵培养基及培养条件的优化、前体物质的添加对替考拉宁各个单组分生物合成的影响以及替考拉宁的发展前景.     

miRNA及其在医药领域应用的研究进展

miRNAs(MicroRNAs)是一类内生性、序列结构进化上高度保守、长度为20-23nt(核苷酸)的非编码性质单链小分子RNA,广泛存在于真核生物.miRNA在生命活动中具有必不可少的调节作用,主要包括个体时序性发育、细胞增值、分化、凋亡、器官发育、脂肪代谢、激素分泌、神经系统发育,并与肿瘤产生等密切相关.本综述主要涉及miRNA结构特征、分子生物学功能、生物合成过程及其在疾病治疗、新药研发等相关领域的研究进展.     

精氨酸和缬氨酸在替考拉宁生物合成中的作用

在替考拉丁的生物合成过程中，加入０．０４％的Ｌ－精氨酸哐０．０６％的Ｌ－缬氨酸可明显提高抗生素产量。其中，Ｌ－精氨酸能增加替考拉丁５个结构相关化合物的产量，而Ｌ－缬氨酸主要提高替考拉宁２－２（ＴＡ２－２）的含量。     

大肠埃希菌周质抗体细胞释放工艺方法研究

本文应用细胞裂解液提取法、超声波细胞破碎法、细胞冻融法、bugbuster提取法和高压细胞破碎法,对比研究了从大肠埃希菌周质中提取可溶性抗体的相关参数,并通过SDS-PAGE电泳,BCA蛋白浓度测定和ELISA法检测了上述四种方法的有效性。结果表明,对于试验室小试规模的抗CEA抗体的细胞释放,超声法破碎,提取的目的抗体量最多,优于细胞裂解液提取法,冻融法和bugbuster法,最佳条件为：细胞缓冲液与湿菌体的比例为     

替考拉宁产生菌TA2—2组分高含量菌种的推理选育

以缬氨酸氧肟酸为筛选剂，对替考拉宁产生菌替考游动放线菌（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ ｔｅｉｃｈｏｍｙｃｅｔｉｃｕｓ）进行了推理选育，获得了发酵总效价和ＴＡ２－２组分含量均较出发菌株高的缬氨酸氧肟酸抗性变株９８－１－２２７。传代试验表明菌株０２２７的遗传特性较。对菌株９８０－１０２２７和出发菌株９７－４－７４的形态、生代特性进行比较。     

应用核糖体展示技术高效筛选人源抗IgE单链抗体

本研究从哮喘患者外周血分离淋巴细胞、提取总mRNA,采用RT-PCR技术分别构建重链可变区VH(variable region of heavy chain)和轻链可变区VL(variable region of light chain)cDNA库,然后通过连接肽(Gly4Ser)3和特定引物将VH和VL cDNA基因组装成人源单链抗体(scFv)核糖体展示模板基因库。应用兔网织红细胞核糖体展示技术,单引物原位反转录技术,经3轮展示富集并回收针对人源IgE蛋白(免疫球蛋白E)的目的单链抗体基因;回收的抗体基因经双酶切后与pET22b(+)载体连接,转化至E.coli Rosseta(DE3)宿主细胞,应用菌落PCR结合Dot blotting技术快速鉴定阳性克隆,抗原ELISA法进一步鉴定阳性克隆。VH和VL基因库得到正确的构建,长度分别为400和710 bp,库容为1013。核糖体展示模板构建正确,长度为1 100 bp。该基因库经过3轮针对IgE蛋白的核糖体展示,目的基因得到了有效富集和回收。经过高效克隆、表达和鉴定,确定1株针对人IgE蛋白显示最强亲和力的阳性克隆菌pET-IgE-6。经测序和序列分析证实该单链抗体为人源抗体,序列未见国内外报道。结果表明,采用患者外周血构建人源抗体基因库,结合核糖体展示技术,可以成功获得高亲和力的人源单链抗体分子。该技术路线为快速获得具有药用价值的人源抗体提供了参考。